2018年国内外蜂王浆研究概况

本文对2018年国内外蜂王浆研究概况进行了综述,对公开发表的65篇中英文文献及专利的地域分布和研究领域进行了统计分析和评述,并重点介绍了蜂王浆在化学组分、质量控制、生物学活性等领域的研究新进展。与2017年相比,2018年蜂王浆的研究热度回升,成果丰硕。     

意蜂多王群蜂王的产卵力研究

在采用生物诱导和环境诱导相结合的技术方法,成功组建多只蜂王在同一产卵区内自由活动、正常产卵的多王群基础上,通过对多王群单个蜂王和多个蜂王产卵力的研究发现,经生物诱导处理的单个蜂王的产卵力与未经处理蜂王的产卵力相比无显著差异,而3王群和5王群蜂王的产卵力分别是单个蜂王产卵力的222.94%和367.09%.结果表明,多王群是提高蜂群产卵力和王蜂指数的有效手段.     

国外牧草品种比较试验

在福建福清对34种国外牧草再次进行了为期3年的引种试验，结果表明：适用于福建推广的多年生优良牧草共16种。     

新型高产β-胡萝卜素巴斯德毕赤酵母表达宿主菌的构建

分泌型巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）作为高效表达宿主菌已被广泛应用,通过高密度培养工艺用于多种酶制剂(如植酸酶、甘露聚糖酶等)的规模生产。然而,在生产过程中产生的大量菌体利用率低,多数被废弃掩埋,或只能作为廉价的菌体蛋白,造成大量的资源浪费。为提高酵母发酵副产物的利用率,向毕赤酵母宿主菌GS115中导入来源于红发夫酵母（Xanthophyllomyces dendrorhous）β-胡萝卜素合成途径中的关键基因(idi、crtE、crtYB和crtI),获得了胞内高产β-胡萝卜素的工程菌株P. pastoris GS115-CARO,实现工业生产中的菌体蛋白的高附加值利用。同时以来源于嗜热篮状菌（Talaromyces leycettanus JCM12802）的甘露聚糖酶基因Man5T作为参照,验证了宿主菌P. pastoris GS115和P. pastoris GS115-CARO在表达外源蛋白的差异。结果表明：Man5T基因的导入并没有影响,两株宿主菌的甘露聚糖酶表达量（分别为280 U/mL和286 U/mL,P>005）,但宿主菌P. pastoris GS115-CARO胞内β-胡萝卜素产量高达到31.27 mg/g(菌体干重dry cell weight,dcw)。构建的工程菌株不仅可以实现外源酶制剂的高效表达,有效地提升酵母菌体资源的利用价值,同时也在一定程度上了解决了发酵菌体对环境的污染问题。     

蜂王浆新鲜度指标的研究进展

本文综述了国内外有关蜂王浆新鲜度指标的研究进展,并对今后的研究方向提出了建议.     

国外牧草品种比较试验

本文在福建福清对引进的３４种国外牧草进行３年比较试验结果表明：适用于福建推广的多年生优良牧草有以下１６种,豆科：大翼豆,柱花草,银合欢,白三叶;禾本科;卡松古鱼狗尾草,宽叶雀稗,罗得草,巴拉草,隐花狼尾草,几内亚草,青绿黍,毛花雀稗,草地羊茅,鸡脚草,多年生黑麦草。     

Population genetics and host specificity of Varroa destructor mites infesting eastern and western honeybees

In a globalized world, parasites are often brought in contact with new potential hosts. When parasites successfully shift host, severe diseases can emerge at a large cost to society. However, the evolutionary processes leading to successful shifts are rarely understood, hindering risk assessment, prevention, or mitigation of their effects. Here, we screened populations of Varroa destructor, an ectoparasitic mite of the honeybee genus Apis, to investigate their genetic structure and reproductive potential on new and original hosts. From the patterns identified, we deduce the factors that influenced the macro- and microevolutionary processes that led to the structure observed. Among the mite variants identified, we found two genetically similar populations that differed in their reproductive abilities and thus in their host specificity. These lineages could interbreed, which represents a threat due to the possible increased virulence of the parasite on its original host. However, interbreeding was unidirectional from the host-shifted to the nonshifted native mites and could thus lead to speciation of the former. The results improve our understanding of the processes affecting the population structure and evolution of this economically important mite genus and suggest that introgression between shifted and nonshifted lineages may endanger the original host.

