猪流行性腹泻病毒S蛋白原核表达及其单克隆抗体制备

本研究以猪流行性腹泻病毒(PEDV)全基因组为模板,利用RT-PCR方法扩增PEDV S基因的亲水区,将其克隆至pMAl-c2E原核表达载体,获得重组质粒pMAl-c2E-PEDV-S。经EcoRⅠ/SalⅠ双酶切测序鉴定后,转化BL21菌,经IPTG诱导,成功表达了约74 kDa的重组蛋白MBP-PEDV-S,亲和层析法纯化重组蛋白。将重组蛋白免疫3只健康的6～8周龄雌性BALB/c小鼠,将小鼠脾脏B淋巴细胞与SP2/0瘤细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,获得了4株能稳定分泌抗PEDV S蛋白抗体的杂交瘤细胞株1B11、1B10、1C8、3L3,其腹水效价都高于1∶100 000。获得的4株单克隆抗体与PEDV经IFA和Western blot检测,结果显示均具有良好的反应性。而且3株单克隆抗体重链为IgG2a,1株重链为IgG2b;3株轻链为Kappa,1株轻链为Lambda。本研究表达了PEDV S蛋白并制备了单克隆抗体,为研究S蛋白的结构和功能提供了条件,为揭示PEDV致病机制奠定了基础。     

鸡传染性法氏囊病二价活疫苗与国外囊病活疫苗免疫效力比较试验

鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）是一种引起３～１２周龄雏鸡和青年鸡的高度接触性病毒传染病,疫苗免疫接种仍是防制该病的最主要手段,但近年来,鸡传染性法氏囊病病毒血清亚型或变异株和超强毒株的出现,使常规的Ｉ型疫苗常常造成免疫失败［２,３,４］,针对这种情况,我...     

肉鸡腹水综合征的生理管理及环境触发因素

高氧需求以维持快速生长是导致肉用鸡肺高压介导性腹水症的主要原因。其他因素也可加重或触发腹水症。它们引起血流加快，因冷、热、特定营养、化学制剂等使代谢率增高而致，或导致血流受阻因血液粘度增大或红细胞僵直或肺中血容量下降而致。某些因素如高钠（饲料或饮水中的盐）也导致血流加快或血流受阻。降低腹水综合征发生应注意主要遗传性因素如肺部血量不足、高氧需求及引起血流加快和血流受阻的继发因素。１　生理学触发因素在检查肺高压（ｐｕｌｍｏｎａｒｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ＰＨ）介导性腹水症的生理学和解剖学的触发因素…     

猪传染性胃肠炎病毒的分子生物学研究进展

猪传染性胃肠炎病毒的分子生物学研究进展刘爵（北京农业大学）猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）可引起仔猪发生以呕吐、急性腹泻和脱水为特征的胃肠炎，该病对２周龄以内的仔猪具有高度致死性，给养猪业造成严重的损失。ＴＧＥＶ属于冠状病毒科冠状病毒属，呈多形性，表面...