云实叶片愈伤组织诱导中其酶活性及显微结构变化

为给云实悬浮细胞培养、工厂化生产次生代谢产物奠定科学基础,以健壮云实当年生嫩叶为试材,接种在最佳诱导培养基上,对其生长过程进行解剖学观察,并分5个时间段研究苯丙氨酸裂解酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性变化。试验结果表明,内部变化早于外部变化,在肉眼观察到深绿色芽点之前1周,通过显微镜就已能观察到胚状体结构。PAL、POD和PPO活性在脱分化和再分化过程中分别呈现逐渐增强、先增强后减弱和逐渐减弱的趋势。云实悬浮细胞培养叶片愈伤组织取材最佳时期为接种28 d左右,此时愈伤组织疏松易分离,细胞生命力最为旺盛。