流式细胞仪检测活的非可培养状态大肠杆菌

流式细胞仪和荧光染色联合对经酸和低温联合诱导的大肠杆菌活的非可培养状态(VBNC)进行检测。流式细胞仪分析结果表明:当可培养菌数降为零时,与正常状态细菌相比,诱导后菌株多数仍为呈现绿色荧光的活菌,活菌数远远超过死菌数。并且菌体形态多样,每份样品中至少存在两种不同"颗粒"。结合荧光图像可以确知是杆状、球状或球杆状的菌体。由此表明,实验菌株在可培养数为零时就已进入了VBNC状态。     

干酪乳杆菌LC-03的培养条件优化研究

本研究通过单因子优化试验和正交试验对干酪乳杆菌LC-03培养条件和培养基成分进行初步优化。结果表明,干酪乳杆菌LC-03属于兼性厌氧菌,最佳培养基成分为:蛋白胨12g,酵母提取物6g,牛肉膏6g,葡萄糖18g,乙酸钠5g,柠檬酸铵2.15g,Tween801mL,MgSO4.7H2O0.58g,MnSO4.4H2O0.05g,K2HPO42g,水1000mL;最佳培养条件:温度为35℃,培养基起始pH为6.5,接种量为1.0%,培养时间为24h;优化培养后D610nm值达到1.832,活菌数达到3.22×1010CFU/mL。     

Isolation of a viable but non-culturable suppression mutant of Vibrio vulnificus: role of antioxidant enzymes in surviving stationary phase and low temperatures

ABSTRACT:   The viable but non-culturable (VBNC) suppression mutant was isolated. Suppression subtractive hybridization was used to identify differentially expressed genes among cDNA of the VBNC suppression mutant and the wild-type strain. RpoS-dependent catalase was highly expressed from the VBNC suppression mutant during oxidative stress in the stationary phase and at low temperatures. In experiments of H₂O₂ sensitivity, the VBNC suppression mutant showed a peroxide-resistant phenotype in the stationary phase and at low temperatures. These results suggest that VBNC suppression mutant cells use catalase for protection against oxidative stress in the stationary phase and at low temperatures.     

补检制度的设计缺陷及重构思路

补检是《动物防疫法》规定的一种补救路径,但在执法实践中,对补检制度的法律设定及可操作性存有争议。笔者认为现行的补检制度易使检疫对象补检合格的标准低于正常标准;行政相对人如采取不报检而补检的方式,易使原本检疫不合格的动物及其产品变为检疫合格。这提示应重构补检制度设计要求,一是应对查获的依法应当检疫而未经检疫的动物可以规定留验、针对法定检疫对象进行快速检测、实验室检测等更为严格的补检条件;二是对依法应当检疫而未经检疫的动物产品,则不应或谨慎设计补救路径。本文研究提出了重新构建现行检疫对象补检制度的可行性思路,可进一步强化法律法规的有效衔接,规范动物检疫活动管理。     

抗猕猴桃细菌性溃疡病蜡样芽孢杆菌MA23培养基及发酵条件优化

蜡样芽孢杆菌MA23对猕猴桃溃疡病病原菌丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)有较好的抑制作用,优化其发酵培养基及发酵条件将为猕猴桃溃疡病的有效防治提供参考.本研究通过正交设计实验和单因素实验分别优化其发酵培养基和摇瓶发酵条件,提高摇瓶发酵的菌体量和抑菌活性....     

植物乳杆菌固体发酵饲料工艺的研究

以玉米粉和麦麸为基质,采用固态发酵技术发酵饲用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum).以活菌数为指标.设计单因素和Lq(34)正交试验优化培养条件和培养基配方.结果表明,植物乳杆菌固态培养的最适条件为接种量10％,37℃静置发酵48h.最适宜的固体发酵培养基中各营养成分的质量分数分别为麸皮59.5％、玉米粉35.0％、葡萄糖2.0％、乳糖1.0％、蛋白胨1.5％、酵母膏1.0％.培养结束后乳杆菌活菌教可达100.5×108 CFU/g(鲜基).     

