草酸青霉菌HB1溶磷能力及作用机制

一些功能微生物具有溶磷能力且同一菌株对不同难溶性磷酸盐的溶解能力存在差异。该研究以草酸青霉菌HB1为研究对象,通过固体平板培养试验、摇瓶培养试验和土壤培养试验系统研究了不同磷源(磷酸钙、磷矿粉、磷酸铁、磷酸铝)与氮源(铵态氮、硝态氮)供应下HB1溶磷能力及其作用机制,并验证了其在高、低不同磷水平土壤中的溶磷能力。结果表明,接种HB1的不同磷源培养基上均有溶磷圈出现,根据溶磷圈直径/菌落直径初步确定HB1溶解磷酸钙的能力较强;摇瓶培养试验表明供试磷源为磷酸钙、磷酸铁时HB1发酵液中有效磷含量为884、265 mg/L(铵态氮),或945、206 mg/L(硝态氮),其溶磷能力不受氮源形态影响;磷矿粉为磷源时,HB1发酵液中有效磷含量可达199 mg/L(供应铵态氮),为硝态氮供应的7.14倍;而磷酸铝为磷源时,HB1发酵液中有效磷含量为120 mg/L(供应硝态氮),为铵态氮供应的3.29倍;此外,供应铵态氮条件下,HB1对难溶性磷酸盐的溶解能力与介质中pH值呈显著的负相关关系。HB1接种于不同磷水平的土壤中培养21 d,在低磷和高磷土壤中HB1均能有效定殖且增加了土壤有效磷含量,比不接菌对照分别增加45.00%和14.17%。综上,草酸青霉菌HB1对磷酸钙和磷矿粉的溶磷效果较好,并通过分泌氢质子酸解含磷矿物实现溶磷作用,且HB1在低磷土壤中溶磷能力较强。     

一株甲磺隆降解真菌(Penicillium sp.)的降解特性研究

Penicillium sp.的纯培养试验结果表明:Penicillium sp.的最适降解条件为甲磺隆浓度22.6mg/L,菌体浓度12.25 mg/L溶液,温度30°C,pH 7.0.在有机肥浸出液为共基质时,甲磺隆降解速率可以提高约15%,但葡萄糖影响不显著.当Penicillium sp.加入到华家池潮土中时,可明显促进土壤甲磺隆的降解,且有较好的持续性,从而使甲磺隆在土壤中的半衰期由对照的27.7 d缩短到16.5～18.8 d.     

草莓根腐病拮抗真菌筛选鉴定及其防病促生作用

【目的】探索利用植物病、健株根域土壤微生物区系比较法快速筛选高效、广谱且有实际防病促生作用生防真菌的可行性。【方法】根据菌落培养与扫描电镜形态特征及rDNA-ITS序列对拮抗真菌进行鉴定;生长速率法测定菌株无菌发酵滤液的拮抗活性,盖玻片对峙培养法观察拮抗真菌对草莓根腐病原菌菌丝形态的影响;室内发芽试验法测定真菌无菌发酵滤液促种子萌发活性;采用盆栽试验研究拮抗真菌对草莓根腐病的防病促生作用;土壤稀释平皿分离法测定拮抗真菌的定殖能力及对草莓根域微生物区系的影响。【结果】经鉴定,2株拮抗真菌HF3和HF7分别为灰黄青霉（Penicillium griseofulvum）和土曲霉（Aspergillus terreus）,其无菌发酵滤液对7种供试病原真菌有较强的拮抗作用,培养96 h时,HF3对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）和大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）菌丝生长抑菌率均为100.0%。HF3菌丝对大双孢柱孢（Cylindrocarpon macrodidyma CF9）菌丝具有溶解作用,使病菌菌丝出现扭曲、变细、断裂及原生质浓缩等畸变现象;HF3和HF7 103和104倍稀释无菌发酵滤液可促进甜瓜种子萌发及胚根、胚芽生长。HF7 104倍稀释液对西瓜种子萌发及胚芽、胚根生长具有促进作用;HF3和HF7对盆栽草莓根腐病的防效分别达53.0%和46.9%,同时可促进盆栽草莓植株生长,提高果实产量;菌株HF3和HF7在草莓根表定殖数量分别为2.23×105、1.02×105 CFU•g-1干土,同时减少了大双孢柱孢数量;接种HF3和HF7可有效调整草莓根域微生物区系,促进土壤微生态恢复平衡。【结论】通过植物病、健株根区土壤微生物区系比较可以快速筛选到高效广谱且有实际防病促生作用的生防真菌;HF3和HF7对草莓根腐病防治具有较高的潜在应用价值。     

