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福建柏总DNA的快速简便提取和鉴定 总被引:9,自引:0,他引:9
本文介绍了福建柏Fokieniahodginsii(Dunn)HenryetThomas总DNA的提取介质组成分 ,建立了一个快速、简便且高效提取和鉴定福建柏鲜叶、干叶、种子总DNA的方法。该方法所提DNA的产率分别为 :1 5 0~ 2 5 0 μg/g鲜叶 ,1 0 0~ 1 5 0 μg/g干叶和 1 4 0~ 1 6 0 μg/g种子 ;绝大多数粗提总DNAOD2 6 0 /OD2 80 =1 .80±0 .0 2 ;提取的鲜叶、种子和单种子胚乳总DNA皆为 4 8kb,而干叶总DNA为 5 0Kb ,都适于限制性酶切和RAPD反应 ;一般实验时间为 4h。该方法既不需氯化铯梯度离心和柱层析纯化 ,也不需氯仿 :异戊醇抽提 ,粗提的总DNA样品不经RNase消化即可用于RAPD反应或经RNase消化用于限制性酶切 ,因此 ,具有高产率、高纯度、高质量和快速简便等优点。尤其是它所提取的干叶DNA ,适于限制性酶切和PCR反应 ,解决了取材上的不便。实验中还发现 :( 1 )提取DNA之前去除叶绿素与否 ,对提取福建柏总DNA无明显影响。 ( 2 )只有去除RNA的福建柏总DNA样品 ,才能被限制性内切酶完全切开。 ( 3)RAPD模板中含RNA及一定量的蛋白质 ,均不影响扩增效果。 ( 4 )同一个体的鲜叶、干叶、种子总DNA样品 ,皆可得到完全一致的扩增产物。 相似文献
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山苍子雌雄植株早期鉴定初探 总被引:1,自引:0,他引:1
山苍子为雌雄异株植物,通常用实生苗造林雄株达40%左右,实际上林地仅需保留少量雄株供授粉而伐去大部分雄株,大大影响了产量。因此山苍子雌雄植株早期鉴定在生产上具有重要意义。国内曾报道过千年桐、猕猴桃等雌雄植株叶部组织在氧化还原能力方面存在差异。我们考虑以氧化还原酶类的活性强弱作为早期鉴定的指标。为此我们的试验通过测定已知性别的成年树和幼苗的叶片组织过氧化物酶和过氧化氢酶活性,初步得到山苍子雄株叶片较之雌株叶片具有较高的过氧化物酶和过氧化氢酶活 相似文献
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以甘蔗高糖品种福农95-1702和低糖品种ROC-5为材料,分析SPS I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ在高、低糖这两个品种的幼叶、第三功能叶和不同蔗茎的表达,测定甘蔗糖分积累早期、中期和后期的糖分含量。结果显示,在功能叶和茎第二节中,三个阶段SPS家族成员在高糖品种的含量整体趋势高于低糖品种,结合蔗糖积累特点分析表明其可能在蔗糖合成中扮演着重要的角色。与正三叶相反,在幼叶中,三个阶段SPS家族成员在高糖品种的表达量整体趋势低于低糖品种,表明其可能与嫩叶的生长等其他生理性状相关,在成熟茎中,随着蔗糖积累时间的增加,高糖品种中的优势表达基因减少,而低糖品种中的优势表达基因增加,这可能与低糖品种中、后期大量积累蔗糖相关。 相似文献
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花生DNA快速简便提取方法的研究 总被引:20,自引:4,他引:16
在花生新鲜针叶和干叶DNA提取过程中,应用pH值较低,无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质,其中加入2%的β-巯基乙醇可有效地防止次生代谢物质使DNA变色。提取出的DNA样品产率在92.6~216.31ng/mg.fw,DNA质量和纯度较高,260nm/280nm光密度比值在1.8~1.9之间。所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切,并可用于随机引物PCR扩增。该方法为花生分子生物学研究提供基础。 相似文献
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