纽荷尔脐橙疑似耐寒突变体的初步鉴定与评价

【目的】鉴定纽荷尔脐橙疑似耐寒突变体是否发生了遗传性状变化,评价其耐寒能力是否较野生型增强。【方法】以纽荷尔脐橙突变体与野生型为试材,观测比较春梢叶片性状和果实外观性状,分析比较果实内在品质,应用SSR分子标记鉴定遗传变异,石蜡切片观测比较叶片组织结构,分析比较-6℃低温处理叶片的电解质渗出率、脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等抗寒性相关指标。【结果】纽荷尔脐橙突变体春梢叶片、翼叶、叶柄等性状,果实形状、果皮颜色、果实大小、油胞等性状与野生型没有差异;果实含酸量连续2 a（年）较野生型低24.7%～38.6%;1对SSR引物扩增显示突变体与野生型在250 bp左右存在2条差异带;突变体叶片细胞结构紧密度、栅栏组织与海绵组织厚度的比值均极显著大于野生型;突变体叶片的电解质渗出率未低温处理以及-6℃处理2～10 h均低于野生型,-6℃处理8 h的电解质渗出率相当于野生型叶片-6℃处理6 h的水平;突变体叶片中脯氨酸含量极显著高于野生型,-6℃低温处理使突变体与野生型叶片脯氨酸含量差异增大;突变体超氧化物歧化酶活性未低温处理（0 h）和低温处理2 h至10 h均显著高于野生型。【结论】该突变体...     

鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

鸡传染性支气管炎对全球养鸡业带来巨大损失,虽已有商品化疫苗用于临床预防该疾病,免疫鸡群高发病率、高死亡率现象仍然常见。本试验旨在为重庆地区的传支流行毒株进行调查。通过病毒的分离培养和高变区部分序列测序,发现流行于重庆地区的鸡传染性支气管炎毒株与现有的疫苗毒株存在较大差异。某些位点的基因突变与病毒特性的改变之间是否存在联系还需要进一步的研究。     

应用CSFV-E2基因噬菌体肽库筛选猪瘟病毒抗原表位

采用猪瘟单抗对猪瘟病毒石门株E2基因噬菌体随机肽库(SM-E2库)进行淘洗以研究猪瘟病毒E2抗原表位.运用猪瘟单克隆抗体WH303、WH211和M56对SM-E2库进行4轮生物淘洗,对阳性克隆再经噬菌体原位杂交、特异PCR测序分析,然后人工合成阳性多肽进行ELISA反应.经鉴定分析发现单抗WH303从SM-E2库中筛选得到一段CSFV特异的抗原多肽IECTAVSPTTLRTEVVKT,并且该段多肽与已知CSFV表位TAVSPTTLR极为相似;单抗WH211和M56未能筛选到包含CSFV序列的克隆.结果表明,利用靶基因噬菌体随机多肽库筛选抗原表位能够得到更接近于真实表位的抗原表位.     

母猪繁殖障碍性疾病血清流行病学调查

重庆某规模化猪场仅进行了猪瘟的常规免疫,母猪发生流产、死胎等现象严重。采集的154份血清样品其中母猪血清样45份,仔猪血清样109份）用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验检测猪温抗体水平,结果母猪血清猪瘟抗体阳性率为82.22%,仔猪血清抗体阳性率为0;用乳胶凝集试验检测伪狂犬病、细小病毒病抗体,母猪血清抗体阳性率分别为20％、6.67%,仔猪血清抗体阳性率分别为5.5%、4.59%;用间接血球凝集试验检测衣原体病、弓形体病抗体,母猪血清抗体阳性率分别为13.33%、0,仔猪血清抗体阳性率分别为10％、0;用试管凝集由氏杆菌病为阴性。     

从发病仔猪呼吸道检测出猪腺病毒

根据猪腺病毒六邻体保守区域设计两对引物,用Nested-PCR的方法从送检的发病仔猪的呼吸道分泌物中扩增出两个核酸片段.通过基因克隆、序列测定和序列比较,发现这两个核酸片段与猪腺病毒5型和3型的相应片段同源性最高,分别为97.4%和95.3%.证实发病仔猪呼吸道存在猪腺病毒的感染.为下一步猪腺病毒的分离及猪腺病毒表达载体的构建打下基础.     