促进草酸青霉降解秸秆的表面活性剂效果研究

为了提高秸秆降解效率,本文探究了不同种类表面活性剂对秸秆降解菌降解秸秆的作用,并筛选出效果最佳的表面活性剂。首先筛选获得一株降解玉米秸秆能力较强的菌株——草酸青霉Z7-6;其次在液体发酵条件下,考察4种表面活性剂（两个浓度）对草酸青霉Z7-6降解玉米秸秆效果及产纤维素类酶的影响;最终通过固体发酵验证表面活性剂的效果。结...     

斜卧青霉菌P6木素过氧化物酶的纯化与特性

木素过氧化物酶是降解木素类物质的主要酶类。使用硫酸铵盐析、DEAE 纤维素和CM 纤维素离子交换层析、SephadexG 10 0凝胶过滤等分离与纯化技术 ,从斜卧青霉菌P6 (PenicilliumdocumbensP6 )发酵培养 7d的液体培养液中分离纯化得到电泳纯的木素过氧化物酶 ,经SDS PAGE鉴定为单一条带 ,表观相对分子质量为 4 6 3× 10 3 。以藜芦醇为底物测定了该酶的Km,vmax,作用的 pH和温度范围 ,结果为Km0 5 6 5mmol·L-1,vmax0 0 88mmol·(L·min) -1,pH 4～ 9,温度 2 5～ 5 5℃。N末端序列为VLLPADEKNA ,与真菌LiP无同源性。此结果拓宽了木素过氧化物酶的微生物来源     

产菊粉酶菌株的筛选及其产酶条件的优化

从山东滨海盐碱地种植菊芋的根际土壤中分离得到能产菊粉酶的菌株46株,经过进一步的摇瓶复筛,获得了产菊粉酶能力较高的1株菌株,经初步鉴定为青霉Penicillium sp.B01.在对其发酵条件优化后,确立了Penicillium sp.B01最适宜的产酶条件为(g·L-1):菊芋提取液(EJA)120、酵母膏(YE)25、NH4H2PO4 2.5、NaCl 5.0、FeSO4·7H2O 0.1、ZnSO4·7H2O 0.1,初始pH 7,接种2.5×106 mL-1的孢子悬浮液3.75%, 250 mL的三角瓶中装40 mL的发酵培养基,在30 ℃、170 r·min-1下发酵3 d后菊粉酶活性最高可达25.78 U·mL-1.此酶主要为外切酶.     

一株疫病拮抗青霉P.st10菌株的抗菌活性及其对辣椒疫病的盆栽防效

筛选得到一株疫霉菌的拮抗青霉Penicillium striatisporumP.st10。该菌株强烈抑制疫霉菌及核盘菌的菌丝生长。无菌滤液抑制辣椒疫霉孢子囊的形成及孢子囊、游动孢子的萌发,且能杀死菌丝细胞。该菌株在辣椒根际有很强的定殖能力,有机肥对其定殖有增强作用,接种后40d在根际的青霉菌数量,青霉处理为0.76×104cfu/g,而青霉菌肥处理为2.55×104cfu/g。盆栽试验显示:处理7d后,土壤只接种辣椒疫霉对照发病率为93%;同时接种青霉培养滤液和辣椒疫霉处理为16%;接种青霉培养滤液、新鲜菌丝和辣椒疫霉处理为15%。     

