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猪雄性生殖干细胞的分离培养及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在探索猪雄性生殖干细胞(mGSCs)体外分离、培养的适宜条件,建立猪雄性生殖干细胞体外培养体系。采用两步酶消化法对新生小猪睾丸生殖干细胞进行了体外分离和初步的培养鉴定,并利用层黏连蛋白和明胶的不同贴壁特性,比较2种差易贴壁分选方法的富集效果,并对传代后的干细胞培养1周后进行碱性磷酸酶染色鉴定,通过免疫荧光技术检测培养细胞是否表达干细胞标志蛋白OCT-4。试验结果表明,层黏连蛋白更适用于猪生殖干细胞的富集、培养,细胞分选效率及增殖生长明显优于采用明胶分选的方法。培养的mGSCs拥有与小鼠mGSCs相同的形态、增殖及表达特征。鉴定结果显示,生长细胞克隆碱性磷酸酶染色呈阳性,支持细胞碱性磷酸酶染色呈阴性;培养的生殖干细胞克隆表达转录蛋白OCT-4,而饲养层支持细胞OCT-4抗体染色则呈阴性。结果表明培养的干细胞克隆仍保持较好的干细胞活性,保持正常的自我复制和分化潜能,初步建立了生殖干细胞培养体系。 相似文献
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类器官(organoids)来源于自组织和自我更新的干细胞,是利用干细胞的自组织特性进行体外3D培养后形成的细胞团,与来源器官密切相关,再现了来源器官的三维细胞结构,并为探索来源器官的发病机制提供了新的模型。类器官系统是由自分泌、旁分泌或邻分泌信号调节下的细胞,或者外源性添加的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)底物、小分子和生长因子等衍生而来,这些因素的相互作用创造了一个动态的环境,指导干细胞的自我更新和分化,以及细胞在类器官中的自我组装。诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)重编程方法结合3D类器官工具,使患者来源的类器官作为动物模型和人类临床试验之间的桥梁,是对细胞研究和在体试验的补充。在研究来源器官发育、生物学和病理生理学方面,类器官不仅是一种比传统细胞培养更具生理相关性的体外模型,而且还是再生医学和个性化医学领域中的新模型,有望成为研究营养素、药物、毒物及毒素等的作用机制及药物的筛选、再生医学等领域的重要模型。总之,类器官技术的发展增强了人们对器官和组织生理生化功能的认知。作者对肠、脑、肺脏、肝脏、子宫、卵巢等类器官培养和应用的研究进展进行综述,以期为类器官相关科研及应用提供参考。 相似文献
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H-Y抗血清的制备及检测研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选用8 ~12 周龄纯系的 B A L B/ C 母鼠, 用同日龄的 B A L B/ C 公鼠采取皮肤移植和脾细胞注射2 种方式免疫, 制备 H Y 抗血清, 经精子微量细胞毒性试验, 筛选抗血清。皮肤移植5 只小鼠中只有1 只产生较好的抗血清, 脾细胞注射的4 只小鼠都能产生较好的抗血清, 产生抗血清的小鼠占55 % 。抗血清与昆明鼠正常8cell 早期桑椹胚培养5 ~6 、18 和24 h 后, 退化率达433 % , 经 X2 检验差异不显著( P > 005) , 符合自然性比例。 相似文献
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LIU Bin GUO Jun Wudubala MA Yue-jun XIN Lei-yong ZHAO Cun-fa LI Yu-rong YIN Jun 《中国畜牧兽医》2017,44(4):994-1000
In order to extend the anagen of cashmere goat hair follicles and increase the production of cashmere,this study was performed with artificially shorten the daylight time among Arbas White cashmere goats. Skin tissue sections from cashmere goats were collected to compare the morphologic changes between artificial daylight and natural daylight,and immunohistochemical method was used to study the hair follicle cell proliferation and important protein expression in related signaling pathways. The results showed that strong cell proliferation occurred in cashmere goat hair follicle cells during artificial daylight,plenty of cytokeratin 15 (K15) positive signals were distributed in the outer root sheath,β-catenin protein was actively expressed in hair matrix and root sheath, indicating that the hair follicles were in the anagen growth phase;Meanwhile,cashmere goat hair follicles under natural daylight were in telogen with weak signals. Above all prove that short photoperiod played an important role in promoting hair follicle growth,the artificial short photoperiod could change hair follicle growth cycle and make hair follicles earlier enter to the anagen growth phase,causing a variety of typical gene expressions during hair follicle growth. 相似文献
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Effects of Addition of Tissue‐Type Plasminogen Activator in In Vitro Fertilization Medium on Bovine Embryo Development and Quality 下载免费PDF全文
F Krania E Dovolou CA Rekkas EK Theodosiadou I Pappas GS Amiridis 《Reproduction in domestic animals》2015,50(1):112-120
Plasminogen activators/Plasmin system plays pivotal role in regulating reproductive functions of mammals. Here, we examined the effects of modification of in vitro fertilization medium (IVF medium) with the addition of tissue‐type plasminogen activator (t‐PA), on bovine embryo development and quality, assessed by quantification of expression of various genes related to metabolism, oxidation, implantation and apoptosis. In addition, plasminogen activator activity (PAA) and plasminogen activator inhibition (PAI) were measured in the spent media. After conventional IVM, 2016 cumulus‐oocyte complexes (COCs) were divided into four groups with modified composition of the IVF medium containing t‐PA and/or its inhibitor epsilon‐aminocaproic acid (control, t‐PA, t‐PA+ε‐ACA, ε‐ACA). Presumptive zygotes were cultured for 8 days in synthetic oviductal fluid (SOF) medium; gene expression studies were carried out on morulae and blastocysts. t‐PA alone significantly suppressed cleavage and blastocyst formation rates, but this effect was neutralized by the addition of ε‐ACA. PAA in the treated group was significantly reduced by ε‐ACA, but without total elimination. Significant differences were detected in the expression of genes related to apoptosis and/or cell cycle arrest (BAX, BCL2L1, KAT2B) between embryos produced in t‐PA‐modified media and controls, giving an overall notion that the inferior developmental competence of treated embryos may be attributed to apoptotic phenomena induced by t‐PA. In conclusion, it appears that excessive t‐PA content in the IVF media, suppresses blastocyst formation rate, possibly due to induction of apoptotic phenomena. 相似文献
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为确定中国杨属型蜂胶的抗炎功效成分,用100ng/ml脂多糖(LPS)和40μg/ml氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)分别诱导脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤。通过SRB法分别检测蜂胶水提物中分离的11种组分和蜂胶乙酸乙酯提取物中分离的8段组分对2种炎症细胞模型细胞存活率的影响。结果表明:蜂胶水提物中的11种组分不同程度的促进2种炎症细胞的细胞存活率,乙酸乙酯提取物中的8段组分也是不同程度的提高2种炎症细胞的细胞存活率。由此可知,蜂胶的抗炎功效成分十分复杂,很可能是多种成分协同功效的结果,而且酚酸类物质发挥了一定的作用。 相似文献