BALB/c小鼠肺组织中氧化及抗氧化系统的动态研究

为探讨BALB/c小鼠正常生理状况下肺组织中的氧化及抗氧化系统的动态变化规律,采用分光光度计法分别测定了肺组织中的黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性变化。结果表明,在第3、6、7、12天BALB/c小鼠肺组织的XOD活性、MDA含量、SOD活性均无显著差异（P＞0.05）。说明生理状态下,BALB/c小鼠肺组织中自由基的产生与清除的酶系统之间维持动态平衡。     

Experimental infection with Toxocara cati in BALB/c mice, migratory behaviour and pathological changes

Experimental inoculations of 1000 Toxocara cati larval eggs were carried out in 18 BALB/c mice. The T. cati eggs used for inoculation were collected from the faeces of naturally infected cats. Euthanasia was performed on two mice on days 1, 2, 3, 4, 5, 6, 14, 21 and 28 post-inoculation (p.i.). Tissue samples were taken for digestion and histopathology. Larvae were recovered from all infected mice and the average of all larvae recovered was 28.3% (95%; CI: 14.1-42.4). Maximum number was obtained from liver on days 1 and 2 p.i.; from the lung on day 2 p.i. and from the brain on day 28 p.i. In muscle, the recovery was high as from day 3 p.i., with the maximum obtained on day 28 p.i. Superficial foci of congestion and haemorrhage were macroscopically observed in the lungs between days 2 and 5 p.i. and in the brain between days 3 and 6 p.i. Microscopic lesions were observed in the liver between days 2 and 14 p.i., with periportal and subcapsule inflammatory infiltrates. In the lungs, haemorrhages and inflammatory infiltrates can be observed in the alveolar parenchyma, close to bronchioles and large blood vessels. In the brain, congestive areas without inflammatory reactions were seen. In muscle, the presence of inflammatory infiltrates and degenerated muscle can be observed surrounding a parasite larva. These same lesions were observed in myocardium and pericardium. The kidneys were congested with inflammatory infiltrates. The inflammatory cells present in all the tissues studied were lymphocytes, neutrophils and a few eosinophils. Formation of granulomas or signs of larva encapsulation were not observed. The migratory pattern of T. cati larvae in BALB/c mice and its tendency to become concentrated in the muscle reinforce the importance of the mouse as a paratenic host for the parasite's cycle in the environment.     

混合稀土对小白鼠生长的影响

试验采用单因子设计,在相同基础日粮中分别添加0、25、50、75mg/kg的混合碳酸稀土组成4种日粮。20d的饲养试验结果表明,混合稀土能显著提高小白鼠的生长。与对照组相比,日粮中添加混合稀土能显著提高小白鼠的体增重(P<0.05)和采食量(P<0.05)。     

DNA指纹技术在近交系小鼠遗传检测中的应用研究

采用生物素标记的(GGAT)4寡核苷酸探针对C57BL/6J、BALB/c和DBA/2三种近交系小鼠进行了DNA指纹图分析.结果表明:(GGAT)4寡核苷酸探针对上述3种近交系小鼠产生的DNA指纹图的图带数均为10-12条,具有良好的多态性,品系内平均DNA指纹图的相似系数在0.92~1.00的范围内,具有相同指纹图的概率均在0.40以上,极显著地高于品系间的相似系数(0.21~0.39)和相同指纹图的概率(P<3.10×10-7),说明(GGAT)4寡核苷酸探针可用于制作近交系小鼠的DNA指纹图,以对其进行遗传检测.     

猪流感病毒A/swine/Guangdong/2/2012(H1N1)毒株攻毒BALB/c小鼠细胞因子动态变化的研究

为了测定H1N1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)对小鼠的致病性,本试验对A/swine/Guangdong/2/2012(H1N1)株SIV HA基因进行克隆及遗传分析,并将SIV尿囊液经鼻腔感染6周龄BALB/c小鼠,观察感染后小鼠的一般状况、器官系数和组织病理学变化,在病毒感染后第1、3和7天使用荧光定量PCR测定小鼠肺脏、脾脏、脑组织中7种细胞因子mRNA的表达量,研究其对小鼠的致病特性。结果显示,该病毒属于经典SIV,病毒经鼻腔感染后可引起小鼠活动减少、采食量降低,但无咳嗽和死亡;病理组织学变化为肺间隔较正常组织明显增厚,毛细血管明显扩张充血,周围肺泡腔呈代偿性肺气肿;小鼠肺脏、脾脏组织样本中IFN-α、IFN-β、IP-10、IL-1β、TNF-α、IRF-3和IL-10 mRNA含量在感染后第3天均显著升高(P<0.05),而脑组织样本中IL-1β和IL-10在小鼠攻毒后第3和7天均显著上调(P<0.05)。     

