七彩神仙鱼 BTN1A1 基因克隆及其在嗜水气单胞菌胁迫下的表达分析

【目的】克隆七彩神仙鱼（Symphysodon aequifasciatus）嗜乳脂蛋白 1A1（Butyrophilin 1A1, BTN1A1）基因,分析其在病原刺激下的表达模式,为了解七彩神仙鱼 BTN1A1 基因功能提供依据。【方法】利用生物信息学对七彩神仙鱼 2 个 BTN1A1 基因（BTN1A1-1 和 BTN1A1-2）进行结构和进化分析。根据前期获得的七彩神仙鱼皮肤转录组数据,选取 BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 基因的 CDS 区设计引物进行克隆。采用 qRT-PCR 分析 BTN1A1 在各组织中的表达及嗜水气单胞菌刺激下的表达模式。【结果】BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 的 ORF 序列长度为 894、1 275 bp,分别编码 298、424 个氨基酸。BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 蛋白均具有 1 个信号肽、1 个 Ig 结构域、1 个 lg_like 结构域和 1个跨膜结构域的经典结构,BTN1A1-2 还具有 1 个胞质结构域。七彩神仙鱼 BTN1A1-1 与慈鲷科其他鱼类相似性较高,与尼加拉瓜湖始丽鱼（Archocentrus centrarchus）BTNIAI 对应氨基酸序列同源性最高、为 94.14%。但 BTN1A1-2 与其他鱼类发生分离,形成独特分支。BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 在七彩神仙鱼各组织中均有表达,但在鳃、肠道、皮肤等与免疫相关的组织中表达量相对较高。七彩神仙鱼 BTN1A1-1 在嗜水气单胞菌胁迫后表达量先显著下降后上升,而 BTN1A1-2 表达量则先显著上升后下降。【结论】七彩神仙鱼 BTN1A1-1 基因相对保守,而 BTN1A1-2 基因在进化上较为特殊。二者在免疫刺激下的差异表达暗示其可能在七彩神仙鱼免疫防御中发生功能分化。     

5种七彩神仙鱼5S rDNA序列的比较

采集鳍条,设计引物,提取了5种(黑格尔、盖子红、鸽子红、天子蓝、红点绿)七彩神仙鱼(Symphysodon)的5S r DNA,分析了其序列。结果表明:5种七彩神仙鱼均具有201 bp和401 bp 5S r DNA结构单元,而黑格尔(野生)、盖子红和鸽子红分别具有300,299,338 bp 5S r DNA结构单元。其编码区高度保守,而非转录间隔区差异显著,特别是黑格尔(野生)300 bp、盖子红299 bp和鸽子红338 bp的非转录间隔区。5种七彩神仙鱼G+C碱基的含量很高。红点绿、盖子红、鸽子红和天子蓝4个人工品种与野生品种黑格尔的亲缘关系分别为97.53%、90.12%、88.89%和85.19%,其中红点绿与黑格尔的亲缘关系最近。     

一起羊A型魏氏梭菌病的诊治

2000年夏，盐池县部分乡镇发生以在放牧中，突然倒地死亡或晚上没有任何症状而次日晨死于羊圈为特征的疾病，经诊断为羊A型魏氏梭菌病。现将诊断和防治情况报告如下。     

油气输送管道的失效事故及典型案例

介绍了国外油气输送管道的失效及预防其失效事故报告的规定。重点介绍了油气输送管道失效事故的类型及国内外典型案例。建议加强油气输送管道的安全法规建设。     

野生及人工养殖七彩神仙鱼肌肉成分的比较

对野生七彩神仙鱼、牛心汉堡养殖七彩神仙鱼和配合饲料养殖七彩神仙鱼的肌肉成分进行了分析比较。结果表明:野生七彩神仙鱼肌肉中粗蛋白最高,配合饲料养殖的七彩神仙鱼次之,牛心汉堡养殖的七彩神仙鱼最低(P0.05);野生七彩神仙鱼粗脂肪含量低于2种养殖七彩神仙鱼(P0.05),2种养殖七彩神仙鱼的粗脂肪含量没有显著差异(P0.05);3种不同摄食模式的七彩神仙鱼肌肉水分含量和灰分之间没有显著差异(P0.05)。3种不同摄食模式七彩神仙鱼的氨基酸组成基本一致,均含有17种氨基酸,含量最高的为谷氨酸(Glu),9种必需氨基酸中含量最高的为赖氨酸(Lys)。3种不同摄食模式的七彩神仙鱼肌肉中主要含有19种脂肪酸,6种饱和脂肪酸(SFA)、5种单不饱和脂肪酸(MUFA)和8种多不饱和脂肪酸(PUFA)中主要的脂肪酸分别为棕榈酸(C16∶0)、油酸(C18∶1)和花生四烯酸(C20∶4);19种脂肪酸中EPA(0.93%~1.86%)和DHA(1.57%~2.35%)的含量较低。为推断七彩神仙鱼的营养需求量及科学配制七彩神仙鱼配合饲料提供依据。     

