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猪圆环病毒2型吉林地方株ORF2基因的克隆、测序及其在原核细胞中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank中发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成1对特异性引物,用PCR方法从接种PCV2吉林株(JL01)PK-15细胞中,扩增出PCV2毒株的ORF2基因。将扩增片段克隆于pMD18-T载体,进行序列测定。结果表明,PCV2JL01毒株的ORF2基因核苷酸长度为702bp。将重组质粒用Sal Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后与同样处理的pET-32a载体连接,转化BL21细胞后,挑取阳性克隆。经PCR和酶切鉴定后,用IPTG诱导,细菌裂解液经SDS—PAGE和Western—blot分析,表明ORF2基因在大肠杆菌中得到了表达,并能被PCV2阳性血清所识别。 相似文献
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猪伪狂犬病流行状况和疫苗应用的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,猪伪狂犬病在国内许多Bartha-K61疫苗免疫的猪场暴发,传播迅速,严重危害我国养猪业的发展,引起了广泛关注和研究。相关研究表明,引起该病大规模暴发的病原为发生变异的猪伪狂犬病病毒(PRV),多数猪场的PRV野毒株感染普遍存在,因此,有必要对新型伪狂犬病病毒变异株的抗原性、致病性和分子特征及其疫苗的研制等方面进行研究。针对我国猪伪狂犬病的流行和疫苗应用的研究进展进行阐述,以便为研制新型疫苗及猪伪狂犬病的防控提供参考。 相似文献
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水貂阿留申病是由水貂阿留申病毒引起的以浆细胞增多为主要特征的慢性、消耗性、病毒性传染病。主要侵害水貂的免疫系统,导致机体免疫系统紊乱引起的器官衰竭,病死率极高,严重损害了水貂养殖产业的经济利益,该病存在于绝大多数养殖水貂的国家和地区。目前,能有效预防该病的疫苗尚未研制成型,该病的防控已成为水貂养殖领域的世界性难题,在防控方面主要采取淘汰检疫阳性水貂的办法。论文主要针对目前该病在国内外检测方法的特点和流行情况进行阐述,以期为水貂阿留申病快速检测方法的建立及水貂阿留申病的有效防控提供参考。 相似文献
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为获得对猪具有免疫刺激活性的含CpG序列的重组质粒,设计合成了11条CpG序列,应用MTS比色法测定合成CpG ODNs刺激猪PBMC增殖的能力,结果有10条CpG ODN对猪PBMC具有刺激活性(SI>2);以对猪PBMC具有较高刺激活性的CpG06和CpG08为核心,分别合成含6次重复序列的重组质粒pCpG06和pCpG08,并检测其对猪PBMC的刺激活性,结果重组质粒pCpG06和pCpG08对猪PBMC的刺激指数分别可达4.97和5.32,并可刺激猪PBMC产生较高水平的IL-4。研究获得的重组质粒pCpG06和pCpG08对猪PBMC具有较好的刺激活性,可为猪用CpG佐剂的研究提供参考。 相似文献
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试验研究了吉林省烤烟小苗膜下移栽技术,以探明其对烟苗生长的微环境和肥料利用率及早生快发的影响。通过对不同的移栽苗龄及大田移栽期所培育烤烟的农艺性状、肥料利用率、烤后化学成分及经济性状的分析比较,结果表明:小苗膜下移栽使苗穴内能够保持相对稳定的温度,为幼苗提供适宜的生长环境,优于常规移栽方法。烟株的各项农艺性状表现较好,对肥料的利用率显著高于对照,烤后经济性状提高,化学成分协调性改善。小苗膜下移栽技术最佳移栽苗龄为6叶龄,最佳移栽时期为4月26日至5月1日。 相似文献
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为研制牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)灭活疫苗,本研究以国内分离鉴定的IBRV LN01/08株为种毒,优化病毒增殖条件,获得病毒滴度达108.0TCID50/mL,将其灭活制备疫苗.为比较不同免疫佐剂的效果,分别以矿物质白油和Montanide ISA206佐剂配制灭活疫苗,进行牛体免疫试验.临床观察和血清中和抗体检测结果表明,Montanide ISA206佐剂乳化的疫苗在降低副反应和增强免疫效果方面优于矿物质白油佐剂.应用Montanide ISA206佐剂制备3批灭活疫苗,并对其安全性和免疫保护效果进行测定.结果表明该疫苗安全可靠,对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达80%.疫苗在2℃~8℃保存12个月后仍能保持良好的免疫效果. 相似文献
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牛传染性鼻气管炎活疫苗安全性和免疫保护效果研究 总被引:1,自引:1,他引:0
本试验使用牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗进行安全性和免疫保护效果研究,将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6~8月龄牛及后备母牛,接种剂量为2 mL(10头份),检验疫苗安全性。将疫苗接种6~8月龄牛,接种剂量为1 mL(1头份),疫苗接种后28 d使用检验用强毒进行攻毒,检验疫苗对攻击用强毒的保护效力。结果表明,不同月龄牛接种疫苗后体温正常,无任何临床可见异常,后备母牛接种疫苗后精神状态及食欲均良好,无流产、死胎及木乃伊胎出现。疫苗接种牛对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达5/5。 研究结果表明,该疫苗对牛安全,且免疫保护效果良好。 相似文献
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJ株的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从某猪场发生高热死亡的仔猪病料中分离到1株病毒,该病毒在Marc-145细胞上增殖致细胞病变。经RT—PCR检测证明该分离株为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。该毒株回归易感动物可产生明显的临床症状,并引起死亡,将其命名为PRRSV TJ毒株。对其Nsp2序列进行扩增测序,结果表明:与美洲标准毒株VR-2332相比,TJ株Nsp2序列缺失第481位和第532~560位氨基酸,二者核苷酸同源性为83.7%,其编码的氨基酸同源性为77.9%。本试验结果表明,该分离株为发生了变异的PRILSV,对猪具有高致病性。 相似文献
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棉花纤维细胞是研究细胞发育机制的理想材料,陆地棉Ligon lintless(Li1)是单基因显性超短纤维突变体, 其性状表现为长纤维极度缩短,分离得到的野生型(li1)纤维发育正常。本实验通过cDNA芯片的方法对两个材料进行比较分析,采集开花前1 d到开花后7 d即–1 DPA ~ +7 DPA (day post anthesis)材料,检测到多个上调和下调基因,选择两个基因(CIPK和XET)进行RT-PCR和qRT-PCR的芯片验证。应用MAS (molecular analysis system)系统进行GO功能注释和Pathway的分析表明,这些差异表达基因参与脂肪酸代谢(fatty acid metabolism),甘油脂代谢(glycerolipid metabolism)以及碳固定(reductive carboxylate cycle)等多个代谢途径。这些基因在突变体Li1中的异常表达可能导致细胞中脂肪酸和脂肪含量变化,影响棉纤维细胞的正常发育。 相似文献