生产转基因五指山小型猪重构胚条件优化

利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白重构胚。结果表明,使用U-023细胞核电转程序能有效介导质粒pCX-mRFP1转染猪耳成纤维细胞,转染率可达到83.33%。确定G418最佳筛选浓度为200μg.mL-1。利用转基因细胞作为核供体生产重构胚卵裂率是83.08%(221/266),囊胚率是11.65%(31/266)。研究结果为生产表达单体红色荧光蛋白五指山小型猪提供参考,从而为人类疾病发病机理研究以及生产人类疾病模型动物奠定了基础。     

南京河西生态公园植物群落特征及其多样性研究

以南京河西生态公园为例,在对其植物群落(包括乡土树种与外来树种)组成统计的基础上,采用ShanonWiener指数、Simpson指数和Sorensen相似性指数等对其物种多样性及群落相似性进行研究分析,结果显示,南京河西生态公园植物约84种,隶属41科66属,以乡土植物为主。公园群落相似度低,景观效果较好,但是乔灌草比例需要调整,植物多样性有待提高,景观效果缺乏特色。建议增加公园物种丰富度,构建近自然植物群落;加强总体设计,营造特色景观;优化生境结构,维护生物多样性。     

生态文明背景下南京市郊野公园的建设思考

分析了近年来南京市郊野公园的实践现状与发展特点,并针对目前南京市郊野公园规划发展的问题与局限,提出了进一步发展规划的策略,即宏观考虑,系统布局;农业转型,城郊优化;自然野趣,生态保育;主题特色,游憩体验。期望能对南京市郊野公园未来的建设管理起到实际的指导和推进作用。     

论图书馆读者服务工作中的人文关怀

人文关怀是高校图书馆创新意识的集中体现,从我校图书馆在服务工作中人文关怀理念的增加与实施,探讨了这一理念对高校图书馆的发展所起的作用,提出这一理论是今后读者服务工作的发展方向。     

家蚕不同化性品系间DNA甲基转移酶基因转录特性及胚胎早期甲基化水平差异分析

DNA甲基化修饰参与昆虫胚胎发育。家蚕是典型的胚胎滞育昆虫,为探明家蚕DNA甲基化在胚胎发育及滞育调控中的作用,以不同化性家蚕品系为材料,包括一化性品系安康4号(V¹AK4)和鲁一(V¹Lu1)、二化性品系秋丰(V²QF)和P50(V²P50)、有滞育多化性品系四海(V³SH)、无滞育多化性品系Nistari (V³Nistari),利用qRT-PCR技术分析家蚕甲基化酶基因BmDnmt在家蚕不同化性品系的表达水平,并利用免疫荧光法测定胚胎发育早期DNA甲基化水平。结果显示,在胚胎发育早期BmDnmt1和BmDnmt2在V¹AK4、V²P50和V³Nistari品系中表达水平较高,在V³Nistari品系中BmDnmt1的表达水平显著高于V³SH品系;在幼虫期,BmDnmt1和BmDnmt2在多化性家蚕卵巢或精巢组织中表达水平显著高于二化性家蚕,且...     

携带抗口蹄疫病毒ScFv基因猪成纤维细胞系的建立

根据口蹄疫病毒的感染特征及其在临床发病过程中呈现的症状,筛选抗口蹄疫病毒单链抗体基因。通过EcoRⅠ/NotⅠ双酶切中间质粒pGEX-ScFv获得单链抗体基因片段,并克隆至反转录病毒载体质粒pFB-neo,构建反转录病毒穿梭载体质粒pFB-ScFv。将pFB-ScFv与辅助质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装重组反转录病毒MMLV-ScFv。同时,构建含增强型绿色荧光蛋白基因的重组反转录病毒MMLV-EGFP作为对照。利用所包装重组反转录病毒感染猪成纤维细胞,通过G418筛选获得携带目的基因的单克隆细胞集落。试验结果表明,本试验在成功构建反转录病毒穿梭载体pFB-ScFv和pFB-EGFP的基础上,获得了分别携带抗口蹄疫病毒单链抗体基因和增强型绿色荧光蛋白基因的反转录病毒,并最终筛选出分别携带上述基因的猪成纤维细胞克隆,为抗口蹄疫病毒转基因动物的研究奠定了基础。     

婚后多些甜言蜜语更幸福

年轻的朋友恋爱时,为了取悦于对方,行为求善求美,说话格外动听.婚后,女方有了归宿,男方有了媳妇,有些人就放松八度,大大咧咧,返朴归真了.其实,正常的夫妻生活,相处的艺术也不能没有.所谓艺术,不是花招,而是要善待对方、会说话,追求的是密切夫妻关系.