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本试验旨在建立一种测定动物肠道内容物中3′-唾液乳糖(3′-SL)、6′-唾液乳糖(6′-SL)、3′-唾液基-N-乙酰乳糖胺(3′-SLN)、6′-唾液基-N-乙酰化乳糖胺(6′-SLN)、3′-唾液基-3-岩藻基乳糖(3′-S,3-FL)、唾液基乳糖-N-四糖a(LSTa)、唾液基乳糖-N-四糖c(LSTc)和二唾液酰乳糖(DSL)8种酸性低聚糖的液相色谱-质谱联用方法。将肠道内容物冷冻干燥后粉碎,以水作为提取溶剂,超声提取、离心,重复提取2次,合并上层清液;上层清液用乙腈沉淀蛋白,离心并用固相萃取小柱净化,净化液过0.22μm滤膜,进行液相色谱-质谱分析。以Acquity UPLC?BEH Amide色谱柱进行分离,8种酸性低聚糖在7 min内达到基线分离。结果表明:8种目标物的保留时间和峰面积的相对标准偏差均分别小于0.5%和11.0%。3′-SL、6′-SLN、LSTa、3′-S,3-FL、LSTc、3′-SLN、DSL和6′-SL的线性范围分别为5.00~2 000.00 ng/mL、2.50~100.00 ng/mL、 9.59~94.00 ng/m... 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp2基因缺失株RT-PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:1,他引:2
为了快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) nsp2基因缺失流行株,在对不同PRRSV分离株nsp2基因核苷酸序列分析的基础上,设计了针对nsp2基因的1对兼并PCR引物和1条基因特异性反转录引物.RT-PCR试验结果表明,经典PRRSV S1毒株和高致病性nsp2缺失株SY0608毒株的PCR扩增片段的大小分别为768 bp和678 bp.特异性试验和敏感性试验证明,该检测方法特异性较好,但敏感性相对较低,可用于快速鉴别诊断PRRSV nsp2基因缺失毒株和经典PRRSV毒株. 相似文献
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柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen 2,SAG2)基因序列,将其与pGEM-T easy载体连接后转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2 N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32 a(+),构建了重组表达质粒pET-32 a(+)-SAG2,并将其转化至E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG2重组抗原在大肠杆菌的高效表达,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白的分子量约为47 ku。菌体经超声处理后进行SDS-PAGE分析表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。 相似文献
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不同施肥对雷竹林土壤肥力及肥料利用率的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
于2009年,在浙江省临安市的雷竹林中进行田间试验,以比较对照(不施肥)、常规施肥、缓释肥、竹笋专用肥和微生物肥对雷竹林土壤肥力质量、养分利用率和竹笋产量的影响。结果表明,雷竹林因施肥引起的土壤速效氮磷钾含量的过量积累和土壤酸化的程度按以下次序递减:常规施肥>专用复合肥≈缓释肥>微生物肥。常规施肥的肥料农学利用率最低,氮、磷和钾农学利用率分别为鲜笋4.7 kg kg-1、23.6kg kg-1和14.2 kg kg-1。与常规施肥处理相比,专用复合肥和缓释肥2个处理的氮、磷、钾农学利用率分别提高40.4%~53.2%、50.8%~90.7%和35.5%~39.5%,而微生物肥处理则分别提高38.9倍、67.8%和2.0倍。与对照相比,常规施肥处理的竹笋产量和经济效益分别提高了29.6%和14.3%,而专用复合肥、缓释肥、微生物肥3个处理的竹笋产量和经济效益分别提高了27.5%~29.0%和14.6%~17.8%。 相似文献
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在舟山市4个县区采集38份土壤样品,采用电导率法和质量法分别测定土壤电导率(EC1∶5)和含盐量,同时测定土壤中Ca2+、Mg2+、K+、Na+等4种盐分离子的含量。结果表明,Ca2+与土壤含盐量、EC1∶5值之间呈显著正相关关系(P<005),Mg2+、K+、Na+与土壤含盐量、EC1∶5值呈极显著正相关关系(P<001);土壤含盐量(x)与EC1∶5(y)存在极显著线性相关关系,两者的回归方程为:y=0006 7x+0004,(R2=0987 4**),利用该方程计算得到的土壤含盐量数值与实测值较接近,平均相对误差为496%,说明此回归方程可以用于该区域土壤电导率与含盐量之间的换算。 相似文献
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为了解不同施肥水平对普陀樟Cinnamomum japonicum var.chenii苗木生长及养分吸收利用情况的影响,设置了3个水平的田间试验,即不施肥(ck),常规施肥(T50,50 g·m-2)和增量施肥(T100,100 g·m-2),于2012年6月至9月观测苗高和地径,定期采集分析土壤和植物样品。结果表明:普陀樟苗木的苗高、地径、根部和茎部生物量均随施肥量的增加而增加(P<0.05);而叶生物量和总生物量在6月时随施肥量增加而升高(P<0.05),到9月时则呈先升后降的趋势(P<0.05)。苗木体内养分质量分数和单株养分含量随施肥量的增加而增加(P<0.05),不同处理均以叶片养分质量分数最高;养分吸收及利用率随着施肥的增加而降低(P<0.05),T50和T100处理各元素的吸收利用效率均为氮>磷>钾。到试验结束时,T50处理土壤养分质量分数与试验开始时持平,T100处理钾积累,ck引起钾亏缺。从移栽成活来看,T50苗木体内养分积累,有利于移栽成活,保持土壤养分平衡;而T100养分浪费。综合判断,普陀樟苗木最适需养量应为50 g·m-2到100 g·m-2,且较接近50 g·m-2。 相似文献
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于2013年,在浙东沿海三个生境类似地方,即舟山衢山、宁波象山、台州温岭,研究了保水剂对红楠(M-achilus thunbergii)、普陀樟(Cinnamomun japonicum var.chenii)、全缘冬青(Ilex integra)3树种容器苗造林保存率和生长的影响。结果表明:在舟山衢山,T20处理能显著提高3树种的造林保存率,较CK提高17.2%;而在宁波象山、台州温岭,则没有显著变化。在舟山衢山,T20处理的全缘冬青和普陀樟的苗高增量、地径增量、高增幅和地径增幅显著高于CK(P0.01);而在台州温岭和宁波象山,则没有显著差异(P0.05)。在3处试验地,红楠经过T20处理后苗高增量、地径增量、高增幅和地径增幅显著高于CK(P0.01),而宁波象山与台州温岭两地,该4项指标在P0.05水平上没有显著差异。 相似文献
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