花[鱼骨]外周血细胞显微结构

[目的]描述花[鱼骨]各类血细胞,为鱼类血液学、比较细胞学积累基础资料,并为花鲭人工养殖、疾病诊断等工作提供参考。[方法]对28尾花[鱼骨]尾静脉取血,常规方法每尾制作血涂片2～5张,Gimesa和wrjght染液联合染色,Nikon—DXM1200数码显微摄影系统观察和拍照,ImageProplus软件随机测量各类血细胞。[结果]试验得出,红细胞有直接分裂现象,成红细胞有两种类型,Ⅰ型和网织红细胞关系密切;嗜中性粒细胞一般呈球形,核形多变,单个核居多,偶见二分叶核,偶见衰老解体者;嗜酸性粒细胞一般呈球形,胞核与嗜中性粒细胞胞核情况极为相似;单核细胞具伪足样突起,核较大,约占整个细胞1／2左右,较大者可达3／4;淋巴细胞呈不规则圆形,非定量地分为“大”“小”两类：血栓细胞形态多样,个别类型难以归类,有直接分裂现象;未发现嗜碱性粒细胞。[结论]花[鱼骨]外周血中有6种血细胞,无嗜碱性粒细胞。     

溶血相关基因缺失降低鳗弧菌感染花鲈的致病性

为阐明毒力因子溶血素对鳗弧菌感染花鲈过程中发挥的作用,实验以花鲈为研究模型,采用临床剖检、组织病理学观察、分子生物学检测、转录组分析等检测方法开展实验。通过对花鲈幼鱼分别注射5.0×105 CFU鳗弧菌野生株和缺失株△vah1-vah4-rtxA,评估了溶血相关基因缺失对花鲈的感染能力、花鲈各组织的病理变化情况以及免疫响应的影响。结果显示,花鲈感染野生株后的LD50为2.103×105 CFU/mL,感染缺失株△vah1-vah4-rtxA后LD50为1.837×106 CFU/mL,溶血相关基因缺失使鳗弧菌毒性降低8.74倍;鳗弧菌主要定殖在花鲈的肠道和鳃中,溶血相关基因缺失降低鳗弧菌在花鲈体内的定殖能力,同时降低对肠道黏膜空泡化、鳃坏死的损伤程度;转录组分析表明vah1、vah4、rtxA缺失后,头肾组织的差异表达基因显著富集到造血细胞谱系、抗原处理和呈递、细胞粘附分子、肠道免疫网络的IgA生产等免疫通路。这些结果表明,溶血相关基因缺失降低了鳗弧菌感染花鲈的致病能力。研究结果有助于进一步了解鳗弧菌的致病机制,并为开发花鲈抗弧菌免疫增强剂或减毒疫苗提供依据。     

花鲈瘦素基因的克隆及低盐度条件下调控表达分析

瘦素(Leptin,Lep)在动物摄食、生长、生殖、免疫、能量平衡等方面具有重要作用,为研究花鲈Lateolabrax maculatus Lep功能,采用c DNA末端快速扩增法(RACE)克隆花鲈Lep A c DNA全长序列。急性低盐度调控试验设置海水组(盐度32)、半海水组(盐度16)和淡水组(盐度0),盐度调控24、48、96、144、192 h后测定花鲈肝脏中Lep A mRNA的表达情况。结果表明:Lep A c DNA全长序列为643 bp,其中开放阅读框483 bp,编码161个氨基酸,其氨基酸序列由信号肽和A、B、C、D 4个α螺旋区域组成;花鲈Lep A氨基酸序列与其他物种同源性较低,但三级结构较为保守;花鲈Lep A主要在肝脏中表达,其次为脑;低盐调控48 h时,半海水组与淡水组Lep A表达无显著性差异(P0.05),但均显著低于海水组(P0.05),分别为海水组的33.38%和26.86%。研究表明,急性低盐度调控可降低花鲈Lep A表达水平。     

不同饲料蛋白水平对杂交鳢增重及肌肉营养成分的影响

5个饲料蛋白水平对杂交鳢生长、消化酶、肌肉营养成分等影响结果表明:试验投喂8周后,随着饲料蛋白水平的增加,杂交鳢的增重率增加,饲料系数降低;饲料蛋白水平为46.1%时,杂交鳢的增重率最大,与38.3%、40.1%试验组之间的差异极显著(P<0.01),与42.2%、44.3%试验组之间的差异显著(P<0.05);随着饲料蛋白水平的增加,饲料转化效率不断提高。此外,杂交鳢的胃蛋白酶、胰蛋白酶和脂肪酶活性表现出正态分布的特性,含量呈先增后减的趋势,而淀粉酶活性则表现为正相关变化。     

几种药剂对绿豆象的田间防效

选用40%辛硫磷乳油、77.5%敌敌畏乳油、25%高氯?马乳油、20%甲氰菊酯乳油、40%氯虫?噻虫嗪水分散粒剂、5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂等6种药剂, 通过浸种、浸种+喷雾、喷雾等不同的处理, 筛选小豆田间绿豆象防治的最佳药剂及施用方法。结果表明, 施用药剂均能促进小豆产量提高, 并对绿豆象有不同防效; 相同药剂不同的施用方法对绿豆象的防效不同, 防治效果依次为浸种+喷雾>喷雾>浸种; 40%辛硫磷乳油500倍液浸种+500倍液喷雾防治绿豆象的效果最好, 防效达95.84%。     