21种药用植物提取物对柑橘青霉病抑菌作用的筛选及白薇醇提物对脐橙青霉病的防治效果

为开发研制新型植物源柑橘保鲜剂,以抑菌圈直径为指标,利用牛津杯法筛选出对柑橘采后意大利青霉有良好抑制作用的21种中草药的醇提物,并对白薇醇提物防治脐橙青霉病的效果进行了评价。结果表明:白薇、零陵香、鸦胆子、藏青果、白药子5种中草药乙醇提取物对意大利青霉均有较好的抑制效果,抑制圈直径达26 mm以上,其中白薇醇提物抑菌活性最佳,抑制圈直径可达38.39 mm,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为3.13 mg/m L和6.25 mg/m L,且抑菌效果与对照药剂1 000倍咪鲜胺无显著差异。25 mg/m L白薇醇提物处理脐橙7 d后,对脐橙青霉病的防治效果达35.93%,与1 000倍咪鲜胺的防治效果相当(36.37%);白薇醇提物处理后可抑制意大利青霉菌菌丝生长,导致菌丝肿胀、膨大、畸形、细胞膜透性增加、细胞内含物外渗;还可诱导脐橙体内过氧化物酶活性下降,而苯丙氨酸解氨酶和几丁质酶活性上升。表明白薇醇提物对脐橙采后青霉病具有较好的防治效果,可进一步开发为植物源柑橘保鲜剂。     

Untargeted Metabolomics Approach for the Discovery of Environment-Related Pyran-2-Ones Chemodiversity in a Marine-Sourced Penicillium restrictum

Very little is known about chemical interactions between fungi and their mollusc host within marine environments. Here, we investigated the metabolome of a Penicillium restrictum MMS417 strain isolated from the blue mussel Mytilus edulis collected on the Loire estuary, France. Following the OSMAC approach with the use of 14 culture media, the effect of salinity and of a mussel-derived medium on the metabolic expression were analysed using HPLC-UV/DAD-HRMS/MS. An untargeted metabolomics study was performed using principal component analysis (PCA), orthogonal projection to latent structure discriminant analysis (O-PLSDA) and molecular networking (MN). It highlighted some compounds belonging to sterols, macrolides and pyran-2-ones, which were specifically induced in marine conditions. In particular, a high chemical diversity of pyran-2-ones was found to be related to the presence of mussel extract in the culture medium. Mass spectrometry (MS)- and UV-guided purification resulted in the isolation of five new natural fungal pyran-2-one derivatives—5,6-dihydro-6S-hydroxymethyl-4-methoxy-2H-pyran-2-one (1), (6S, 1’R, 2’S)-LL-P880β (3), 5,6-dihydro-4-methoxy-6S-(1’S, 2’S-dihydroxy pent-3’(E)-enyl)-2H-pyran-2-one (4), 4-methoxy-6-(1’R, 2’S-dihydroxy pent-3’(E)-enyl)-2H-pyran-2-one (6) and 4-methoxy-2H-pyran-2-one (7)—together with the known (6S, 1’S, 2’S)-LL-P880β (2), (1’R, 2’S)-LL-P880γ (5), 5,6-dihydro-4-methoxy-2H-pyran-2-one (8), (6S, 1’S, 2’R)-LL-P880β (9), (6S, 1’S)-pestalotin (10), 1’R-dehydropestalotin (11) and 6-pentyl-4-methoxy-2H-pyran-2-one (12) from the mussel-derived culture medium extract. The structures of 1-12 were determined by 1D- and 2D-MMR experiments as well as high-resolution tandem MS, ECD and DP4 calculations. Some of these compounds were evaluated for their cytotoxic, antibacterial, antileishmanial and in-silico PTP1B inhibitory activities. These results illustrate the utility in using host-derived media for the discovery of new natural products.     

胡椒调味油加工工艺条件的研究

以胡椒粉和大豆色拉油为主要原料制备风味独特的食用调味油,采用正交试验分析胡椒原料粒度、浸提温度以及质量比对胡椒调味油产品品质的影响,确定最佳工艺条件:以40目胡椒粉为原料,浸提温度为130℃,质量比(胡椒:大豆色拉油)为1:6(g/g).