Introgression of a gene for delayed pigment gland morphogenesis from Gossypium bickii into upland cotton

The presence of gossypol and its derivatives above the WHO/FAO standards (0.02–0.04%) in cotton seed oil and meal limits its usage as food and feed. To the contrary, the presence of pigment glands filled with gossypol and its derivatives helps to protect cotton plants from phytophageous pests. Thus a desirable cultivar would have glandless seeds on a glanded plant. This paper describes results on the successful introgression of this trait from Gossypium bickii into cultivated upland cotton. Five different tri‐specific hybrids (ABH1, ABH2, ABH3, ABH4 and ABH5) were obtained by crossing the amphidiploid F₁ (G. arboreum × G. bickii) with different gland genotypes of G. hirsutum as male parent. The hybrids were highly sterile, and their chromosome configuration at meiosis metaphase 1 (M1) in pollen mother cell (PMC) was 2n = 52 = 41.04 I + 4.54 II + 0.57 III + 0.04 IV. All five hybrids were similar in morphological characters, except for the gland expression and gossypol contents. The hybrid (ABH3) derived from genotype Gl₂Gl₂gl₃gl₃ of upland cotton (a single gene dominant line) had completely introgressed the target trait of G. bickii. While ABH1 and ABH2, which derived from recessive (gl₂gl₂gl₃gl₃) or dominant (GlGl) glandless upland cotton genotypes, had glandless seeds too, but the density and size of the glands on the plant were reduced significantly.     

比克氏棉和司笃克氏棉色素腺体形态建成的组织结构观察

对具有子叶色素腺体延缓形成性状的比克氏棉和种子有色素腺体但低酚的司笃克氏棉的休眠种子、幼胚发育过程和种子萌发过程中的子叶进行连续切片观察。结果表明,比克氏棉的种仁中虽无肉眼可见的色素腺体,但具有色素腺体原,其色素腺体形态建成从开花后子叶形态建成后开始到种子萌发后12h才完成。司笃克氏棉在幼胚发育过程中,也出现色素腺体原的结构,但保持的时间较短,到种子成熟时,其种仁中的色素腺体原大多已发育成正常的色素腺体,且色素腺体空腔中含有某些有色物质,腔壁明显不同于比克氏棉或一般有色素腺体棉。司笃克氏棉的色素腺体性状为介于一般有色素腺体棉和具有子叶色素腺体延缓形成性状棉种的中间过渡类型,这种性状在低酚棉育种研究中具有重要的实践意义。     

奶牛酪蛋白αs1基因片段的扩增及泌乳素对其基因表达的影响

从泌乳中国黑白花奶牛的乳腺组织中提取基因组RNA，根据报道的奶牛酪蛋白αs1 mRNA序列设计其上、下游引物，用RT-PCR进行cDNA扩增，获得1条434bp的片段。测序分析结果表明，该片段为奶牛酪蛋白αs1 cDNA的部分序列，编码130个氨基酸组成的多肽；除一个碱基发生变异外，其余部分与报道的乳腺酪蛋白αs1cDNA序列完全一致。以此为基础，并以GAPDH为内标，研究了不同浓度泌乳素对旋转培养下奶牛乳腺组织酪蛋白αs1基因表达的影响。结果表明，奶牛乳腺组织在培养24h后，泌乳素为10μg／mL组的酪蛋白αs1基因表达水平最高，且显著高于对照组和2．5μg/mL组（P〈0．01），而与5．0和7．5μg／mL组之间差异不显著（P〉0．05）；对照组与2．5、5．0和7．5μg／mL组之间，2．5μg／mL组与5．0、7．5和10．0μg／mL之间差异均极显著（P〈0．01），而5．0μg／mL以上的3组之间差异不显著（P〉0．05）。结果提示，泌乳素的添加浓度以5．0μg／mL为佳。     

转基因羊研究进展

转基因动物已成为当今生命科学发展的热点，其中转基因羊的研究又是转基因动物中较为活跃的领域。自1985年用显微注射法获得了第1只转基因羊以来，随后有关转基因羊获得成功及取得突破的相关报道逐渐增多；同时转基因羊的研制目的也从当初的转基因育种逐渐倾向于乳腺生物反应器，并亦取得显著成效。本文就此作一简要综述。     