Efficacy of Plectranthus glandulosus (Lamiaceae) and Callistemon rigidus (Myrtaceae) Leaf Extract Fractions to Callosobruchus maculatus (Coleoptera: Bruchidae)

As part of on-going efforts to use eco-friendly alternatives to chemical pesticides, methanol crude extracts of Plectranthus glandulosus and Callistemon rigidus leaves were sequentially fractionated in hexane, chloroform, ethyl acetate, and methanol to establish the most active fraction(s) against Callosobruchus maculatus in cowpea. Cowpea seeds (25 g) were treated with 0.5, 1, 2, and 4 g/kg of extract to evaluate the contact toxicity and F₁ progeny production of the beetles in the laboratory. Mortality was recorded 1, 3, and 7 d postexposure. P. glandulosus hexane fraction was more toxic than the other fractions recording 100% mortality at 4 g/kg, within 7 d with LC₅₀ of 0.39 g/kg. Hexane fraction of C. rigidus showed superior toxicity, causing 100% mortality at 4 g/kg within only 1 d of exposure with LC₅₀ of 1.02 g/kg. All the fractions greatly reduced progeny emergence, with C. rigidus hexane fraction being the best progeny inhibitor. Fractions of P. glandulosus and C. rigidus leaves had sufficient efficacy to be a component of storage pest management package for C. maculatus.     

温度对绿豆象种群增长的影响

在实验室条件下以绿豆为食料饲养绿豆象,在20、25、30和35℃等4个温度条件下,逐日观察记录绿豆象产卵量、卵孵化数和成虫羽化数等生物学参数。结果表明,随着温度的升高,绿豆象卵期、豆内期、未成熟期、雄虫历期及雌虫历期逐渐缩短,温度从20℃升至35℃时,卵历期从18.33d缩短为4.40d,豆内期从36.43d缩短为15.20d,未成熟期从54.76d缩短至19.60d,雄虫历期从43.93d缩短至8.07d,雌虫历期从25.33d缩短至8.07d。在20℃下,绿豆象卵、豆内期及未成熟期存活率均最低,且与其他3个温度差异显著。在20℃下,绿豆象产卵历期最长,为20.67d,但总产卵量及雌性比例均较其他3个温度低,分别为43.33粒和33.27%。绿豆象卵、豆内期、未成熟期及整个世代的发育起点温度分别为14.69、11.11、12.03和13.73℃,有效积温分别为82.63、342.87、427.94和565.59日·度。在35℃时,绿豆象内禀增长率和周限增长率均最大,分别为0.044 58和1.045 58。研究结果表明,在30~35℃条件下,最有利于种群增长,为绿豆象发育的最适宜温度。     

3种植物精油对绿豆象成虫的熏蒸及驱避活性

试验测定了辽东蒿精油、野艾蒿精油及茼蒿精油对绿豆象成虫的熏蒸和驱避活性。结果表明:3种植物精油对绿豆象均有较好的熏蒸活性,辽东蒿精油体积分数为16.67μL/L,熏蒸处理8 h后校正死亡率为100%,在12 h后各精油处理组的校正死亡率均70%;野艾蒿精油体积分数为25.00μL/L,熏蒸处理8 h后校正死亡率为100%,在12 h后各精油处理组的校正死亡率均40%;茼蒿精油体积分数为41.67μL/L,熏蒸处理8 h后校正死亡率为100%,在12 h后各精油处理组的校正死亡率均30%。辽东蒿精油、野艾蒿精油对绿豆象成虫的驱避活性高于茼蒿精油,10μL/L辽东蒿、野艾蒿精油处理10 min后驱避率88%,茼蒿精油驱避率约为57%。     

低温和高温对仓储绿豆象的防治效果

【目的】确定绿豆象最耐受低温或高温的发育阶段,得到不同温度下完全防控该虫所需时间,为防治仓储绿豆象提供理论基础。【方法】在-5和40℃下,分别对绿豆象卵、幼虫、蛹和成虫进行处理,确定最耐受低温或者高温的虫态。在此基础上,对低温（-5、-10、-20℃）以及高温（40、45、50℃）下最耐受虫态做进一步的生物测定,从而得到完全防控绿豆象的时间。【结果】绿豆象幼虫和蛹耐寒能力较强,卵、幼虫、蛹和成虫在-5℃的LT50分别是12.57、24.93、30.54和15.76 h。绿豆象蛹耐热能力较强,卵、幼虫、蛹和成虫在40℃时的LT50分别是4.29、17.76、22.33和14.50 h。绿豆象的蛹在低温-5、-10和-20℃下的LT50 分别是30.54、6.50和0.96 h,LT99分别是189.70、33.81和2.90 h。在高温40、45和50℃下的LT50 分别是22.33、3.64和0.85 h,LT99分别是169.43、17.77和3.71 h。【结论】绿豆象各虫态耐低温和耐高温的能力均为蛹较强,据此得到处于不同温度下完全控制绿豆象危害所需时间。因此,利用低温或高温防控仓储绿豆象是可行的。     

杂交鳢杭鳢1号胚胎发育过程的观察

通过尼康显微镜观察了杂交鳢杭鳢1号子一代的胚胎发育,并拍摄了其发育特征,描述了各发育时期的发育时序和形态特征。杭鳢1号的胚胎发育可分为卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、尾芽出现期、肌肉效应期、心跳期、出膜期等几个主要阶段。在22~25℃的水温条件下,杭鳢1号鱼卵孵化约需50 h才能破膜而出。