白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响

为探讨白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响,本研究将60只雌性昆明小鼠随机等分为4组,1~3组分别以50、100和150 mg/kg 体重的白花蛇舌草多糖粗提物灌胃小鼠,连续给药7 d,第4组以等量的生理盐水灌胃,作为空白对照组。最后一次给药12 h后,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,2头份/只,分别于给药结束后的7、14和21 d采小鼠外周血并分离淋巴细胞和血清。用淋巴细胞转化试验(CCK-8法)测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平;测定各组小鼠体重;21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,并测定脾脏指数。统计学分析结果显示,白花蛇舌草多糖组小鼠的外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏指数和体重均显著高于对照组(P<0.05),且具有量效关系。结果表明,白花蛇舌草多糖能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育。本试验结果为利用白花蛇舌草多糖开发保健产品提供了参考。     

单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种人畜共患食源性致病菌,能引起人和动物较为严重的感染症状。现广泛使用具有免疫活性的小鼠模型测定半数致死量(LD₅₀)来评价不同LM菌株的致病性。为建立LM的ICR小鼠模型,本研究采用1/2a血清型的N21 LM菌株,分别以10⁶、10⁷、10⁸、10⁹和10¹⁰ CFU的剂量口腔灌注感染6周龄ICR小鼠,每组10只;另取10只接种PBS作为对照组,测定LM对ICR小鼠的LD₅₀;另取40只小鼠,平均分为2组,公母各半,以测定的LD₅₀剂量接种LM,分别对各组小鼠临床症状、组织病理变化、体重变化及组织中细菌载量进行评价。结果发现,N21 LM菌株对ICR小鼠的LD₅₀为10^9.25 CFU;感染周期为10 d左右,感染小鼠出现被毛粗糙、精神萎靡、阴茎垂出及体重下降等临床症状。组织病理学分析结果显示,肝脏先后出现实质内灶状细菌团块、形成血栓、细胞坏死等;脾脏主要表现为白髓内淋巴细胞减少;肺脏主要表现为纤维素性肺炎。菌落计数和Real-time PCR的检测结果发现肝脏中细菌载量最高,脾脏次之。结果表明,ICR小鼠能作为单核细胞增生性李斯特菌的感染模型。本试验结果为研究LM的致病机制、疫苗研究及抗菌肽转基因小鼠抗LM的评价奠定了基础。     

沙棘不同器官提取物对小鼠实体瘤的抗癌药效学研究

用沙棘叶、果、茎、根的提取物和籽油,对患H22和EAC的实体瘤小鼠进行灌胃实验。结果表明,沙棘不同器官提取物和籽油都具有显著的抑瘤效果。在15个不同处理剂量组中,有10个剂量组的抑瘤率都超过了30%,占到处理总数的66.6%。沙棘不同器官提取物对实体瘤小鼠的抑瘤率表现为:叶>果>油>茎>根,叶和果的高剂量组抑瘤率分别为58%和46.7%。沙棘提取物抑瘤的主要原因是增强了实体瘤小鼠的免疫功能,提高了脾指数和胸腺指数,且胸腺指数效果大于脾指数的。沙棘提取物有利于调节患病小鼠的脏器活力。     

海带岩藻黄素对小鼠脂质过氧化抑制作用的影响

用硫代巴比妥酸法测定小鼠肝组织及线粒体中丙二醛的含量,用分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体的肿胀程度,从而考察海带Laminaria japonica岩藻黄素对小鼠脂质体系的抗氧化能力。结果表明：岩藻黄素能在自发和诱导条件下抑制肝匀浆液及线粒体中丙二醛的产生,降低红细胞的溶血程度,并能减轻肝线粒体的肿胀程度,且其抑制作用均呈明显的剂量效应关系。这说明海带岩藻黄素具有明显的抗氧化作用。     

PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体的构建及其整合效率的检测

【目的】构建在小鼠水平上实现多个目的基因的表达以及标记基因安全删除的转基因载体。【方法】以载体为模板,分别扩增SV40P neo、IRES、tk-PloyA,通过overlap PCR连接,并在两端添加方向相同的LoxP序列,构建转基因基本载体PB-NIT;然后通过overlap PCR扩增获得Tet-CMV-SV40 T-T2A-p 53-PolyA基因表达盒,将其插入PB-NIT中,构建载体PB-NIT-STP;最后将转录因子激活域 rtTA 通过同尾酶连接插入PB-NIT-STP,构建载体PB-rtTA-NIT-STP。【结果】经酶切和测序等鉴定,以上载体均正确;经转座活性鉴定,共转染转座子载体PB-rtTA-NIT-STP和转座酶载体比只转染转座子载体获得的阳性克隆数提高了20倍。【结论】得到了基于PiggyBac转座子的可用于正负向筛选和诱导目的基因表达的转基因载体。