枯草芽孢杆菌产芽孢条件的优化

为了提高枯草芽孢杆菌的芽孢数量及产芽孢率,采用分批培养法研究了营养条件、初始pH值、溶氧量对其生孢的影响。结果表明,麸皮和玉米粉分别是枯草芽孢杆菌生孢的最佳碳、氮源;无机盐和锰元素对芽孢生成有显著的影响。最佳生孢培养基组成:麸皮5 g,玉米粉10 g,NaCl 5 g,KH2PO41 g,MnSO4.H2O 0.4 g,水1 000 mL;最佳生孢条件:初始pH值为7.0,最佳装液量为250 mL锥形瓶装50 mL培养液。在150 r.min-1、30℃恒温培养72 h后,芽孢数可达到3.4×109cfu.mL-1,产芽孢率可达82.9%。     

微生物活菌发酵饲料对育肥猪肠道相关菌群分布的影响

为研究微生物活菌发酵饲料对育肥猪肠道相关菌群分布的影响,以"杜×长×大"育肥猪(29±1)kg为试材,试验组用微生物活菌发酵饲料饲喂,对照1组和对照2组用市售的两种全价颗粒饲料饲喂。采用梯度稀释平板菌落计数法对育肥猪肠道各区段相关菌群进行分离、培养和计数。结果表明,芽孢菌的最佳定殖区段为小肠3段(回肠)处,试验组芽孢菌菌落总数为(8.8×105±0.09×105)CFU·m L-1,与对照1组(5.70×105±0.32×105)CFU·m L-1相比增加了54.39﹪(P0.05),与对照2组(8.40×104±0.33×104)CFU·m L-1相比增加了947.62﹪(P0.05);乳酸菌的最佳定殖区段为盲肠,试验组乳酸菌菌落总数为(3.90×105±0.14×105)CFU·m L-1,与对照1组(1.06×105±0.22×105)CFU·m L-1相比增加了267.92%(P0.05),与对照2组(4.10×104±0.55×104)CFU·m L-1相比增加了851.22﹪(P0.05);酵母菌的最佳定殖区段为小肠2段(空肠)处,试验组酵母菌菌落总数为(1.13×105±0.10×105)CFU·m L-1,与对照1组(9.10×104±0.21×104)CFU·m L-1相比增加了24.18﹪(P0.05),与对照2组(2.31×104±0.09×104)CFU·m L-1相比增加了389.18﹪(P0.05)。由此可见,微生物活菌发酵猪饲料能有效影响育肥猪肠道菌群,调节肠道微生态平衡。     

不同温度贮藏期间团头鲂品质的变化规律

研究团头鲂在不同贮藏温度下的品质变化规律.将团头鲂分别贮藏在20、4和-3℃条件下,通过感官评定、微生物和理化指标分析,评价不同温度对团头鲂品质的影响.结果表明:20℃贮藏至第2天时,感官品质已不可接受,对应的感官分值为15.00,挥发性盐基氮(TVB-N)的质量分数ω(TVB-N)为215.1 mg/kg,菌落总数>107CFU/g,鲜度指标K为42.12%,贮藏至第5天时硫代巴比妥酸(TBA)的质量分数ω(TBA)为0.47 mg/kg;4℃条件下贮藏至第14天时.感官分值为16.67,感官品质不可接受,ω(TVB-N)>200 mg/kg,贮藏至第16天时菌落总数达到2.88×107 CFU/g,鲜度指标K为55.22%,ω(TBA)<2 mg/kg;-3℃务件下,至37 d时,感官分数为17.00,鱼肉失去食用价值,至41 d时ω(TBA)>2 mg/kg.贮藏结束时(第46天),菌落总数<107 CFU/g,ω(TVB-N)<200 mg/kg,鲜度指标K<55%.综合各指标变化,20、4和-3℃条件下,团头鲂的贮藏期分别为1、12和33 d,与20和4℃相比-3℃贮藏能明显延长团头鲂的贮藏期.