盐生经济作物北美海蓬子与盐渍地生态环境改造

北美海蓬子Salicornia bigelovii属于藜科海蓬子属植物,是一种耐盐性极强的真盐生植物,它最佳生长的Na 浓度范围很广,同时又是一种极具开发潜力的经济作物。大面积种植北美海蓬子不但可以恢复和改造海岸带生态环境、治理沙漠化、充分利用盐碱地、实现资源的可持续利用,而且由于北美海蓬子本身所具有的巨大经济价值,将为农民发展生态产业脱贫致富创造极好的机会。为此就北美海蓬子经济价值,北美海蓬子种植技术、耐盐机理和分子生物学方面的研究进展,北美海蓬子开发前景作一综述。     

北美海蓬子Na+/H+逆向运输蛋白基因的克隆及拟南芥转化分析

Na /H 逆向运输蛋白在植物耐盐性方面起着极为重要的作用.根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从真盐生植物北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)中克隆出包括有1683bp的完整编码区在内的2 591 bp(GenBank登陆号为DQ157454)的Na /H 逆向运输蛋白基因(SbNHX1)cDNA序列.将该基因编码区序列构建到植物表达载体pVKH-35S-pA上,并通过农杆菌介导转化到模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,得到T3代转入单基因种子.200 mmol/L的NaCl胁迫培养结果显示,转基因拟南芥在200 mmol/L的NaCl胁迫条件下生长状况好于野生型植株,植物表现有一定的耐盐性.     

北美海蓬子盐胁迫条件下抑制差减文库构建与分析

北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)是一种耐盐性极强的真盐生植物,在200 mmol/L的Na 浓度下生长,其高度和含汁量是5 mmol/L Na 浓度下生长的2倍和2.5倍.为了研究北美海蓬子耐盐的机理和分离耐盐新基因,我们构建了在盐胁迫条件下北美海蓬子基因表达差异的SSH文库.以北美海蓬子种子播种于0 mmol/L NaC1 MS液体培养基上幼苗(0号材料)的总RNA为Driver,200 mmol/L NaCl诱导24 h幼苗(2号材料)的总RNA为Tester,运用SMART PCR cDNA合成技术分别合成全长cDNA.将两种cDNA群体进行抑制差减杂交,用T/A法分别构建了盐胁迫相关基因的正向差减文库(205个克隆子)和反向差减文库(235个克隆子).通过PCR和反式Northern Dot.Blot消除假阳性和重复克隆子,得到在盐胁迫下特异表达的阳性克隆85个.对测序结果正常的81个克隆进行BLASTn分析,其中有70个cDNA序列与已经报道的其它物种的核酸序列具有较高的同源性;另外11个cDNA序列未找到有较高相似性的已知序列.81个cDNA序列中没有与北美海蓬子中已报道的核酸序列有较高的相似性,因此,所有81个克隆序列都是北美海蓬子中的新基因.