新疆荷斯坦牛β防御素5基因的克隆、表达及表达产物的抑菌活性

【目的】克隆和表达新疆荷斯坦牛中性粒细胞防御素5(BNBD5)基因,对BNBD5蛋白进行纯化并分析其抗菌活性。【方法】利用RT-PCR方法扩增新疆荷斯坦奶牛BNBD5的cDNA序列,将BNBD5 cDNA克隆到原核表达载体pGEX-4T-2,测序分析后转化大肠埃希菌BL21(DE3)。经IPTG诱导后,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析;利用GST亲和柱纯化BNBD5蛋白,并进行体外抑菌试验。【结果】通过PCR扩增获得了218bp的牛BNBD5全长cDNA序列,经IPTG诱导,获得了约33 ku的牛BNBD5蛋白。牛BNBD5蛋白在15~25℃培养时的可溶性较37℃时多,且大多以包涵体形式存在,经纯化后最终获得了少量的目的蛋白。纯化的BNBD5蛋白对标准金黄色葡萄球菌和标准大肠埃希菌均具有明显的抑菌活性。【结论】克隆、表达了牛BNBD5基因,表达的BNBD5蛋白对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌都有抑菌活性。     

黑白花奶牛初乳中G6PDH GOT与乳腺分泌机能关系的研究

本文研究黑白花奶牛初乳中葡萄糖-β-磷酸脱氢酶(G6PDH),谷草转氨酶(GOT)、三氮醋酸沉淀蛋白(TCA-P)的动态变化,以及G6PDH,GOT与乳腺分泌机能的关系。结果表明:G6PDH,GOT,TCA-P在初乳7天的分泌模式为y=Ax~(-b)。初乳中每次挤奶乳样的G6PDH总量的7天平均值与日产乳量(3个月平均)存在显著正相关(r=0.7163,n=14,P<0.01);G6PDH与TCA-P的相关系数为r=0.7183(n=35).GOT与TCA-P的相关系数为r=0.8642(n=35)。本研究认为,黑白花奶牛初乳中的G6PDH、GOT活性可反映乳腺在初乳阶段的分泌机能,并可作为预测乳产量的指标。     

串联启动子调控下的t-PAcDNA乳腺定位表达

由牛β-Casein启动子与大鼠WAP启动子串联构建了t-PAcDNA乳腺定位表达载体pSVL-WAPβ-PA，将3种表达载体pSVL-βb-PA,pSVL-WAP-PA及pSVL-WAPβ-PA分别注入怀孕家兔乳腺导管中，溶圈试验结果显示，3种表达载体均能在家兔乳腺中表达，且以分娩后第4d的乳汁中表达水平最高，分别为390，440，450ug.L^-1，本试验为进一步研究t-PA基因乳腺定位表达调控和建立t-PA乳腺生物反应器奠定了基础。     

不同启动子调控下的t—PAcDNA乳腺定位表达

乳清酸蛋白 (WAP)和 β -酪蛋白 (β -Casein)是哺乳动物乳汁中的主要蛋白质 ,其基因 5′侧翼区常作为乳腺定位表达的调控序列。表达载体pSVL -WAP -tPA和pSVL - βb -tPA分别含 1.1kb的大鼠WAP启动子和 0 .6kb的牛β Casein启动子序列及t-PAcDNA。采用基因直接注射方法将 2种表达载体分别注入家兔乳腺中。溶圈试验结果显示 ,两种表达载体均能在兔乳腺细胞中得到表达 ,且以分娩后第 4天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 45 0ng·mL-1和390ng·mL-1。为进一步研究t-PA基因乳腺定位表达调控和建立t-PA乳腺生物反应器奠定了基础。     

鸡胚胎腺垂体促甲状腺激素细胞的发生及其变化

应用免疫组织化学方法,对第3.5～20.5 d鸡胚腺垂体促甲状腺激素亚单位(TSH撸┫赴姆⑸⑹亢托翁植急浠媛山辛搜芯俊=峁允荆杭ε叻⒂牡?0.5 d,有少量TSH呦赴植加谙俅固迩耙叮赴派常伲舜螅患ε叻⒂牡?4.5 d以后,TSH呦赴灾黾樱≒ < 0.05),细胞体积增大,胞浆增多,细胞着色浓,分布于腺垂体前叶边缘区,少量分布于后叶背侧。研究结果证明,鸡胚腺垂体TSH呦赴⑸谂咛シ⒂闹衅冢幌赴脑鲋撤只谭⑸诩ε叻⒂闹泻笃冢籘SH的合成和分泌功能在胚胎发育的后期最旺盛。TSH呦赴植加谙俅固迩耙逗秃笠侗巢唷?