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甘蓝型油菜柱头特异启动子的克隆和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
芸薹属自交不亲和相关基因SLR1只在柱头中特异表达,根据已知的SLR1基因启动子序列设计特异引物,用PCR法从几个甘蓝型油菜品种和品系中分离得到相应的启动子片断,进行序列比较分析后,并构建它们与GFP融合的植物表达载体,转化拟南芥,验证所分离到的启动子的时空特异性。研究表明,来自自交不亲和羽衣甘蓝和来自自交亲和的甘蓝型油菜的SLR1启动子具有相似的序列结构和相同的组织特异表达功能。该结果将为下一步研究S-locus基因在甘蓝型油菜中的表达和相互作用奠定基础。 相似文献
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优化反向PCR法分离转基因油菜外源T-DNA侧翼序列的研究(英文) 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]优化反向PCR(IPCR)条件分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。[方法]以单拷贝的转基因油菜FS4为研究材料,用SDS法和改良CTAB法(包括低温操作、增加酚氯仿的抽提次数以及延长低温沉淀时间等)提取转基因油菜总DNA,并进行酶切、纯化、自连接,再使用普通聚合酶与热启动高保真的ExTaqHS聚合酶进行两轮巢式PCR扩增,进行序列对比。油菜数据库比对搜索采用BBSRCBrassicaDB上WU-BLAST2.0工具,拟南芥数据库比对分析采用TAIR数据库中WU-BLAST2.0工具。为验证FS4转基因中T-DNA插入位点的真实性,根据序列比对分析结果在T-DNA插入位点的左右两端分别设计引物FS4-L与FS4-R。分别采用3对引物pS2/FS4-L、pA2/FS4-R、FS4-L/FS4-R同时对T1代转基因FS4杂合体和非转基因对照植株的基因组进行PCR验证。[结果]两轮巢式PCR扩增得到1个大小为4.0kb的片段,其序列与油菜数据库中BH652424和BZ044084两序列同源性分别高达97.8%和63.4%。根据序列比对结果设计特异引物对进行PCR验证的结果,也证明了FS4转基因油菜中T-DNA的确插入在该位点。[结论]优化后的IPCR条件能成功分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。 相似文献
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水稻WRKY19基因启动子功能研究初报 总被引:1,自引:1,他引:1
利用已获得的水稻WRKY19基因启动子(OsW19p::GUS)的转基因植株进行研究,分析了OsW19p在T1代苗期时的诱导表达特性,GUS荧光测定结果表明:OsW19p的表达可被ABA(100 μmol/L)、SA(500 μmol/L)、高温(42℃)、低温(5℃)和伤处理增强;被2,4-D(1μmol/L)、NaCl(200 mmol/L)和PEG4000(25%)处理抑制;IAA(5 μmol/L)、MeJA(100 μmol/L)和紫外线照射处理对OsW19p的表达几乎没有影响。OsW19p在转基因植株根中的表达水平高于35s,但在叶片中低于35s。OsW19p在转基因水稻扬花期茎部中表达水平最高,其次是花、叶鞘和叶片,在根部表达水平最低。 相似文献
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表达的hrmA蛋白质具有诱导水稻细胞产生防卫反应的活性 总被引:2,自引:0,他引:2
将丁香假单胞菌hrmA基因构建到原核表达载体pET 29中,得到重组载体pET hrmA。将重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,获得了以包含体形式存在的融合蛋白。复性的融合蛋白能诱导水稻悬浮细胞的活性氧迸发,处理20min后达到峰值。Northern杂交结果表明hrmA蛋白能显著地诱导PBZ1基因在水稻悬浮细胞中表达,在所观察的时间内PBZ1基因表达丰度随处理时间延长而增加,用hrmA处理水稻植株,诱导了PAL基因的表达。实验结果表明hrmA融合蛋白具有激活水稻细胞防卫反应的活性。 相似文献
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<正> 梨小食心虫又叫桃折梢虫,简称梨小,是一种重要的杂食性害虫,可为害梨、桃、李、杏、樱桃、批枇杷多种果树,在我国南北各水果产区普遍发生,特别是在我国南方多种果树混栽区发生较重。 1.梨小食心虫的发生规律和生活习性。梨小食心虫成虫灰褐色,体长6~8毫米,翅展10~12毫米,幼虫淡红色,老熟后长10~13毫米,该虫在我国南北各 相似文献
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为降低油菜种子中的亚油酸和亚麻酸含量并使之在异交条件下保持基本稳定,以高油品种CY2作为受体亲本,采用RNA干涉技术沉默油菜内源Bn FAD2基因的表达,抑制油酸脱饱和反应。育成的3个独立转基因株系的亚油酸和亚麻酸含量下降到6%以下,其中亚油酸含量较受体亲本降低78.2%~86.5%,亚麻酸含量降低53.4%~65.8%。将3个转基因株系与2个亚油酸和亚麻酸含量较高的常规品种正反交,F1种子中这2种脂肪酸的含量依然保持在与转基因亲本相仿的低水平。由此可知,通过RNA干涉技术沉默Bn FAD2基因的表达可赋予油菜低亚油酸和亚麻酸含量的异交稳定特性。这一特性的获得对于今后培育异交稳定的高油酸油菜新品种具有重要意义。 相似文献
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从 1991年开始 ,我们二分场陆续对苹果、葡萄进行更新 ,定植砀山酥梨 ,累计栽植16 0 hm2 ,目前 4~ 7年生幼树每 6 6 6 .7m2 (亩 )产已达 15 0 0~ 35 0 0 kg,现将栽培管理技术总结如下。1 整地改土 ,施足底肥1.1 平整土地 老树刨除后 ,平整土地 ,起高垫低 ,以能够均匀浇水为原则 ,并结合客土 ,使地力均匀。1.2 挖定植沟 按设计的行距 ,挖深、宽各80 cm的定植沟 ,并将表土和深层土分放沟两边。1.3 沟内填草 依沟长每米填 3~ 4kg麦草或玉米秸 ,增加有机质。为促进分解 ,可撒入少量的速效性氮肥 ,秸秆最好分两层填入 ,以利分解和沟土… 相似文献
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杏原产我国,是古老的栽培果树树种之一。其适应性强,分布范围广,品种资源十分丰富,现存品种和类型约2000余种,生产栽培上利用且品质优良的有150种以上。杏开花早,果实成熟于水果供应淡季的初夏,对调节鲜果市场供应具有重要作用。除鲜食外,杏果可制成各种加工品,如杏干、杏脯和杏汁等。在我国南方,杏树多为零星分散栽培,市场上难见批量鲜果,开发潜力很大。 相似文献