进口球根花卉携人线虫营养类群及数量检测

为了检测进口球根花卉种球携带的线虫，尤其是检疫名录之外的植物线虫。本研究首次采用本实验室设计的线虫7d自然游离分离法对进口花卉种球所携带的线虫进行了数量检测和营养类群归类。结果表明：1）从荷兰和新西兰进口的百合、郁金香等6种花卉种球中检出的线虫共涉及3目10科12属．其中非植物线虫分属1目3科4属，检疫名录以外的植物线虫数量占前3位的属有拟滑刃属（Aphelenchoides）、滑刃属（Aphelenchus）和短体属（Pratylenchus），分别占植物线虫总数的77．1％、16．4％和2．9％；2）新西兰进口百合种球中检测出的拟滑刃属线虫数量（426条／10球）为荷兰进口品种的3．5倍（123条／10球）。3）上述两国进口的百合种球中有3个品种携带潜在危险性线虫——根结属线虫，但数量较少，平均2～7条／10球．同时还携带非植物线虫，分属于盆咽属、拟丽突属、头叶属和小杆属。数量在50～300条／10球之间。     

土壤线虫培养方法研究

土壤线虫作为模式生物的一种,已广泛应用于土壤生物群落和土壤污染的指示研究,但有关土壤线虫的培养方法鲜有报道.在实验室条件下,利用3种培养基(生菜蛋黄培养基、葡萄糖酵母菌培养基及土壤浸出液)、5个温度梯度(15、20、25、30、35℃)对土壤线虫进行培养.结果显示,与土壤培养液和葡萄糖酵母菌培养基相比,土壤线虫更适宜在生菜蛋黄(lettuce eggs,LE)培养基中生长;在15～35℃的温度范围内,最佳的培养温度为25℃.     

基于松墨天牛种群动态及其影响因素分析的松材线虫病风险评价

【目的】分析重庆市綦江区松墨天牛种群发生动态及松材线虫病的灾变风险,为深入揭示该虫在当地的成灾机制及防控基础提供依据。【方法】对2015年和2016年APF-I型诱捕器诱捕松墨天牛成虫数据、环境因子、天牛携带线虫数和携带线虫天牛数及枯死松树数量等指标进行统计分析,在此基础上评估了重庆市綦江区松材线虫病的灾变风险。【结果】在年发生总量上,2015年以古南街道松墨天牛种群诱集量最多,其次是三江镇;而2016年以北部林场最多,数量显著增加,其次是篆塘镇。在年发生动态上,2015年和2016年多数林场/镇成虫高峰期主要集中在6月30日至8月1日,但北部林场2016年为9月1日。按提取的3个主成分综合值排序,对天牛成虫发生量影响力由大到小的关键环境因子依次是林型、胸径、郁闭度和树高。由于总方差49.93%的贡献率来自第1主成分,因此从第1主成分看,影响力大小依次是胸径、树高和林型。各地天牛发生量与天牛携带的线虫数以及枯死松树数量均呈显著正相关关系,天牛携带的线虫数与枯死松树数量也呈显著正相关关系。聚类分析结果表明,北部林场、古南街道和篆塘镇15个村子在松材线虫病灾变风险方面明显地聚为3类,其中古南街道花坝村、连城村、清水村和南山村聚为一类,北部林场荣农村、十隆村、顺山村、可乐村、长春村、狮岭村以及篆塘镇铁马村、群乐村、联合村、珠滩村聚为一类,篆塘镇葡萄村独成一类,分别为松材线虫病主发区、高风险区和低风险区。【结论】重庆市綦江区松墨天牛种群呈加速扩散态势,松材线虫病在各环境因素作用下流行灾变的风险高,应加强检疫管理和提高综合防控技术。     