邻苯二甲醛杀菌作用研究

为了检测邻苯二甲醛（ortho-phthalaloehyole,以下简称OPA）的杀菌效果。我们选择大肠杆菌，沙门氏菌，葡萄球菌，魏氏梭菌，荧光假单胞菌，蜡样芽孢杆菌作为试验菌株，采用MIC法测定OPA在不同温度下的最低杀菌浓度，并与甲醛，戊二醛作比较，同时将OPA配成5%的存贮液置不同条件下保存，测定其稳定性，试验结果表明，0.1%-0.7%（W/V）OPA具有杀菌作用，其5%的存贮液在不同条件下保存10个月以上，杀菌效果基本不变。     

急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律的观察

为研究CSFV感染后在体外的传播途径、排毒规律,针对CSFV基因组设计了一对引物和一条探针,建立了一套CSFV荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并以质粒为标准品得到扩增标准曲线.对18个CSFV阳性质控样本检测全阳性,6个CSFV阴性质控样本检测全阴性,显示良好敏感性和特异性.应用此方法对石门株感染的16头60日龄长白猪和1头阴性对照猪的粪便、尿液、眼分泌物和唾液中病毒含量进行了动态测定,结果表明从感染后第1天到频死前第8天,粪便中均能检测出病毒;尿液和眼分泌物至少能从第3天,唾液从第4天开始检测出病毒,且病毒含量呈增加趋势.本研究对急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律进行了系统研究,为弄清CSFV感染病程、致病机理及临床诊断奠定了重要理论基础.     

兔病毒性出血症鸡源高免蛋黄抗体的研究与应用

用兔病毒性出血症抗原免疫产蛋鸡,收集高免蛋,精制蛋黄抗体(IgY),采用血凝抑制试验(HI)测定IgY的最高滴度为15 1og2.通过IgY的被动免疫保护试验证实,IgY滴度稀释至13 1og2时肌肉注射体重2.0～2.5kg的健康非免家兔5.0mL/只,可抵抗兔病毒性出血症强毒RC株1.0mL(血凝价HA为9 1og2)的攻击.临床应用效果显示:IgY(HI为13 log2)对发病兔进行紧急防治,治愈率为84.38%～92.86%,能迅速控制疫情.     

应用SPC分析蛋白质原料配料保真加工现状及误差产生原因

试验应用统计过程控制（SPC）分析饲料生产中蛋白质原料配料保真现状,并对配料误差存在原因进行探讨,旨在为饲料企业配料质量管理提供借鉴。收集两家饲料厂（饲料厂A、B）2015年仔猪料中豆粕、鱼粉和膨化大豆3种蛋白质原料的配料设定值和实际称量值,应用单值-移动极差控制图和生产过程能力评价方法对蛋白质原料的配料保真现状进行分析。结果显示,饲料厂A豆粕、鱼粉和膨化大豆生产过程能力指数C_PK分别为0.20、0.11和0.01,膨化大豆的配料保真度最差,且3种原料的配料实际称量值远高于设定值;饲料厂B豆粕、鱼粉和膨化大豆生产过程能力指数C_PK分别为0.24、0.12和0.24,鱼粉的配料保真度最差,膨化大豆的配料过程存在失控情况;两家饲料厂的蛋白质原料配料误差均超过了饲料行业动态配料精度±0.3% FS的要求,配方保真性较差,需采取措施进行改进。综合分析两家饲料厂配方保真性差的原因是,配料秤工艺参数配置不合理,空中落料量和快慢进料量参数需进一步优化,饲料厂B存在人为操作错误。结果提示,应用SPC方法可较为直观的监控饲料配料过程,提升蛋白质原料的配料精度,减少蛋白质原料的浪费,降低饲料生产成本,从而提高饲料厂配料质量管理水平。     

南非基础研究经费投入格局和近期出台的计划与举措

2014年5月南非新一届内阁成立,其新任科技部长宣布将在未来5年内实现R&D占GDP比重为1.5%的目标,显示出南非科技投入将进入一个新的历史阶段。南非基础研究投入一直处于稳步增长态势,其政府是主要投入力量。近年来,南非针对基础研究出台了一系列的相关战略、计划与措施,如:加大对大科学计划的支持;出台了生物经济战略;加强对科学基础设施建设的规划;扩大卓越中心建设,提升基础研发能力;大力吸引科技人才,加强科研领军人才队伍建设等。期望通过对南非基础研究投入的发展和格局变化的介绍,以及对南非政府出台的相关政策措施的分析研究,对我国依靠创新驱动和提高基础研究能力具有一定的借鉴意义。