Incidence and genetic diversity of Peach latent mosaic viroid and Hop stunt viroid in stone fruits in Serbia

Tissue-imprint hybridization (TIH) assay was validated for large-scale detection of Peach latent mosaic viroid (PLMVd) and Hop stunt viroid (HSVd). All 72 collected leaves (100%) from 2 PLMVd- and 2 HSVd-infected trees were positive in TIH, regardless of the geographic orientation of the scaffold, level of the canopy and position of the leaf in the shoot. In a large-scale survey in Serbia, we tested by TIH 871 trees of stone fruits, representing 602 cultivars from fruit collections in Belgrade, Čačak and Novi Sad. PLMVd was detected in 185 (50%) peach trees or 95 (54%) cultivars and HSVd in 2 apricot trees and cultivars (2%). The occurrence of HSVd is a new report for Serbia. No viroid infection was found in European plums, sweet cherries, sour cherries and wild Prunus spp. PLMVd-infected peach cultivars originated from the world’s main breeding centres of this crop. Western European and Asian cultivars were the most infected (58%) followed by those originating from North America (50%). Nine PLMVd and two HSVd isolates were sequenced and analyzed. All showed PMLVd sequences clustered together in the previously reported phylogenetic group III. Both HSVd isolates were found to be derived from recombinant events, but that of the cv. Saturn represented a putative new phylogenetic group of HSVd.     

进境日本豇豆中黑眼豇豆花叶病毒的检测与鉴定

从进口日本豇豆中随机挑选种子在隔离温室内种植。出苗后,发现有典型花叶症状的植株。对该病株进行电镜观测,发现有线条形病毒粒体,大小约为750nm×13nm。设计特异性引物(BL-5/BL-6),对该样品进行黑眼豇豆花叶病毒的反转录(RT)PCR分子检测。电泳检测表明,扩增出一条特异性的目标条带,大小为338bp。对该样品的RT-PCR产物进行测序,结果表明该序列与黑眼豇豆花叶病毒(GENEBANK登录号:AY575773)的序列有4个碱基差异,同源性为98.8%。鉴定该病毒为黑眼豇豆花叶病毒(Blackeye cowpea mosaicvirus)。     

盆栽文心兰上的凤仙花坏死斑病毒的检测与分子鉴定

应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)和RT-PCR技术从表现有同心圆褪绿斑的进境盆栽文心兰上检测出凤仙花坏死斑病毒.ELISA检测发现该病毒在文心兰上分布不均匀,病毒主要集中在表现症状的病斑处.同时,根据该病毒S RNA上的核衣壳蛋白(N)基因序列保守区设计了一对特异性引物,利用RT-PCR方法检测得到500bp的预期DNA片段.经HindⅢI和EcolI酶切验证后克隆了该序列片段,序列分析结果表明该病毒的N基因序列和已经发表的凤仙花坏死斑病毒(登陆号为AB109100、AB207803、DQ425096)核苷酸序列同源性为99%,进一步确认进境盆栽文心兰上携带凤仙花坏死病毒.这是INSV首次在中国的报道,也是第一次在文心兰上发现该病毒.     

梅花鹿鹿茸细胞端粒酶活性及其mRNA表达的检测

[目的]研究鹿茸生长期端粒酶的表达,为揭示鹿茸生长发育的调控机制提供了新思路。[方法]在鹿茸快速生长阶段,采用改进的TRAP（端粒重复序列扩增技术）法检测鹿茸顶端增殖区的间充质层、前软骨层和软骨层细胞及下端成熟区的端粒酶活性。同时,采用RT-PCR的方法检测各组织细胞中端粒酶催化亚基（TERT）mRNA的表达水平。[结果]在顶端增生区各组织细胞中均检测到了不同程度的端粒酶活性,间质细胞、前软骨细胞和软骨细胞中的相对端粒酶活力分别为91.2、46.4和13.7,而在成熟区组织中则检测不到端粒酶活性。RT-PCR法检测的各组织细胞中TERTmRNA的表达水平与端粒酶活性检测结果一致。[结论]在鹿茸快速生长阶段,其增殖区表达端粒酶,并且端粒酶活性随组织层细胞的分化程度的增高而逐渐降低,说明端粒酶可能在鹿茸的生长过程中起重要的调控作用。     

不同干燥预处理对杨木应拉木孔隙结构的影响

采用CO<,2>超临界干燥、冷冻干燥和常规干燥对杨木应拉木和对应木进行干燥预处理,通过干燥前后试样的形变和吸附等温线,比较不同干燥预处理对杨木应拉木孔隙结构的影响,为定量表征应拉木的微观孔隙结构提供理论依据.结果表明:经CO<,2>超临界干燥的杨木应拉木具有完好的介孔特征(孔径在2～50 nm),BET比表面积和中孔体...     

番木瓜的PRSV接种及其组培苗的RT-PCR检测

随着番木瓜环斑病毒病的加重,对番木瓜进行PRSV病毒接种,是有效防治PRSV和番木瓜抗PRSV重要措施之一.根据GenBank上已有的PRSV-CP基因序列,设计1对特异引物PRSVCP3/PRSVCP4,同时根据EF183499、HQ424465和美国夏威夷PRSV-CP序列设计保守区特异性引物PRSVCP1/PRS...     

辣椒新品种黔辣5号的选育

黔辣5号是从贵州兴义市地方农家自留栽培种筛选的优良单株经自交定向选育的常规干鲜两用品种,该品种中熟.2008-2009年贵州省辣椒省区试2年平均每667 m2产干椒297.33 kg、比对照种增产21.28％,2009年生产试验平均每667 m2产干椒256.08 kg、比对照种增产17.03％;平均生育期203.5 ...     

扁穗冰草脱水素基因的克隆和表达特性分析

扁穗冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn)生长于干旱、半干旱地区,具有耐旱、耐寒、抗病等特性。采用RT-PCR技术从扁穗冰草叶片中克隆3个脱水素基因Acwcor410,Acwzy2和Acwcs120)和1个肌动蛋白β-actin基因(Acβ-actin)。半定量RT-PCR分析表明,Acwcor410基因对温度敏感,对干旱胁迫不敏感;Acwzy2基因对温度不敏感,而对干旱胁迫敏感;Acwcs120基因则对冷胁迫及干旱胁迫均有响应。Western blot表明,扁穗冰草含有40kD脱水素,该蛋白的表达随冷胁迫和干旱胁迫程度的变化而变化,对干旱胁迫的响应比冷胁迫更为明显,推测该脱水素属于干旱敏感型。