韩国栗疫病抗病品种的遗传变异分析

为了分析韩国栗疫病的抗病品种和感病品种的遗传变异和抗病性的筛选,利用抗病性的快速检测法和RAPD(random amplified polymorphic DNA)方法对13个栗树品种进行了抗病性检测和RAPD标记分析。抗病性的快速检测选出了5个抗病品种、5个感病品种和3个中度抗病(或中度感病)品种,并且这一结果与该品种的田间表现相一致。利用筛选的12个随机引物,扩增了100个多态性RAPD片段,但未发现与抗病性或感病性相关的特异RAPD片段。聚类分析结果表明,12个品种大致分为抗病、感病和中度抗病(或中度感病)等3个大组,并与抗病性的快速检测结果基本一致。抗病品种“MANSEKI”表现出了相对于12个品种较远的亲缘关系。     

板栗自然居群疫病发生研究

通过田间实地调查,进一步确认我国栗疫病的发病率由北向南逐渐减轻,栗疫病的各级发病症状在各被调查地均有不同程度的发生.结合调查进行取样,采用超薄平板聚丙烯酰胺等电聚焦技术对发病群体与无病群体进行遗传多样性分析,发现除等位基因平均数(A)二群体相等外,无病群体的多态位点比率(P)、平均观察杂合度(Ho )、平均期望基因杂合度(He)均高于有病群体,固定指数(F)前者大于后者且均为负值(分别为:-0.216和-0.241).     

掌叶半夏疫病病原菌的分离与鉴定

为明确引起掌叶半夏疫病的病原菌,本研究对河北省安国地区掌叶半夏疫病株进行了病原菌的分离纯化、致病性测定以及病原菌的形态学观察和rDNA-ITS序列鉴定。从发病植株上分离得到了疫霉菌、镰刀菌、链格孢菌等几种候选病原菌,健康植株在接种疫霉菌菌株后,出现了与田间病株相似的症状。该疫霉菌株最高生长温度为36℃,异宗配合,孢子囊有明显的一个乳突,脱落孢囊柄平均长度约为2.9μm,其rDNA-ITS序列比对结果与寄生疫霉(Phytophthora parasitica)同源性为99%。结合以上结果,最终确定引起掌叶半夏疫病的病原菌为Ph.parasitica。     

苏皖地区栗疫病菌营养体亲和性研究

对江苏、安徽两省9个县市的栗疫病病原菌菌株进行了营养体亲和性(VC)研究,结果表明,不素和类型可分为3种:Ⅰ型为强不亲和,抗衡区两侧形成明显分生孢子器带;Ⅱ型为弱不亲和,抗衡区内不形成分生孢子器;Ⅲ型为中等不亲和,只在抗衡区的某一侧形成分生孢子器带。可将219个菌株划分为131个营养体亲和组(VCG_s),从而推算出至少有8个VC基因控制菌株的营养体亲和性。根据两省、田间小区以及大病斑上菌株的VCG_s分析,我国板栗疫病菌的VCG_s比其他国家的复杂。本文还探讨了复杂的原因及利用低毒力菌株进行生物防治的可能性。     

影响黑胫病菌侵染试管烟苗的几个因素分析

 黑胫病或赤星病菌接种到试管烟苗基部进行培养,定期观察病情,结果表明:(1)高抗黑胫病而高感赤星病品种G140的幼嫩试管苗能被黑胫病菌侵染,接种病原菌30天病指100;但赤星病却与烟苗共生,病指为0。(2)接种黑胫病菌后,高感品种小黄金1025较G140凋萎死亡迅速,二者差7~10天;同一品种内单倍体较二倍体凋萎死亡迅速。(3)试管烟苗继代后7天内,极易遭黑胫病菌侵染,抗感品种间无差异;继代后10天,抗感品种间差异显著;继代后时间继续延长,烟苗抗病性有增加趋势。(4)28℃左右黑胫病菌侵染能力强而稳定,15℃能够侵染,8℃以下失去侵染能力。     

不同抗性板栗品种的防御酶系对栗疫菌Cp-毒素的响应

对照.此外,抗病品种酶活性高于中抗品种和感病品种;防御酶的活性与品种抗病性之间呈正相关,毒素作用后防御酶活性的变化可作为衡量板栗抗病性强弱的指标.     

木霉菌和毛壳菌对板栗疫病的抗生作用

哈茨木霉Trichoderma harzianumT88菌株、深绿木霉T.atrovorideT95菌株和螺旋毛壳Chaetomium spiraleND35菌株与板栗疫病菌Cryphonectria parasiticaLY菌株的平板对峙培养结果表明,木霉菌对营养和空间有强烈的竞争作用,表现在可使病原菌菌丝消解,对病菌菌丝的生长有明显的抑制作用;毛壳菌生长速度较慢,但可形成抑菌带,使病菌不扩展。室内水培枝条接种试验结果表明,接种拮抗菌的拮抗效果好,而且先接种拮抗菌后接种病原菌的处理比拮抗菌和病原菌同时接种的处理效果还好,毛壳菌没有木霉菌的作用明显。接种枝条的木霉菌、毛壳菌和病原菌的再分离结果表明,T95和ND35的定殖能力强。     

细菌嗜铁素、DAPG和PCA对板栗疫病菌的抑制作用

为了探讨生防细菌防治板栗疫病的潜力,测定了恶臭假单胞杆菌(Pseudomonas putida)WCS358r菌株及其嗜铁素缺失突变体JM218,转基因菌株WCS358::phl和WCS358::phz对板栗疫病菌生长和分生孢子萌发的抑制作用。在KB和板栗枝条韧皮部抽提液培养基(BA)中,WCS358r对病菌生长和分生孢子萌发具有较强的抑制作用,而JM218几乎没有抑制效果;在培养基中加入200μmol/L FeCl3后,WCS358r对病菌的抑制能力显著降低,证明WCS358r产生的嗜铁素是抑制菌丝生长和分生孢子萌发的重要因子。在PDA培养基中,WCS358r对病菌无抑制效果。在上述三种培养基中,产生抗生素2,4-二乙酰间苯三酚(DAPG)的转基因菌株WCS358::phl与原始菌株WCS358r相比,抑菌效果明显增强,而产生酚嗪-1-羧酸(PCA)的WCS358::phz的抑菌能力无明显提高。培养基中添加铁对WCS358::phl的抑菌活性无影响,但能降低WCS358::phz对板栗疫病菌的抑制效果。由此说明,嗜铁素和DAPG对抑制板栗疫病菌生长和孢子萌发具有重要作用,而PCA的抑菌效果不明显。     

不同杀菌剂对烟草疫霉菌的室内毒力测定

用生长速率法测定8种杀菌剂对烟草疫霉菌的毒力作用。试验结果表明,50%烯酰吗啉可湿性粉剂和25%甲霜.霜霉威可湿性粉剂对烟草疫霉菌菌丝的抑制效果较好,两者的EC50分别为0.0055㎎/L和0.2831㎎/L。