番茄叶霉病重要流行环节初步研究Ⅱ.病斑产孢、孢子飞散

对番茄叶霉病病斑产孢规律的研究表明:在保湿24h内,随着保湿时间的延长,病斑相对产孢量也随之增加;黑暗条件有利于病斑产孢;病斑产孢适宜温度为10～28℃。其中,在23℃时产孢量最大,4℃和35℃时病斑几乎不产孢;在80%～100%的相对湿度范围内病斑均可产孢,病斑产孢量随湿度的增加而增大;另外,病斑相对产孢量随氮肥使用量的增加而增加,却随着磷钾肥使用量的增加而减少;6～9龄的病斑产孢能力最强。叶霉病菌分生孢子主要在夜间飞散;在番茄植株株高30～100cm范围内,60cm株高处分生孢子数量最多。     

维生素对白僵菌生长和液生分生孢子形成的影响

对球孢白僵菌在不同维生素为生长辅助因子的液体培养基中菌丝生长和液生分生孢子的形成进行研究。结果表明,不同维生素对球孢白僵菌的生长及液生分生孢子的形成影响极显著。在培养液中添加适宜的维生素能有效地刺激液生分生孢子的形成,VB6+VB1+VB2或复合维生素B能使球孢白僵菌获得较高的液生分生孢子产量,产孢量分别高达5.03×1011个·L-1和5.12×1011个·L-1。同时试验还表明,液生分生孢子的产量与维生素组合有关,复杂的维生素组合比单一的维生素更有利于液生分生孢子的形成。     

绿僵菌侵染椰心叶甲的部位及侵染过程的电镜观察

利用扫描电子显微镜对绿僵菌侵染椰心叶甲的部位及侵染过程进行研究,从超微结构对绿僵菌侵染椰心叶甲体壁进行分析,结果发现,绿僵菌侵染椰心叶甲的主要部位是腹部节间膜,侵染过程可以分为分生孢子附着、出现分枝、长出芽管、大量聚合和入侵体内,最终绿僵菌分生孢子附着在节间膜上进入椰心叶甲体内.     

玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫的侵染过程及接菌方法对其致病力的影响

采用扫描电镜观察玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)分生孢子在小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫体表的萌发和侵染过程及玫烟色拟青霉孢子粉、孢子悬浮液和孢子培养液对小菜蛾幼虫的致病力.结果表明:小菜蛾幼虫体表嵴状突起结构区附着的孢子较多, 刺状突起结构区附着的孢子较少;刺状突起结构区附着的孢子萌发较早, 多数孢子在接菌后16 h开始萌发, 而嵴状突起结构区附着的孢子多数在20 h开始萌发, 在平缓结构区孢子萌发最迟.在嵴状突起结构区和刺状突起结构区, 多数孢子萌发后产生芽管, 直接以芽管侵入幼虫体壁, 少数形成附着胞侵染寄主.此外玫烟色拟青霉3种不同接菌方法对小菜蛾幼虫的侵染速率和致病力大小明显不同, 其中孢子培养液比孢子悬浮液和孢子粉对小菜蛾幼虫的侵染速率快, 接菌44 h虫体表现出明显的感病症状, 致死中时为3.18 d;孢子悬浮液和孢子粉处理的小菜蛾幼虫, 60 h虫体出现感病症状, 致死中时分别为4.20 d和4.34 d;而且致病力大小也存在明显差异, 接孢子粉的处理明显高于孢子悬浮液和孢子培养液, 小菜蛾幼虫6 d的死亡率达76.2%, 而其他两种处理小菜蛾幼虫6 d的死亡率仅为59.8%和58.5%.本研究结果表明, 小菜蛾幼虫的体表结构影响玫烟色拟青霉孢子在寄主体表的附着、萌发和侵入, 玫烟色拟青霉孢子粉对小菜蛾幼虫的致病力最强, 明显高于孢子悬浮液和孢子培养液.     

Development of isolate‐specific markers for Neofusicoccum parvum and N. luteum and their use to study rainwater splash dispersal in the vineyard

Unique bands were identified in single isolates of Neofusicoccum parvum and Neofusicoccum luteum using universally primed polymerase chain reaction (UP‐PCR) analysis of isolates obtained from grapevines and non‐grapevine hosts in New Zealand, Australia, South Africa and the USA. Primers were designed to amplify a 1550 bp portion of the 1573 bp marker band from N. parvum isolate B2141 and a 510 bp portion of the 524 bp marker band from N. luteum isolate G51a2. A PCR‐RFLP assay was developed to distinguish the N. parvum isolate B2141 from other N. parvum isolates, based on a polymorphism found in the marker band using the TaqI restriction endonuclease. For N. luteum isolate G51a2, the designed primers were specific at an annealing temperature of 63°C in the PCR. The sensitivity threshold of the N. parvum and N. luteum isolate‐specific markers was 50 pg and 5 pg, respectively, when used in standard PCR with purified genomic DNA. The sensitivity of the N. parvum isolate‐specific marker was increased to 0·5 pg by nested PCR. The specificity test of both isolate‐specific markers with six other Botryosphaeriaceae spp. showed that they were specific to their respective species and isolates. Both markers were able to detect the conidia of N. parvum and N. luteum marker isolates in rainwater samples collected at different distances from an inoculation point in the vineyard. The results showed that rain splash could disperse the conidia of both of these species up to 2 m from the inoculum point in a single rainfall event.     

