Identification of a new self-incompatibility allele (S31) in a Hungarian almond cultivar and its reliable detection

Self-incompatibility of almond [Prunus dulcis (Mill.) D.A. Webb] is controlled by the S-locus with 30 described allelic variants. In this study, PCR amplification, cloning and DNA sequence analysis revealed a new S-RNase allele in a Hungarian cultivar, ‘Tétényi bőtermő’. This new allele was labelled as S₃₁. Since S₃₁ is characterized by almost identical intron sizes as S₉, consensus PCR was not successful in discrimination of the alleles, even if fluorescently labelled fragments were sized on an automated sequencer. Therefore, an allele-specific forward primer (PdS31-F) was designed to anneal selectively within the second intron of the S₃₁-RNase gene and used in combination with the EM-PC3consRD consensus primer. This allowed for the successful discrimination of S₃₁ from S₉. The PdS31-F primer and allele-specific PCR in general might be useful in the identification of different alleles with matching intron sizes that might occur during screening for S-alleles in a more diverse population, e.g. local cultivars from Central Europe to Asia.     

李离体茎尖的超低温保存

 以简单玻璃化法为基本方法,研究了影响李离体茎尖超低温保存的因子—继代培养时间、低温驯化时间、PVS3处理时间以及化冻后茎尖存活检测;建立了较为简单的李离体茎尖超低温保存技术程序：即选择继代培养120 d的试管材料,经过5 ℃低温驯化21 d,0.7 mol·L^-1蔗糖预培养1 d,PVS3处理100 min,浸入液氮。化冻后茎尖存活率可达60 %以上。     

三种花灌木的萌生能力及其修剪要点

以丁香(Syzygium aromaticum)、连翘(Forsythia suspense)和榆叶梅(Prunus triloba)为材料,研究了3种花灌木的萌生能力.结果表明:3种花灌木均具有很强的萌生能力,丁香和连翘的萌条数较少,但其萌条短而粗壮其积累较多的干物质;榆叶梅的萌条细长柔弱,干物质积累量较少.讨论了园林植物的萌生能力及其与整形修剪的关系,并就3种花灌木的整形修剪提出了一些建议.     

槜李等15个李品种S基因型鉴定及其多态性分析

利用李属S-RNase基因特异性引物,对15个供试李品种进行PCR扩增,共获得30个目的条带。对这些目的条带进行测序鉴定出15个李品种的S基因型。通过与NCBI中利用BLASTn与GenBank+EMBL+DDBJ+PDB等数据库中的序列比对,结果表明,其中9个为新S-RNases基因,对9个新S-RNases核苷酸序列进行分析发现,位于高变区内的内含子大小为141～1758bp,其同源性为33.9%(S-18～S-19)～81.6%(S-20～S-21),表现出丰富的长度和序列多态性;编码区的核苷酸序列比对结果,其同源性为73.3%(S-16～S-19)～91.7%(S-17～S-22);其推导氨基酸序列相似性为67.3%(S-16～S-19)～89.1%(S-17～S-22);包含李属S-RNase一级结构所共有的C2、C3保守区和高变区(RHV)。系统进化分析表明,9个新S-RNases与李属其它树种S-RNases聚类在一起,归属为李亚科(Prunoideae)。     

桃分子连锁图的构建与分析

 以‘大久保’与‘兴津油桃’杂交的F2代109 株群体为试材, 采用AFLP、RAPD、SSR 分子标记进行遗传分析。筛选扩增稳定、多态性丰富的36 对AFL P 引物、3 对SSR 引物、2 对RAPD 引物进行群体分离分析, 获得分离标记136 个, 卡方检验27 个标记偏离孟德尔分离比例。应用Mapmaker 分析软件将符合孟德尔遗传分离比例的标记构建了包含11 个连锁群的连锁图谱, 每个连锁群包含3～21 个标记, 平均为8.73 个标记。该图谱覆盖基因组1061.8 cM , 11 个连锁群的平均长度为96.5 cM , 标记间平均图距为11.0 cM , 与果实毛/ 油桃( G/ g) 、白/ 黄肉( Y/ y) 连锁的RAPD 标记、非酸/ 酸(D/ d) 性状连锁的AFLP标记分别定位在第3 、7 、9 连锁群上。     

桃果实和叶片中糖分的季节变化及其与碳代谢酶活性的关系研究

以晚熟的艳丰一号桃为试材,研究了果实和叶片中可溶性糖、淀粉及相关酶活性的变化。结果表明,在果实生长发育早期,果实和叶片中的可溶性糖主要是还原糖,中后期,还原糖维持在相对较低的水平上,非还原糖大量积累;在整个果实生长发育期间,果实中蔗糖、葡萄糖、果糖含量显著地高于叶片,而叶片中山梨醇和淀粉含量则显著地高于果实;叶片中蔗糖、葡萄糖、果糖含量和果实中山梨醇含量较稳定,在整个生长季节中差异较小;在整个生长发育期间蔗糖在果实中持续积累,尤其是在成熟前急剧增加,果实内葡萄糖和果糖含量在生长发育前期总体呈下降趋势,中后期维持在一个相对较低的水平上;叶片中山梨醇含量在生长前期下降,之后维持在相对稳定状态。在整个果实生长发育期间果实中果糖含量与NI、SS和SDH活性及葡萄糖含量与SS和SDH活性呈显著正相关;叶片中葡萄糖含量与SDH活性呈显著正相关且果糖含量与SS和ADPGPPase活性呈显著负相关,此外叶片中蔗糖含量与SPS活性呈显著正相关,但果实中蔗糖含量与SPS不存在任何相关性。因此认为各主要糖的合成与转化在叶片和果实中可能存在着不同的酶调控机制。     