     

低纤维素酶背景里氏木霉菌株的构建和应用

丝状真菌里氏木霉（Trichoderma reesei）产生的纤维素酶主要包括纤维二糖水解酶和内切葡聚糖酶。在使用里氏木霉表达外源基因时,它们会形成较高的纤维素酶背景,而且其表达还可能会导致对细胞转录、翻译和分泌等相关资源的占用。应用CRISPR/Cas9技术,在体外组装Cas9/gRNA复合物并转化里氏木霉以定点敲除主要的纤维二糖水解酶cbh1基因,同时结合RNAi干扰技术来沉默主要的内切葡聚糖酶eg2基因,以期一步构建里氏木霉低纤维素酶背景的表达系统。获得了一株纤维素酶表达显著下降的11号转化子SUS6。该转化子中,cbh1的表达完全消失,而eg2基因的表达水平较出发菌株SUS5降低了98%。以该转化子为宿主表达外源基因NfBgl3A,两个代表性转化子的β-葡萄糖苷酶酶活最高分别为172.4和79.3 U·mL^-1,远高于以出发菌株（高纤维素酶背景）为宿主表达β-葡萄糖苷酶酶活（两个代表转化子分别为11.6和31.9 U·mL^-1）。因此,构建低纤维素酶背景的菌株作为表达宿主,还可明显的提高某些异源基因的表达水平。     

低纤维素酶背景里氏木霉菌株的构建和应用

丝状真菌里氏木霉（Trichoderma reesei）产生的纤维素酶主要包括纤维二糖水解酶和内切葡聚糖酶。在使用里氏木霉表达外源基因时，它们会形成较高的纤维素酶背景，而且其表达还可能会导致对细胞转录、翻译和分泌等相关资源的占用。应用CRISPR/Cas9技术，在体外组装Cas9/gRNA复合物并转化里氏木霉以定点敲除主要的纤维二糖水解酶cbh1基因，同时结合RNAi干扰技术来沉默主要的内切葡聚糖酶eg2基因，以期一步构建里氏木霉低纤维素酶背景的表达系统。获得了一株纤维素酶表达显著下降的11号转化子SUS6。该转化子中，cbh1的表达完全消失，而eg2基因的表达水平较出发菌株SUS5降低了98%。以该转化子为宿主表达外源基因NfBgl3A，两个代表性转化子的β-葡萄糖苷酶酶活最高分别为172.4和79.3 U·mL^-1，远高于以出发菌株（高纤维素酶背景）为宿主表达β-葡萄糖苷酶酶活（两个代表转化子分别为11.6和31.9 U·mL^-1）。因此，构建低纤维素酶背景的菌株作为表达宿主，还可明显的提高某些异源基因的表达水平。     

蜂胶中酶活力的测定

根据蜜蜂在采胶过程中可能添加进了腺体分泌物,对蜂胶中α-淀粉酶、蔗糖酶、蛋白酶的活力进行了研究,以期从特征组分酶的角度探讨蜂胶真伪鉴别问题。试验结果表明:不同地区的蜂胶及混合蜂胶反应时间小于45min时,检测不到三种酶;当混合蜂胶、新鲜蜂胶反应时间达3h以上,未检测到α-淀粉酶,而在检测蔗糖酶和蛋白酶时测试管与阴性对照管出现明显色差,证明两种酶的存在,但活力较小。上述结果表明:要从这3种酶活力的角度来鉴别蜂胶真伪有很大的难度。