濒危南药白木香愈伤组织总RNA提取方法研究

分别采用SDS-酸酚法、CTAB法、异硫氰酸胍法提取白木香愈伤组织总RNA,通过比较发现,异硫氰酸胍法提取白木香愈伤组织总RNA的效果比其他两种方法更好。利用异硫氰酸胍法提取的白木香愈伤组织总RNA具有较好的完整性,OD260/OD280介于1.8～2.0之间。成功建立了白木香愈伤组织总RNA快速提取方法,可为其他药用植物总RNA提取提供借鉴。     

茶树休眠芽与萌动芽抑制消减杂交文库的构建与初步分析

为了解茶树越冬芽休眠及其解除的分子机理,以休眠芽和萌动芽为材料,构建了茶树休眠芽与萌发芽的正、反向抑制消减杂交文库,并从两个文库各随机挑选96个阳性克隆进行序列测定和生物信息学分析。建库质量分析结果表明,所构建的正、反向消减文库有效富集了差异基因,消减效率达到要求,插入片段集中于250~750 bp之间,文库质量较好。对正、反向文库随机挑选的阳性克隆测序和分析结果表明,正、反向文库在基因表达谱上存在一定的差异,萌动芽文库在亚细胞器形成、转运载体等方面的基因与休眠芽文库有较大差异,而休眠芽文库在抗氧化、翻译调控以及胁迫响应等方面的基因与萌动芽文库有较大差异。这两个文库的建立为进一步了解茶树芽休眠与解除的分子机制奠定了基础。     

茶树遗传图谱研究进展

茶树世代周期长,自交不亲和,遗传组成高度异质杂合,利用常规育种方法培育新品种费时耗力。高质量的茶树遗传图谱,可以用于茶树基因组结构及遗传演化分析、数量性状位点定位、基因克隆,为分子标记辅助育种奠定良好的基础,对于加快茶树育种进程具有重要意义。本文对遗传图谱的构建原理、步骤及目前国内外茶树遗传图谱的研究进展进行简要概述,探讨了目前该领域研究中存在的主要问题,并由此提出加速茶树遗传图谱研究进程的设想。     

环境因子对冬虫夏草子实体生长发育的影响

研究冬虫夏草子实体的生长发育和形成规律,为冬虫夏草人工培殖及资源保护提供理论依据。将老熟待僵化的幼虫,在不同温度、基质含水量和光照条件下培殖,观察子实体形成与伸展情况。研究表明,子实体分化与形成需要0℃左右低温刺激,变温有利于子实体的形成;子实体的生长还需要有充足的水分及高湿环境,在子实体生长期间,应保持基质含水量为60%~80%,相对湿度95%~100%为宜;微弱的光照都能诱导子实体产生,子实体有向光性生长的特性。环境因子对冬虫夏草子实体形成及伸展具有重要作用。     

溆浦甜橙高效离体再生研究

本研究以溆浦甜橙实生苗为试材,对影响其离体再生的各种因素进行了研究,建立了一个高效离体再生系统。结果表明,30d龄溆浦甜橙实生苗上胚轴水平置于MT＋3mg·L^-16-BA分化培养基中,不定芽的诱导率可高达83-3％,该不定芽在MT＋0．5mg·L^-1,6-BA＋1．5g·L^-1,麦芽提取物的增殖培养基上生长良好,增殖率可达96．7％,增殖系数为3.79。生根培养基以1／2MT＋0．5mg·L^-1IBA比较适宜。这一系统再生频率高,操作简便,适合于溆浦甜橙的遗传转化。     

SCoT标记技术鉴定湖南甜橙变异类型

[目的]根据SCoT多态性对湖南甜橙变异类型进行鉴定和分析。[方法]首先对SCoT反应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异。[结果]甜橙SCoT标记的20μl优化反应体系为：DNA模板80ng,Mg2＋1.6mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,引物0.2μmol/L,TaqDNA聚合酶用量1.6U,扩增产物在100～2000bp,扩增条带明亮清晰,反应体系具有良好的稳定性和可重复性。24份试材的测序片段的大小为1090-1091bp,一致性达到99.84%,存在单碱基缺失与替换;利用单碱基变异可以区分其中的12个甜橙变异株系和‘安江香柚’。[结论]本研究将为甜橙的育种工作提供科学的理论依据。     