蜡蚧轮枝菌11个单孢菌株的生物学及其对温室白粉虱致病性的比较和筛选

本文通过对北京地区蜡蚧轮枝菌11个单孢分离菌株的菌落生长、产孢量、分生孢子萌发率以及对温室白粉虱2龄若虫致病性研究比较，结果表明：上述性状特别是产孢量，在11个菌株中均表现有显著差异，但孢子萌发率都较高，达94．01％～9897％（12h）。在同一菌株中这些性状有的表现出一致性，有的则不同。综合比较几种性状，筛选出B3／S1－SUb2和4号两个优良菌株，它们首先具有致病性高（对2龄粉虱若虫的致死率＞95．76％，12d）、其次孢子萌发率高（94．24％和98．42％）、产孢量大（5．06和4．38×109抱子／皿）以及菌落生长速率快（3．13和3．00mm／d）的特性，具有实用价值，可为今后生物制剂的生产提供菌株。     

顶孢霉Ahy1菌株孢子乳悬剂的配方筛选

采用室内生物测定的方法,从7种食用油,5种乳化剂,5种紫外保护剂和3种抗生素中筛选适合于顶孢霉Ahy1分生孢子粉乳悬剂的助剂配方。结果表明,姜油与顶孢霉Ahy1分生孢子粉混合贮130 d,分生孢子的萌发率最高,对孢子的生物活性无明显影响。在乳化剂、紫外保护剂和抗生素的筛选中, 综合与Ahy1分生孢子粉的湿润力和生物相容性,选择吐温〖CD*2〗80与OP〖CD*2〗10的混剂为Ahy1孢子悬浮剂的乳化剂,十二烷基硫酸钠为湿润剂,腐植酸为紫外保护剂,硫酸链霉素为抗生素。以上助剂与顶孢霉孢子粉均有良好的生物相容性。     

圆锥掘氏梅里霉侵染秀丽隐杆线虫周期的扫描电镜观察

食线虫真菌在生物防治线虫领域发挥着举足轻重的作用,日益受到广泛关注。圆锥掘氏梅里霉（Drechmeria coniospora）是一种典型内寄生真菌,专一地侵染和寄生其宿主--线虫。利用高分辨率的扫描电子显微镜,观察得到D. coniospora侵染秀丽隐杆线虫整个过程的清晰图片,为研究D. coniospora侵染线虫及与侵染相关的基因提供了直接、客观地依据。扫描电镜结果显示,D. coniospora 通过分生孢子完成对线虫的识别,特异地吸附在线虫头部或生殖孔,进而进入线虫体内。分生孢子在线虫体内萌发,长出菌丝。当菌丝生长到一定程度后,进一步穿透线虫体壁,造成线虫死亡。在空气中生长的菌丝体产生新一代分生孢子,这些孢子成熟后,遇到线虫幼虫又将开始新一轮侵染周期。D. coniospora的这种特异侵染方式和高效侵染能力,使其成为生物防治线虫的潜在优良菌株,具有广阔地应用前景。     

枣果贮藏期红粉病菌鉴定及环境因子对其分生孢子萌发的影响

 在山西省临县、太谷县发现枣贮藏期红粉病,发病初期果实表面出现圆形或椭圆形的白色絮状霉点,后期形成较厚粉状霉层。从病样中分离获得2株代表性菌株,通过病原菌分离培养、致病性测定、形态学特征及ITS序列特征分析,确定引起枣贮藏期红粉病的致病菌为粉红单端孢(Trichothecium roseum)。适合该病菌分生孢子萌发的温度为20℃~25℃,相对湿度为大于75%,pH=4~10,致死温度为48℃、处理10 min。适宜芽管生长的温度为20℃~25℃,相对湿度为大于75%,最适pH=6。本研究结果可为枣贮藏期红粉病的诊断和防治措施的制定提供理论依据。     

应用均匀设计法筛选稗草病原菌产孢最佳配方培养基

 筛选生防菌最佳产孢培养基是高效、大量生产生防菌孢子的基础。应用均匀设计法结合二次多项式回归分析,从众多因素中筛选出稗草病原菌弯孢菌(Curvularia lunata)和互格交链孢菌(Alternaria alternata)最佳产孢培养基组分,建立多元二次回归数学模型。弯孢菌最佳产孢组分为胡萝卜、芹菜、欧芹、水芹、莴苣、蔗糖和Vc;互格交链孢菌最佳产孢组分为胡萝卜、芹菜、水芹、莴苣和蔗糖。根据回归模型计算理论(拟和)产孢值。比较实测产孢量和理论产孢值,结果表明,稗草病原菌的实测产孢量和回归模型拟合产孢值非常接近,拟合误差小。说明采用均匀设计法从众多因素中筛选培养基最佳成分是可行的。