油萝卜抗胞囊线虫基因的染色体定位及其在油菜附加系中的稳定性

【目的】油萝卜（2n=18,9条染色体分别被称作a～i）具有抗甜菜胞囊线虫的基因。探索油萝卜携带的抗甜菜胞囊线虫基因所在的染色体和外源的油萝卜染色体在油菜中的遗传稳定性。【方法】9个油菜附加系进行自花受粉,分别获得附加系的自交F2代。利用筛选的分子标记检测和原位杂交（FISH）检测附加染色体在F2代中的遗传稳定性;通过对9个油菜附加系F2代接种甜菜胞囊线虫的2龄幼虫,鉴定携带抗甜菜胞囊线虫基因所在的染色体。【结果】9个附加系自交F2代中的附加染色体遗传表现不一,5个油菜附加系的F2代中均有2条附加染色体,能稳定遗传;4个附加系的自交后代中附加染色体的遗传表现不稳定,部分后代中无附加染色体。FISH检测9个附加系自交F2代中的附加染色体表明：与分子标记检测的结果相符,并且4个不稳定的附加系中,有的自交后代虽然有附加染色体,但有1或2条。接种甜菜胞囊线虫测定结果表明,含有油萝卜染色体DD的油菜附加系对甜菜胞囊线虫的抗性水平与附加染色体的供体油萝卜相当,而其它8个附加系的自交后代未表现出抗性,与受体油菜相近。【结论】油萝卜的9条染色体分别附加到油菜中后,其遗传稳定性因附加的染色体而异,有的能稳定遗传,有的在自交后代中丢失1或2条;抗甜菜胞囊线虫的基因在d染色体上。     

Identification of a major gene (Mex-1) from Coffea canephora conferring resistance to Meloidogyne exigua in Coffea arabica

Among the most damaging root-knot nematode species, Meloidogyne exigua is especially common in Latin America and constitutes a major agronomic constraint in all major coffee-growing ( Coffea arabica ) areas. Growing nematode-resistant coffee represents the most promising option for control of the pest. The present study aimed to determine the mode of inheritance of the M. exigua resistance transferred into C. arabica from a related species, Coffea canephora , and to identify associated molecular markers. Segregation data analysis of F ₂ progeny derived from a cross between the resistant introgression line T5296 and the susceptible accession Et6 showed that the resistance to M. exigua is controlled by a simply inherited major gene (designated the Mex -1 locus). The gall index distribution exhibited by the F ₂ individuals suggested incomplete dominant expression. Fourteen AFLP markers were found associated with the resistance to M. exigua and a localized genetic map of the chromosome segment carrying Mex -1 was constructed. Furthermore, the association of the identified AFLP markers with Mex -1 was confirmed by analysis of a set of genotypes involving 28 introgression Arabica lines either resistant or susceptible to M. exigua in field conditions. These results represent an important starting point to enhance backcross breeding programmes and to perform an early selection of resistant seedlings.     

Influence of temperature on the motility of Pseudomonas oryzihabitans and control of Globodera rostochiensis

The motility and efficacy of Pseudomonas oryzihabitans as a biocontrol agent against the potato cyst nematode Globodera rostochiensis were studied with respect to temperature. The influence of soil moisture on bacterial movement was also tested. In a closed container trial, P. oryzihabitans significantly reduced invasion of second stage juveniles (J2) of G. rostochiensis in potato roots, its effect being more marked at 25 and 21 °C than at 17 °C. P. oryzihabitans motility in vitro was optimal at 26 °C and inhibited at temperatures below 18 °C. In soil, both temperature and matric potential affected bacterial movement. At 16 °C its movement and survival were suppressed, but they were unaffected at 25 °C. At both temperatures the biocontrol agent moved faster in the wetter (−0.03 MPa) than in the drier soil (−0.1 MPa). These results suggest that temperature is a key factor in determining the potential of P. oryzihabitans as a biocontrol agent.     

