Breaking seasonal limitation: year-round sporogenesis in the brown alga Laminaria saccharina by blocking the transport of putative sporulation inhibitors

Year-round induction of sporogenesis of Laminaria saccharina was performed by mechanically blocking the transport of the putative sporulation inhibitors produced by the blade meristem and culturing the plants in constant short days. Sporogenesis was successfully induced by removal of the blade meristem, either by cultivating distal blade fragments or by performing a transverse cut in the frond. The earliest sorus formation after artificial induction was 10 days. The age of the sporophytes used for induction was 6–11 months or 2 years in tank-grown or field-collected sporophytes, respectively. Zoospores were successfully released in all cases. Thus, by year-round artificial induction of sporogenesis, (1) sporeling production of L. saccharina and thereafter sporophyte cultivation could be achieved without seasonal limitation, and (2) the life cycle of L. saccharina (from spore to spore) could be completed within 8 months under controlled conditions.     

水稻纹枯菌总 DNA 提取方法的比较

DNA的浓度,尤其是DNA的纯度严重影响后续基因组酶切等结果。为寻找一种高质量的水稻纹枯菌总DNA的提取方法,采用CTAB法、CTAB改良法、SDS法、蜗牛酶法、蛋白酶K法5种方法分别提取水稻纹枯菌总DNA。通过紫外吸光度测定DNA的纯度和浓度、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增、限制性内切酶酶切反应及Southern杂交评价DNA的质量,最终得出蛋白酶K法是获取高质量水稻纹枯菌基因组DNA的最佳方法。     

3种微生态制剂的氨基酸组成及对鲤鱼消化酶活性的影响*

 采用HPLC法分析了枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和复合微生态制剂的氨基酸含量,这3种不同的微生态制剂的氨基酸含量分别为53.2g/100g干基,56.4g/100g干基,59.5g/100g干基。在统一饵料的基础上,分别按0.1%,0.2%和0.5%添加纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和复合微生态制剂养殖鲤鱼45d,分析了鲤鱼肠道和肝胰脏中蛋白酶和淀粉酶的活性。结果表明,添加纳豆芽孢杆菌0.1%~0.5%的试验组能显著地提高鲤鱼肠道蛋白酶的活性,0.1%和0.2%剂量组可显著地提高鲤鱼肝胰脏蛋白酶的活性,0.1%剂量组可较显著地提高鲤鱼肠道和肝胰脏的淀粉酶的活性。枯草芽孢杆菌对鱼类消化酶的影响作用与纳豆芽孢杆菌不尽相同,其0.1%~0.5%试验组对鲤鱼肠道蛋白酶和淀粉酶均有较显著的提高作用,但对鱼类肝胰脏的消化酶活力影响不大。相对于蛋白酶而言,枯草芽孢杆菌对鲤鱼肠道淀粉酶活力的提高更为有效。复合微生态制剂0.1%~0.5%的各试验组能显著地提高鲤鱼肠道和肝胰脏的蛋白酶和淀粉酶的活力,其对鲤鱼肠道和肝胰脏的蛋白酶和淀粉酶的活力的提高率要优于单一菌种的微生态制剂。复合微生态制剂作为水产养殖生物的饵料添加剂使用,应根据不同食性的鱼类和不同的饵料组成加以选择和组配,合理的添加量在0.1%~0.2%之间为宜。     

水稻纹枯病菌胞外蛋白酶分离纯化及部分特性分析

[目的]为深入研究水稻纹枯病菌的致病机理奠定基础。[方法]水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solaniKhn）发酵液经硫酸铵沉淀,用离子交换柱层析、疏水层析和分子筛层析方法分离纯化胞外蛋白酶。[结果]从水稻纹枯病菌发酵液中分离纯化到一个分子量约为49.5ku的胞外蛋白酶。其活性最适温度为30℃,最适pH为6.4。Zn^2＋、Fe^3＋、Cu^2＋对酶活性有抑制作用,Mg^2＋、Mn^2＋对酶活性无影响,Ca^2＋在低浓度下对酶活性有激活作用。[结论]水稻纹枯病菌可产生胞外蛋白酶,该胞外蛋白酶与水稻纹枯病菌致病性的关系还有待深入研究。     