桃三种肉色类型果实抗氧化因子的比较评价

【目的】具有较高抗氧化活性的健康有益食品正逐渐被开发利用,从抗氧化组份和抗氧化活性的角度比较评价桃不同肉色类型,为桃种质资源的深入挖掘利用提供理论依据。【方法】研究以75份桃资源为试材,测定并比较分析果皮、果肉和全果的总酚、花色苷、三价铁还原能力（FRAP）、相对抗自由基能力（RAC）以及色泽参数。【结果】红肉桃总酚、花色苷、FRAP和RAC的分布区间均宽于白肉和黄肉桃,但分布区间存在明显重叠;4个指标的最高值均出现在红肉桃资源中。红肉桃抗氧化组份含量极显著地高于白肉和黄肉桃,在全果水平,红肉桃总酚含量为后两者的4.1倍和4.6倍,花色苷含量分别为后两者的20.1倍和11.6倍;红肉桃抗氧化能力亦高于白肉和黄肉类型,FRAP分别是后两者的5.8倍和6.2倍,RAC分别是后两者的3.8倍和4.6倍。桃果实抗氧化能力与总酚和花色苷含量均呈极显著的正相关,但抗氧化能力与总酚的相关系数高于其与花色苷;回归分析也表明桃抗氧化能力与总酚的线性回归关系优于其与花色苷。【结论】红肉桃果实抗氧化组份和抗氧化能力显著高于白肉和黄肉桃,从抗氧化的角度红肉桃资源有开发利用的价值;桃果实总酚对抗氧化能力的贡献高于花色苷;筛选出‘北京一线红’、‘红桃’等抗氧化能力高的红肉桃种质资源。     

早食李幼胚离体培养的研究（摘要）

[目的]探讨早食李幼胚离体培养的影响因素。[方法]以不同发育时期的早食李胚为试材,研究了不同胚龄、不同培养基、GA3浓度对离体胚培养的影响。[结果]花后26～41d的幼胚细小、胚乳尚存,经连续3代培养仍未发生任何变化;从花后48d开始胚乳已经消失,幼胚不断发育并逐渐充满整个种腔,接种在MS基本培养基上后其成活率高达77%以上,培养初代即可启动;4.5%的花后65d幼胚已能培养成苗,此后成苗率随着胚龄增加而升高,至果实成熟时成苗率可达26.00%,并在培养初代可产生愈伤组织;花后65～83d的幼胚则需经2～3代以上才能诱导出愈伤组织。胚（花后88d）在WPM培养基的成苗率比MS培养基上高1倍左右;在同一基本培养基上,添加BA、KT或2,4-D后,成苗过程受到抑制。用1000mg/LGA3处理种子24h后能显著提高胚的成苗率。[结论]为建立早食李胚胎抢救技术及杂交育种奠定实验基础。     

紫叶稠李嫩枝扦插繁殖研究

紫叶稠李是近几年引入的彩叶园林树种,具有很高的观赏价值,是北方地区园林绿化优良树种之一。现采用3种不同激素对紫叶稠李插穗进行处理。结果表明:50 mg/L GGR溶液浸泡10 min时生根率最高,达到85%,该技术可以在扦插繁殖中广泛采用。     

美洲大蠊蛋白质的提取工艺优化及其对伤口愈合的影响

[目的]优化美洲大蠊蛋白质的提取方法,并研究美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合的影响。[方法]采用碱提法、盐提法和酶提法对美洲大蠊蛋白质进行分离和提取,测定不同方法提取美洲大蠊蛋白质的含量,优化美洲大蠊蛋白质的提取工艺;并用提取的美洲大蠊蛋白质进行小鼠伤口愈合试验,研究美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合的影响。[结果]在碱浓度为1.5%、提取温度为80℃、提取时间为1.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高;在盐浓度为1.0%、提取温度为40℃、提取时间为2.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高;在酶占样本比为0.6%、酶解温度为45℃、酶解时间为2.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高。小鼠伤口愈合试验表明,美洲大蠊提取的蛋白质可以促进伤口愈合,且愈合时间比正常情况下缩短近一半。[结论]碱液浓度、盐浓度和酶浓度对美洲大蠊蛋白质提取的影响最大。3种方法提取美洲大蠊蛋白质的效果从大到小依次为酶提法、碱提法、盐提法,即美洲大蠊蛋白质提取的最优方法为胰蛋白酶提取法。美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合有促进作用。