沼液淹没土壤抑制根结线虫及对土壤线虫群落的影响

为探索沼液抑制根结线虫的效果,本研究通过盆栽试验,以番茄为试供作物,对比了种植前沼液淹没土壤(BSS)、种植期间浇灌沼液(BS)和加热(HE)3种方法对根结线虫的防控效果。结果表明,与不采取任何措施的对照(CK)处理相比, BSS处理抑制根结线虫效果最为明显,防效高达97.1%,根结指数分别比HE和BS处理降低96.9%和92.9%。HE处理尽管在处理土壤后显著降低了根结线虫数量,但在最后破坏性取样时(结束试验)出现反弹,根结线虫数量甚至高于CK处理。对于土壤线虫群落,CK处理中以植食性线虫为主(81.8%);两个沼液处理中食细菌线虫占优势(平均78.3%),且其中的杂食捕食性线虫在土壤前处理后消失,在试验结束时又重新出现,但所占比例依然非常低。沼液淹水方式的高效防控效果揭示了利用沼液防控根结线虫的关键期在于线虫入侵到植物根部之前的幼虫期。然而,在盆栽系统中,沼液淹水的方式也对作物生长表现出了一定的抑制趋势。高量沼液施用防控病害的同时引发的植物毒害作用以及环境污染风险,需要进一步开展田间研究。     

甜瓜属野生种及其与黄瓜种间杂交后代抗根结线虫初步研究

为了鉴定甜瓜属野生种酸黄瓜 (CucumishystrixChakr.)对南方根结线虫 [Meloidogyneincognit(Kofoid&White)Chit wood]的抗性 ,进而评估抗性向酸黄瓜与栽培黄瓜种间杂种的转移 ,选用了酸黄瓜、 4个栽培黄瓜材料、两种倍性水平的 3个正反交杂种F1和 1个回交后代作为试材 ,在温室中进行抗性鉴定和筛选。结果表明 ,酸黄瓜对南方根结线虫具有高度抗性 ,而 4个栽培黄瓜材料均为高度敏感。酸黄瓜平均每株根系形成约 3个根结 ,栽培黄瓜材料每株根系的根结数超过 10 0个。酸黄瓜通过与栽培黄瓜的正反交 ,其抗性已被部分转移到杂种之中。当杂种作为供体亲本与栽培黄瓜进行回交时 ,抗性又被进一步转移到回交一代 (BCF1)中     

捕食线虫性真菌的分离培养及分布规律

对自然界中的捕食线虫性真菌进行了分离和种属区分，并对分布规律进行了研究。从土壤、粪便等材料中获得了2类活性较强的捕食线虫性菌株：即套捕型(hooping)捕食线虫性真菌和粘捕型(sticking)捕食线虫性真菌。主要的代表种类有3种。这些捕食线虫性真菌在捕食性结构分生孢子形态及某些生物学特性上有一定差异。套捕型捕食线虫性真菌代表种为少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospara)和梨形指环菌(Dactylaria pyriformis)，它们以菌环、菌网作为捕食性结构(器官)，以套捕方式杀灭线虫幼虫。梨形指环菌可产生多量厚垣孢子(chlamyalospore)。粘捕型捕食线虫性真菌代表种为纺锤隔指孢菌(Dactylella ellipsospora)。可形成菌结捕食线虫性结构，以粘捕的方式杀灭线虫幼虫。结果表明：捕食线虫性真菌在土壤和家畜粪便中的分离率是40．41％；此类菌适合于生存在阴暗、潮湿、富含腐植质的环境中。在温暖季节时，采用0．4g／L玉米粉琼脂培养基(CMA)易于对其进行分离培养。     

茉莉花上的一种外寄生根线虫

调查江苏南京、苏州和扬州市郊盆栽茉莉花根际土样66份,矮化线虫的出现机率分别为86%,87%和100%。5～10年生,植株衰退,长势差的茉莉花,每100ml 湿土样中的虫量一般在1000条以上。根据该线虫的主要形态特征和测计数据,鉴定为 Tylenchorhynchus leviterminalis Siddiqi,Mukherjee etDasqupta,1982。用分离到的这种线虫,在水洋菜平板上接种扦插苗根部,结果表明,该线虫是茉莉花上的一种迁移性外寄生根线虫。