昆虫取食和剪叶刺激对油松针叶内部分防御物质的诱导效应

为了研究自然条件下昆虫取食及剪叶刺激对油松诱导抗性的影响,本试验应用香草醛—盐酸法,亚硝酸钠—硝酸铝比色法以及紫外分光光度法,分析了剪叶和不同程度油松毛虫取食处理后,混交林和纯林中油松针叶内部分次生代谢物和蛋白酶抑制剂活性的动态变化。结果表明:剪叶及不同程度油松毛虫取食能够诱导缩合单宁、黄酮含量和胰蛋白酶抑制剂、胰凝乳蛋白酶抑制剂活性增加。与对照相比,胰凝乳蛋白酶抑制剂在混交林中的活性比纯林更为明显。说明剪叶及昆虫取食可诱导增加油松针叶内的缩合单宁和黄酮含量、提高胰蛋白酶抑制剂和胰凝乳蛋白酶抑制剂的活性,进而增强油松的抗虫性,林分类型可在一定程度上影响油松诱导防御物质的变化。     

菜籽粕蛋白肽制备工艺条件优化

试验改进了菜籽粕蛋白的酶解工艺,并对改进后的工艺条件进行了优化。采用2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白,分别考察了pH值、酶用量、酶解时间、温度、底物浓度对蛋白回收率的影响规律,在此基础上,利用响应面分析法对菜籽粕蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白的较优条件为pH11.5、温度50℃、底物浓度4%、水解时间173min、酶用量5778U·g-1,此时蛋白回收率可达87.18%。     

线粒体复合体Ⅰ呼吸抑制剂的研究

线粒体复合体Ⅰ呼吸抑制剂不仅在医药上有着重要的研究价值,在农药方面也有着特殊的意义。这类药剂的作用机制比较特殊,害虫不易产生抗性,是一类非常有前途的杀虫药剂。从植物,微生物等生物体中发现了许多线粒体复合体Ⅰ呼吸抑制剂,如鱼藤酮、粉蝶霉素A、辣椒碱,番荔枝内酯、myxalamid等,它们可以作为农药的先导化合物进行药物合成。根据不同的作用方式,线粒体复合体Ⅰ呼吸抑制剂可分3种类型,分别以粉蝶霉素A、鱼藤酮、辣椒碱为代表。     

绵羊瘤胃微生物胞外蛋白酶的动态及纯化

本实验用装有永久性瘤胃瘘管的成年新疆细毛羯羊3只,对饲喂前后瘤胃蛋白酶活性的变化规律及瘤胃液离心各组分的酶活比例进行测定,并对离心(12000转/min,30min,4℃)后的瘤胃上清液中的微生物胞外蛋白酶进行纯化。结果表明:①瘤胃蛋白酶活性在饲喂后3h左右最高,以后逐渐下降,至饲喂后8h左右恢复到饲喂前的水平。②瘤胃液中以游离形式存在的蛋白酶占40％,其余附着在微生物和饲料颗粒上。③用硫酸铵对上清液中的微生物胞外蛋白酶进行浓缩,依次经SephadexG—150、DEAE—Sephadex A—50和FPLC(Mono Q HR5/5柱)进行纯化后,得到电泳纯度的胞外蛋白酶品,其活力从1.77个单位/mg蛋白提高到295个单位/mg蛋白,提高了166.7倍,回收率为4.7％。SDS—PAGE测得纯化蛋白酶的分子量为38KD。     

樟树种子休眠机制初探

以樟树种子为试验材料,从种壳透水性和内源抑制物两方面探索种子休眠原因.结果表明:樟树种子坚硬的外壳影响种子的吸水透性;种壳、种仁中的萌发抑制物抑制了白菜种子的萌发率、淀粉酶活性以及白菜幼苗的鲜质量增加.种壳浸提液抑制强度顺序均为:种壳甲醇浸提液＞种壳乙醚浸提液＞种壳水浸提液,抑制物主要成分为极性物质,白菜种子萌发率依次...