MGB探针实时定量PCR检测致病性嗜水气单胞菌

以嗜水气单胞菌气溶素（aerolysin）基因为待检靶基因,设计一对引物和一条MGB（Minor Groove Binder）探针,Aero基因探针5’端用FAM基团标记,3’端用TaqMan—MGB标记。建立并优化了检测嗜水气单胞菌荧光定量PCR方法,可检测的最低细菌数为1．25×10^0CFU/μl;试验中嗜水气单胞菌检测结果均为阳性,而非嗜水气单胞菌检测结果均为阴性;重复性试验中,批间差异小于5％,批内差异小于3％。试验结果显示,荧光定量PCR方法可对致病性嗜水气单胞菌株进行快速鉴定。该方法的建立为致病性嗜水气单胞菌的检测提供了一种简便、快速的途径,是一种比较实用的致病性嗜水气单胞菌的检测方法。     

不同硒源对羔羊抗氧化能力、细胞因子及T3、T4的影响

健康滩羊羔羊24头,随机分为3组.对照组(C)饲料中添加玉米淀粉,试验组(T1、T2)饲料中分别添加富硒酵母和亚硒酸钠,试验期60 d.分别于试验期30和60 d测定全血中GSH-Px活性、血浆SOD活性、血浆MDA含量、血浆IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α水平以及血浆甲状腺激素T3、T4浓度;试验期60 d时测定组织硒含量.结果发现,在30和60 d时,T1和T2组羔羊组织硒含量、全血GSH-Px活性、血浆SOD活性、血浆IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α水平以及血浆T3浓度均显著或极显著高于C组(P＜0.01或P＜0.05);血浆MDA含量及T4浓度均显著或极显著低于C组(P＜0.01或P＜0.05).在30 d时,T1组羔羊全血GSH-Px活性及组织硒含量均极显著高于T2组(P＜0.01).在60 d时,T1组羔羊全血GSH-Px活性及组织硒含量均极显著高于T2组(P＜0.01);T1组羔羊血浆MDA含量显著低于T2组(P＜0.05).结果表明,有机硒源提高羔羊机体硒状态以及机体抗氧化能力的效果优于无机硒源,但在提高细胞因子水平和血浆T3浓度以及降低血浆T4浓度方面两者差异不显著.     

犬急性胰腺炎的防治

犬急性胰腺炎(AP)以突发性、前腹部疼痛、休克、腹膜炎为特征，其发病类型有水肿型(AEP)和出血坏死型(AHNP)两型。现就该病的病因、发病机理、病理变化、诊断及防治等报道如下。     

卡拉胶对七彩神仙鱼生长、酶活性和肠道微生物组成的影响

为探究黏合剂卡拉胶对七彩神仙鱼生长、消化酶活性、抗氧化酶活性和肠道微生物组成的影响,在水温(28.0±0.5)℃下,将初始体质量(10.81±2.41) g的七彩神仙鱼饲养在80 L养殖缸中,每缸15尾,投喂添加3%、6%、9%、12%和15%卡拉胶的饲料,以投喂不添加卡拉胶的颗粒饲料和牛心汉堡为对照,养殖56 d。结果表明：3%卡拉胶组七彩神仙鱼质量增加率和特定生长率最高,胃蛋白酶活性和前肠淀粉酶活性显著高于其他组,肝脏丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于其他试验组;12%卡拉胶组肝脏超氧化物歧化酶活性显著高于其他试验组。在肠道微生物组成的门水平方面,3%卡拉胶组变形菌门相对丰度显著高于其他组,梭杆菌门的相对丰度减少;在属水平方面,牛心汉堡组不含有乳球菌属,3%卡拉胶组罗姆布茨菌属相对丰度显著高于其他卡拉胶组,牛心汉堡组的鲸杆菌属相对丰度显著高于其他组。添加3%的卡拉胶能够提高七彩神仙鱼的质量增加率和特定生长率,显著提高胃蛋白酶和前肠淀粉酶活性,且不会造成氧化应激,肠道变形菌、罗姆布茨菌和乳球菌的相对丰度增加。在本试验条件下,七彩神仙鱼饲料中卡拉胶的适宜添加量为3%。