茶树cDNA-AFLP银染技术体系的建立

为了挖掘安白茶白化期相关的差异基因,建立并优化了茶树叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析。在安吉白茶叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20 μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯度优化的研究,包括引物、Mg2+、dNTP及Taq DNA聚合酶的用量。PCR预扩增20 μL反应体系中,引物75 ng/20 μL,Mg2+ 2.0 mM,dNTP 0.2 mM,Taq DNA聚合酶1 U时预扩增效果较好;PCR选择性扩增20 μL反应体系中,引物75 ng/20 μL,Mg2+ 2.5 mM,dNTP 0.2 mM,Taq DNA聚合酶1.5 U时选择性扩增效果较好。通过试验,获得较为理想的预扩增和选择性扩增体系。     

水产加工废物生产多肽有机肥对豇豆生长和土壤物理性质的影响

为合理利用多肽有机肥,采用田间试验方法研究了多肽有机肥对豇豆产量品质和土壤物理性质的影响。结果表明：在南海和增城2个试验点,多肽肥的施用均增加了豇豆的产量,降低了硝酸盐含量,提高了维生素C含量,而在白云区试验点,施用多肽肥对豇豆的生长作用并不明显;在3个试验点,多肽肥的施用对土壤比重的作用并不大;在白云区试验点,多肽肥与无机肥配合降低了土壤容重,土壤总孔隙度提高,但是在南海里水试验点,多肽肥与无机肥配合降低了土壤容重,但是土壤孔隙度并未提高,在增城试验点,多肽肥与无机肥配合并未降低土壤容重,总孔隙度并未增加。在3个试验点,施多肽肥均提高了土壤持水量。总之,多肽肥对土壤物理性质的提高效果优于鸡粪有机肥,且在砂质土壤上的效果优于粘土。     

咖啡因生物合成研究进展及在茶树育种中的应用

咖啡因是一种嘌呤生物碱,存在于茶和咖啡中。由于咖啡因对一些人有引起失眠等的副作用,所以培育低咖啡因咖啡和茶树品种具有非常重要的意义。本综述了近年咖啡因生物合成与代谢的研究进展,包括相关酶的基因克隆等,并对培育脱咖啡因茶树可能的途径和存在问题进行了讨论。     

Soil physicochemical properties in a high-quality tea production area of Thai Nguyen province in northern region,Vietnam

This study investigated general physicochemical properties of tea garden soils at the alluvial plain of Cong River in Tan Cuong commune, Vietnam. Four gardens were selected as study sites on three transect lines established perpendicularly to the river. Soil samples were collected from the surface (0–10 cm) and subsurface (20–30 cm). Soil texture classes varied from sandy loam to light clay, which was affected by different terrains along the transect lines as well as severe disturbance such as terracing and earth excavation. The levels of total C and total N were correlated with increasing garden age, suggesting the replenishment of soil organic matter pool by the addition of plant residue and manure. Meanwhile, the soils showed strongly acidic nature with the average pH(H₂O) of 3.7 at the surface and 3.9 at the subsurface. The effective cation exchange capacity (ECEC) was low at 4.7 and 4.9 cmol_c kg^?1, respectively, and dominated by exchangeable Al³⁺. Soil acidification was exacerbated with increasing garden age. However, a relatively large saturation of exchangeable calcium (Ca²⁺), potassium (K⁺), and magnesium (Mg²⁺) on the ECEC was found in the surface soils. The levels of available P were high, occasionally exceeding 1000 and 500 mg kg^?1 at the surface and subsurface, respectively. In spite of strongly acidic condition, ammonium (NH₄-N) applied as fertilizer was converted to nitrate (NO₃-N) to move down to deeper layers. The levels of the bases, P, and mineral N seem to be principally determined by management practices. Significant portion of these nutrients was likely to exist in water soluble forms without adsorption onto soils. It should be required to develop proper schemes and to educate the owners for adequate fertilizer managements.