非酯化脂肪酸与β-羟丁酸对体外培养牛肝细胞的结合珠蛋白和淀粉样蛋白-A浓度的影响

为了研究肝脏脂肪代谢产物非酯化脂肪酸(NEFA)及β-羟丁酸(BHBA)在奶牛酮病发生过程中变化,试验采用ELISA方法,应用NEFA和BHBA在体外处理犊牛肝细胞,研究不同浓度的刺激因子对急性期反应蛋白结合珠蛋白(HP)以及淀粉样蛋白-A(SAA)浓度变化的作用。结果:在体外培养牛肝细胞中添加不同浓度的NEFA,对急性期反应蛋白HP、SAA具有正调控作用,低浓度(0.6 mmol/L)、中浓度(1.2 mmol/L)的NEFA对HP、SAA浓度促进作用更为明显,而中、低浓度组之间比较差异不明显(P0.05),高浓度(2.4 mmol/L)的NEFA调控作用不明显;在体外培养牛肝细胞中添加不同浓度的BHBA,对急性期反应蛋白HP、SAA具有负调控作用(下调作用),在中等浓度(1.2mmol/L)时BHBA对HP、SAA浓度降低的促进作用更为明显,而中、低浓度组间对HP影响差异不显著,对SAA影响差异显著(P0.05),对照组(0 mmol/L)与高浓度(2.4 mmol/L)时的调控作用不明显。说明NEFA是促进脂肪肝和酮病状态下急性期反应蛋白(包括HP和SAA)产生增加的主导因素,BHBA具有一定的抑制作用,但总体上无法扭转NEFA的促进作用。     

铜对生长猪肝中IGF—Ⅰ基因mRNA表达的影响

采用生长试验、免疫放射分析和定量PCR方法，观察了生长猪血液中类胰岛素生长因子（IGF—Ⅰ）及其结合蛋白（IGFBP3）数量的变化和IGF—Ⅰ基因在肝中表达量的变化。结果显示，每1kg饲料中添加125-250mg铜，能够上调IGF-Ⅰ基因的表达量，显著提高猪的平均日增重，促进生长猪循环血液中IGF—Ⅰ浓度的增加。试验结果证实，铜是通过促进生长激素一胰岛素样生长因子轴相关因子的合成和分泌来发挥促生长作用的。     

奶牛隐性乳房炎诊断技术研究新进展

奶牛隐性乳房炎是由病原微生物等引起的一种炎症性疾病,严重制约着奶牛养殖业的健康发展,一度成为奶牛养殖业健康发展的瓶颈问题。奶牛乳房炎会导致奶牛产奶量下降、生产性能降低,并且在治疗过程中会产生高额医药费,还会带来食品安全隐患。为了科学、有效地防控奶牛隐性乳房炎,早期快速诊断该病意义重大。文章采用文献综述法,全面、系统地搜集了近年来奶牛隐性乳房炎诊断的先进方法,拟从病原检测法、乳汁检测法、微量元素检测法、酶学检测法、蛋白检测法以及分子生物学检测法等方法展开论述,以期为早期诊断奶牛隐性乳房炎提供技术支持。     

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF—I、IGFBP的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞，然后在细胞培养液中分别添加0、7．8、15．6、31．2、62．5μmol/L铜。结果表明，软骨细胞在4种浓度的铜中可存活并增殖，而且能增加胰岛素样生长因子（IGF－I）、胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP3）的分泌量。但随铜浓度的增加，其存活率、增殖率、^3H-TdR掺入率及IGF－I、IGFBP3的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加31．2μmol/L铜对软骨细胞的增殖作用最强，增殖率、^3H-TdR掺入数、IGF－I、IGFBP3的分泌量显著高于对照组9P＜0．01）。表明31．2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌IGF－I、IGFBP3的最适浓度。     

牛抵抗素基因的克隆及原核表达

从健康新生牛大网膜脂肪组织中提取总RNA,根据已发表的牛Resistin mRNA序列设计、合成引物,通过RT-PCR进行cDNA扩增,获得了343 bp的片段。将该片段克隆于pMD18-T载体后进行序列分析,确认PCR产物为牛Resistin cDNA。从阳性克隆中提取质粒,经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,回收343 bp的目的片段,定向克隆到pGEX-6P-1表达载体中,提取质粒并再次转化到BL21(DE3)中,成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出牛的Resistin基因的表达。     

p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响

本试验旨在探讨β-羟丁酸（BHBA）对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA（0、0．6、1．2、2．4mmol／L）,培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580（10pmol／L）预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2．4retool／L;PI／An—nexinV—FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase9、bcl2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1．2和2．4mmol／I—BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加（P〈0．01）。bcl2基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．05）;添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．01）,bcl-2基因mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。     

黏膜乳杆菌清除液体中玉米赤霉烯酮能力的研究

将黏膜乳杆菌1m4208进行活菌培养和灭活处理,在不同初始菌体浓度、不同pH值条件下与玉米赤霉烯酮进行作用,采用HPLC方法测定培养液上清ZEN含量,确定黏膜乳杆菌lm4208对ZEN的清除率及各因素的影响.结果表明,黏膜乳杆菌lm4208对ZEN毒素具有较高的清除能力,清除率为51％～60％,灭活菌可显著提高对ZEN的清除效果.无论活菌还是灭活菌,初始菌体浓度对其清除效果有显著影响,pH值对清除ZEN能力无显著影响.本试验结果为进一步研究该菌株在实际生产中清除玉米赤霉烯酮的应用奠定基础.     

菜籽饼中芥子油苷对动物生产性能的影响及去除方法

菜籽饼中含有32％～38％左右的蛋白质,菜籽蛋白质属于全价蛋白质,几乎不存在限制性氨基酸。其蛋白质中的必需氨基酸含量与联合国粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）推荐的标准非常接近。因此,菜籽饼是一种潜在的营养价值较高的植物蛋白质资源。     

奶牛生产疾病的早期诊断及群体监测

奶牛生产疾病（production diseases）是奶牛不能满足高产代谢需求所引发疾病的统称。奶牛生产疾病以往主要是指低钙血症、酮病、脂肪肝和低镁血症等主要的代谢病,现已将瘤胃酸中毒、真胃变位、胎盘停滞和蹄叶炎等疾病也纳入生产疾病范畴[1]。过渡期（围产期）是奶牛生产疾病的高发期。因此,生产疾病对奶牛的健康、生产性能和经济效益至关重要。     

RNAi及沉默通路调控研究进展

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是由双链RNA（double-stranded RNA,dsRNA）介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动物疾病中也有很大潜力。作者主要综述了RNAi的过程、小RNA的生物发生学及沉默通路的保护和调控。