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外植体采集时期与冷藏处理对马尾松愈伤组织诱导的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
马尾松(Pinus massoniana)无性繁殖困难,研究常采用体细胞胚胎发生和器官发生的方式繁殖,外植体采集时期是实验成功的关键.本实验采用2011年10月至2012年10月期间(每周或每两周采集1次)采集的马尾松枝梢顶端分生组织为外植体,并将外植体置于4cC冰箱冷藏做不同冷藏时间处理(4 ~ 114天).处理后的外植体接种在添加不同激素浓度的改良GD培养基中,24 ~ 25℃条件下暗培养.实验结果表明:冷藏时间对马尾松愈伤组织诱导没有显著影响;2012年3月中旬至4月底采集的马尾松外植体,愈伤组织诱导率最高达89.8%,其平均诱导率达到80%以上;外植体经流水冲洗2~3h、75%的酒精处理20 ~30 s、0.1%的升汞处理9~ 10 min并去除鳞片和针叶,能有效降低外植体污染率;外植体经流水冲洗2~3h、去除鳞片和针叶后切成长约0.2 ~0.5 cm的薄片后接种,能大大降低培养过程中外植体的褐化率. 相似文献
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