茶叶微生物固态发酵中咖啡碱降解途径初探

为探究微生物作用下咖啡碱的降解产物与途径,将普洱茶发酵中筛选鉴定的Aspergillus sydowii NRRL250（聚多曲霉）、Aspergillus pallidofulvus NRRL4789、Aspergillus sesamicola CBS137324和Penicillium mangini CBS253.31等优势菌株分别接种至晒青毛茶进行单菌种固态发酵,并采用高效液相色谱（HPLC）测定咖啡碱、可可碱、茶碱的含量,探究微生物对咖啡碱代谢的影响;另外,基于UHPLC-QTOF-MS代谢组学技术,以灭菌处理组（ST组）和原料组（RM组）为对照,对聚多曲霉接种发酵样进行代谢组学分析。结果表明,A. pallidofulvus NRRL4789、A. sesamicola CBS137324和Penicillium mangini CBS253.31等优势菌株对咖啡碱等嘌呤类碱代谢均无显著影响,而在聚多曲霉接种发酵中,咖啡碱含量显著下降（P<0.05）,降幅达83.89%;茶碱含量显著增加（P<0.05）,发酵末期含量为(25.03±1.17) mg·g^-1;而可可碱保持基本稳定。由此可知,聚多曲霉对咖啡碱降解代谢有显著影响。采用UHPLC-QTOF-MS方法检出茶碱、3-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤等9种与咖啡碱降解相关的代谢物。在聚多曲霉作用下,茶碱、3-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤含量显著提高（P<0.05）。茶碱、3-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤和1-甲基黄嘌呤与咖啡碱及其相关代谢物的N-脱甲基化途径相关。1,7-二甲基尿酸、1-甲基尿酸与咖啡碱相关代谢物的氧化途径相关。由此可知,聚多曲霉为降解普洱茶咖啡碱的优势菌株,且具有将咖啡碱转化为茶碱的潜在能力;在咖啡碱降解代谢过程中,存在聚多曲霉作用下的N-脱甲基化和氧化,并以N-脱甲基化为主。     

普洱茶渥堆发酵中可降解咖啡碱真菌菌株的筛选和鉴定

为了在普洱茶渥堆发酵中筛选出可降解咖啡碱的菌株,采用咖啡碱液体筛选培养基从不同阶段普洱茶发酵样中筛选目标菌株,结合菌落特征、分生孢子结构以及18 S r DNA序列对目标菌株进行鉴定。并将目标菌株接种至茶叶内进行单菌种发酵,通过高效液相色谱法(HPLC)测定咖啡碱、茶碱、可可碱、3-甲基黄嘌呤等嘌呤碱含量。结果表明,在普洱茶发酵样中筛选出一株有效降解咖啡碱的菌株,此菌株在48 h内对咖啡碱的降解率为87.7%。经鉴定为聚多曲霉(Aspergillus sydowii),序列相似性为99.8%。在聚多曲霉茶叶单菌种发酵中,咖啡碱含量急剧下降,在发酵结束时仅占干物质重的(0.414±0.077)%;茶碱质量分数大幅度上升,由最初的不足0.1%上升至(2.129±0.246)%,成为主要的嘌呤碱;可可碱含量无显著变化(P0.05);3-甲基黄嘌呤有大幅度增加,增幅达130%。本文首次从发酵茶叶中筛选出可降解咖啡碱的菌株,探究了微生物发酵中咖啡碱的转化产物,为低咖啡碱普洱茶的开发提供了菌种。     

黑曲霉发酵对咖啡碱代谢的影响

普洱茶固态发酵过程的实质是微生物代谢作用,而黑曲霉在代谢中为优势菌,对咖啡碱代谢产生巨大影响。以黑曲霉为单一菌种,分别接种到茶叶、茶汤和含咖啡碱的液态培养基,并测定不同发酵阶段嘌呤碱的含量。结果表明,黑曲霉对茶叶碱的影响大于可可碱,对可可碱的影响大于咖啡碱,在咖啡碱液态培养基发酵中,茶叶碱增加幅度最大,且与咖啡碱浓度存在正相关性。     

施尔丰腐殖酸液肥在日光温室黄瓜应用效果研究

摘要：根据日光温室无公害绿色食品生产要求，在日光温室黄瓜上应用绿色环保、高效、无毒、无残留、无副作用的“施尔丰腐殖酸液肥”试验显示，温室冬春茬黄瓜喷“施尔丰腐殖酸液肥”后，叶面积增加，有利于光合产物的积累，能满足黄瓜中后期对养分的需求，增产幅度为14．8％。     

太阳灶产业的现状与前景

人类已进入21世纪，在全球化经济的今天能源问题摆在世人面前，如何充分利用新能源已成为人们认真思考的问题。太阳灶作为太阳能家族成员之一，是取之不尽，用之不竭的可再生资源产业，具有清洁、环保等优点，深受广泛关注。自上世纪50年代第一台太阳灶的诞生，70年代开始批量生产引用。目前我国太阳灶产业发展迅猛，已成为推广应用最大国，尤其在西部大开发和新农村建设中，取得显著社会效益和经济效益，突出地体现了太阳灶在生态与环保方面的价值。     

辽西易旱区长效碳酸氢铵推广应用技术

我县位于辽宁省西部,属辽西易旱区,无霜期140～150天左右,年平均降雨量400～500mm,作物追肥时一般高温干旱,作业极不方便,农民常因干旱不能及时追肥,造成作物减产,为此我们在1997年开始引进了新型肥料长效碳酸氢铵,可做底肥一次性施入或早期一次性深施,不再追肥,初试获得成功.肥效释放平稳,省工、省肥,投入成本低,得到农民认可,取得了明显的经济和社会效益.     

春胡萝卜无公害高产栽培技术

胡萝卜为半耐寒性蔬菜,在北方地区的传统栽培方法为夏秋季栽培,初冬收获。但由于收获后贮藏时间长,立春后易生芽、空心,造成养分损失,口感性差,不利于周年供应。自2001年以来,我市先后种植春胡萝卜100多hm2,产量75000～105000kg/hm2,收入30000～45000元/hm2,效益相当可观。其主     

塑料大棚甜椒栽培品种、密度和播期试验

本文叙述了围绕甜椒的品种、播种期和密度为因子,对其综合高效栽培技术进行了研究,以达到提早上市,提高产量产值的目的。