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CRISPR/Cas9介导的基因编辑已经被证明可以通过破坏病原体的基因来有效地抑制感染。西南大学的DONG Z等学者最近构建了表达CRISPR/Cas9的家蚕转基因系和以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)为目标的sgRNA,以调节家蚕早期基因的表达。通过G,代杂交获得4个转基因杂交系:Cas9(-)/sgRNA(-),Cas9(C)/sgRNA(-),Cas9(-)/sgRNA(C)和Cas9(C)/sgRNA(C)。研究证明了Cas9(C)/sgRNA(C)转基因系有效地编辑了家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组的目标位点,并在BmNPV感染后观察到大片段缺失。研究者进一步对Cas9(C)/sgRNA(C)转基因系的抗病毒分析表明,半致死剂量(LD_(50))比正常接种包涵体后的值高出1 000倍。作者分析了Cas9(C)/sgRNA(C)转基因杂交系的经济性状和脱靶效率,与正常水平无显著差异。作者的研究表明CRISPR/Cas9介导的基因编辑可以更有效地靶向家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组,并可作为一种昆虫抗病毒的方法。 相似文献
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性别决定是一个分级管理的过程,包括昆虫在内的不同生物具有高度的多样性。在鳞翅目昆虫家蚕中,由W染色体衍生的FempiRNA被鉴定为主要的性别决定因子,它揭示了一个独特的piRNA介导的性别决定途径。然而,家蚕性别决定的综合机制目前尚不清楚。中国科学院昆虫发展与进化生物学研究中心的LI Z等研究发现蚕蛹蛋白BmSiwi是决定家蚕性别的关键,而不是BmAgo3。CRISPR/Cas9介导的BmSiwi的敲除导致发育中性别阻滞和部分雌性性别逆转,而BmAgo3耗竭只影响卵子发生。研究者鉴定了3种组蛋白甲基转移酶(HMTs),它们在BmSiwi突变蛾中显著下调。其中一种HMT是BmAsh2,引起了piRNAs和转座因子(TEs)的失调,支持了它在piRNA信号通路中的作用。更重要的是,研究发现BmAsh2突变导致了性别发育阻滞和部分雌性对雄性的性别逆转,以及性别决定基因Bmdsx和BmMasc的失调。其他两种HMT是BmSETD2和BmEggless,它们的突变并不影响piRNA介导的性别决定。组织学分析和免疫沉淀结果支持BmAsh2和BmSiwi蛋白之间的功能相互作用。试验数据首次提供了证据,证明组蛋白甲基转移酶(HMT)BmAsh2在piRNA介导的蚕蛹性别决定中起关键作用。 相似文献
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日本黑薯是我国1998年通过有关部门从日本引进的新品种,其口感细腻,食味极佳、营养成分高,并含有抗癌物质硒,已经证明具有抗癌、降压补钙等显著功效,是开发保健医疗食品的又一新原料,也是大宾馆饭店的上等食品,在提取植物色素方面也是不可多得的好原料。日本黑薯叶心脏形,缺刻,叶色紫绿,茎蔓细长、紫黑色,薯形纺锤形,薯皮紫黑色,肉紫黑鲜艳,其茎尖和叶、梗都可作为蔬菜食用,在国外被誉为“太空保健食品”。该品种抗病、抗旱、抗涝胜能强,结薯均匀,一般每株结薯4~5个,单薯重200~500g,春薯667m~2产量… 相似文献
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为建立一种特异、快速的媾疫锥虫检测方法,本研究通过PCR方法从马媾疫锥虫动基体基因组中扩增得到395 bp的特异的保守序列,将其克隆到pMD-18T载体中构建重组质粒标准品,以10倍倍比稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立马媾疫锥虫荧光定量PCR的检测方法。结果表明:该方法的检测灵敏度可达到1拷贝/μL,并且与马属动物其他传染病无交叉反应。其组间及组内变异系数分别小于3.183%和3.842%。该方法的建立为快速及特异性检测马媾疫锥虫提供了有效的方法。 相似文献
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根据传染性造血器官坏死病毒(IHNV)基因序列,设计了IHNV最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了IHNV焦磷酸测序检测方法。对所构建的IHNV焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测。结果表明,所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行IHNV检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RTPCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。 相似文献