壳聚糖微球的制备及其固定化木瓜蛋白酶的研究

用来源丰富且廉价,并具有许多优良生物特性的壳聚糖为原料,以简单易行的服交联法制备壳聚糖微球,并对其性状进行和分析。结果表明：它复合了壳聚糖与高分子微球的功能,然后,以壳聚糖微球为载体,用吸附－交联的联合固定化方法制备固定化木瓜蛋白酶,并研究了木瓜蛋白酶的最佳固定化条件。结果显示：木瓜蛋白酶的最佳固定化条件是给酶量为１．９２ｍｇ／ｇ、４～８℃吸附１２ｈ,再用体积分数为０．５％的戊二醛溶于４～８℃交联     

外源酶对英红九号红茶品质的影响研究

通过在萎凋过程中添加不同浓度的外源木聚糖酶、纤维素酶及木瓜蛋白酶,探讨了不同浓度外源酶对英红九号红茶品质的影响.结果表明,添加这3种外源酶对萎凋叶中的氨基酸和黄酮的含量有所影响.通过毛茶的生化组分分析结合感官审评,发现添加250 U/mL木聚糖酶处理能使毛茶品质达到最优,添加250、350 U/mL纤维素酶处理的毛茶品质较优,添加150、250 U/mL木瓜蛋白酶处理的毛茶品质较好.     

复合酶降解壳聚糖研究

以木瓜蛋白酶和纤维素酶对壳聚糖进行降解研究,分别考察温度、pH值、底物浓度、酶底比以及复合酶配比对降解过程的影响,然后通过红外光谱分析降解产物的结构.结果表明:最佳酶解条件为pH 5.0、温度45℃、底物浓度12g/L、酶底比6％、复合酶配比2:1.红外分析表明酶解前后壳聚糖化学结构没有发生改变.     

酶解去除甜菜废粕中蛋白质的研究

利用甜菜干粕为原料，进行木瓜酶脱除蛋白的单因素实验和正交实验，结果表明酶法最佳脱除蛋白工艺为：0．2％的木瓜蛋白酶液‘pH为6.6，温度为65℃，每次提取时间为60min，液料比为13：1(ml：g)，添加次数为2次，可脱除98．56％的总蛋白。     

家蚕丝素固定化木瓜蛋白酶的研究

采用质量分数为5％戊二醛在常温下处理脱胶丝素40min,洗净、真空干燥,制备活化丝素,以活化丝素为载体,采用共价交联法制备固定化木瓜蛋白酶。研究结果表明,最佳的固定化条件为：给酶量0．36mg／g(蛋白质质量浓度为0．12mg／mL)、pH7．5、温度4℃左右条件下,固定6h,所得到的固定化酶活力为1786．93U／g,活力回收高达69．54％。     

大豆多肽饮料加工技术研究

采用酶解技术对大豆多肽饮料的加工技术进行了研究。正交试验结果表明,木瓜蛋白酶质量浓度为8g/kg,温度为60℃,pH=7.0,水解3h时,大豆蛋白水解效果较好,酶解液的氨基态氮含量由210.6mg/kg增加到621.3mg/kg,增加了3倍。大豆多肽饮料配方是:大豆酶解液250g/kg,柠檬酸三钠0.5g/kg,磷酸三钠0.5g/kg,蔗糖60g/kg,稳定剂6g/kg,酸味调节剂和香精适量。     

固定化木瓜蛋白酶水解甲壳胺的研究

木瓜蛋白酶经戊二醛固定于自制的甲壳质上制成固定化木瓜蛋白酶，其水解甲壳胺的最佳条件是：45℃，pH4.0的1％的甲壳胺溶液（醋酸缓冲液配置），酶／底物比1：3．5（质量比）。震荡反应24h后，用超滤器分离不同分子量的甲壳胺低聚糖产物，结果产物中分子量小于10000的甲壳胺低聚糖得率约为45．55％，分子量小于5000的约为34．0％，优于游离木瓜蛋白酶水解甲壳胺的效果。此固定化酶可反复使用至少10次以上，总反应时间达192h，提高了酶的使用效率和酶解效果。     

条斑紫菜R-藻红蛋白酶解物的制备及其抗氧化和肿瘤细胞增殖抑制活性

【目的】研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响。【方法】采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性。【结果】R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为：木瓜蛋白酶添加量25 000 U•g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4 h。在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍;清除羟自由基能力为51.03%,较未酶解的R-藻红蛋白活性提高了3.22倍。随着浓度的增加,R-藻红蛋白及其酶解物对人肉瘤细胞U2O和人肝癌细胞HepG-2抑制生长作用增强。R-藻红蛋白对人肉瘤细胞U2O抑制作用的IC50值为2 431.32 μg•mL-1,其酶解物IC50值降低为1 271.46 μg•mL-1。R-藻红蛋白对肝癌细胞HepG-2抑制作用的IC50值为1 593.61 μg•mL-1,其酶解物IC50值降低为512.05 μg•mL-1。【结论】经木瓜蛋白酶酶解后,R-藻红蛋白酶解物具有较强的抗氧化和抑瘤活性。酶解技术可作为进一步提高R-藻红蛋白生物活性的有效手段。     

酶法提取烤鳗下脚料水解动物蛋白的研究

以烤鳗下脚料为原料，经蛋白酶水解后，提取水解动物蛋白，使废充物得到充分利用。通过正交实验，确定了木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、胃蛋白酶的最佳水解条件，选择了木瓜蛋白酶为最佳水解酶。     

寄生壮骨颗粒对木瓜蛋白酶诱导大鼠骨关节炎的作用研究

目的探讨寄生壮骨颗粒对木瓜蛋白酶诱导大鼠骨关节炎的治疗作用。方法采用膝关节内注射10%木瓜蛋白酶和0.03mol/LL-半胱氨酸混合溶液制备大鼠骨关节炎模型,造模后分别给予寄生壮骨颗粒(8.69g/kg、4.35g/kg、2.12g/kg)及阳性药盐酸氨基葡萄糖(0.13g/kg),每日1次,连续灌胃给药4周。测定大鼠体重、膝关节肿胀度,血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-3、MMP-13及滑膜组织中糖胺多糖的含量评价其治疗作用。结果寄生壮骨颗粒高、中剂量组能够显著降低血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-3、MMP-13的水平,增加滑膜组织中糖胺多糖的含量。结论寄生壮骨颗粒对木瓜蛋白酶诱导大鼠骨关节炎具有治疗作用,其机制可能与降低血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-3、MMP-13的水平和增加滑膜组织中糖胺多糖的含量有关。