出血性大肠杆菌O157eae-stx1/2B融合基因的构建和表达

构建表达eae和stx1／2B的融合基因，克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分，以正确地阅读框定向插入到含有stx1／2B融合基因的质粒，构建重组质粒，将其转化于BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，经SDS—PAGE电泳检测，该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明：目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50．67％。由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成，可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体，在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。     

几种常用生殖激素在养猪生产使用中的一些注意事项

生殖激素是家畜体内作用并调节生殖过程的功能性激素,在养猪生产中,合理使用生殖激素可以提高母猪的发情利用率、增加母猪产仔数和产仔胎次、控制集中分娩等,但如果滥用可能导致母猪生殖机能紊乱,造成繁殖机能障碍等问题。为了在生产中准确而有效地使用生殖激素,本文主要介绍了几种常用生殖激素应用原理及注意事项,以期为生产提供一定的指导意义。     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗又称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗。目前研究最多的是DNA疫苗，由于其不需要任何化学载体，又称裸DNA疫苗，主要是利用基因重组技术直接将编码抗原蛋白的外源抗原基因导入动物体细胞内，在宿主细胞中表达外源抗原基因，诱导宿主产生对该抗原的免疫应答，从而使被接种动物获得免疫保护。     

应用体内诱导抗原技术检测细菌体内表达基因的研究进展

细菌的致病过程是与宿主细胞相互作用的复杂过程,它涉及病菌众多毒力基因产物即毒力因子的协同作用,并能与宿主的免疫系统一同进化[1]。目前对很多细菌的毒力因子和致病机制的研究虽取得了一定进展,但对其毒力因子的具体数量、本质和细菌如何逃逸宿主免疫反应并最终致病的分子机理等尚不清楚,这正是抗菌药物和疫苗研发滞后的症结所在。为研究细菌的毒力因子,人们已建立了许多方法,如克隆筛选法、调控筛选法等,这些方法均在体外进行,并已成功地鉴定出许多细菌的致病基因。然而,致病菌在宿主体内所处的环境和体外有着明显不同,为了适应这种环…     

鸡艾美耳球虫耐药性的人工诱导及检测方法的研究进展

球虫病是集约化养鸡场危害最大的疫病之一,目前其防治仍主要靠抗球虫药,但药物的长期使用不可避免地会产生耐药性,球虫的耐药性成为防治鸡球虫病的一大严重障碍。人工诱导产生耐药虫株,可为球虫耐药性相关研究提供材料,建立快速、准确耐药性检测方法,可为临床用药提供可靠的依据,同时也降低了药物残留的几率。本文对艾美耳球虫耐药性虫株的人工诱导方法及耐药性检测方法进行了综述,并提出了对鸡球虫耐药性检测的展望,为消除球虫耐药性,更好地防止鸡球虫病提供依据。     

抗保幼激素诱导三眠蚕技术体系的研究

为研究抗保幼激素对三眠蚕的诱导效果,本试验通过优化诱导条件,以400ppm药液处理桑叶,给3龄和4龄饷食家蚕添食,3龄诱导区和4龄诱导区的三眠诱导率分别为94%和96%;全龄期分别为17d∶19h和15d∶19h,与对照相比龄期缩短2～4天,诱导的三眠蚕体质增强,茧丝纤度分别为1.224D和0.785D。     

中国麇鹿朊蛋白核心片段的原核克隆表达与纯化

从采取的新鲜麋鹿血液中提取麋鹿基因组DNA,通过PCR的方法从麋鹿基因组中扩增麋鹿PrP蛋白核心片段的DNA,并分别在引物的5′和3′端引入EcoRⅠ和HindⅢ两个酶切位点,下游引物将原序列TATTAC突变为TAAT从变成两个终止密码子。通过两个酶切位点将麋鹿PrP蛋白核心片段DNA连接到pET-32a（＋）,转化DH5α,通过酶切鉴定和PCR鉴定,筛选出阳性克隆送菌液测序,从测序结果分析阳性克隆是否符合要求。测序正确后将核心片段基因连接到pET-32a（＋）,阳性质粒命名为MPrP-pET-32a（＋）,阳性质粒转化E.coli BL21（DE3）,进行诱导表达、蛋白质纯化鉴定。     

家蝇抗菌肽的研究进展马红霞

从家蝇抗菌肽的分类、结构特点、作用机理、诱变、活性检验以及分子生物学研究等方面介绍了家蝇抗菌肽的研究进展。家蝇抗菌肽独特的作用机理、成熟的诱导、分离纯化技术及其相关基因的克隆、表达等研究成果均为对家蝇抗菌肽进行更深入的研究奠定了基础。采用分子生物学技术有望筛选并制备大量的高效家蝇抗菌肽。     

猕猴桃‘翠香’再生体系的建立

取‘翠香’猕猴桃的幼嫩枝条为材料,利用不同激素及浓度诱导茎段腋芽、增殖、生根,并进行驯化移栽。结果表明：‘翠香’猕猴桃茎段腋芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg.L-16-BA+0.3 mg.L-1NAA,诱导率达88.89%;增殖培养最佳培养基为MS+5 mg.L-1 6-BA+0.4 mg.L-1 NAA,增殖系数为6.20,三代内增殖效果稳定;生根培养的最佳培养基为1/2MS+0.9 mg.L-1IBA,生根率为94.44%,根数为11.40,根长为2.94;驯化后移栽成活率达88.33%。     

人类胚胎干细胞的分离及定向诱导

胚胎干细胞(ES)分离建系的过程就是将扩张囊胚,用机械法或免疫法从囊胚中分离出内细胞团,接种到滋养层细胞,培养几天后,将增殖的内细胞团离散,再接种到新鲜的滋养层上继续生长,经过几代纯化,建立起具有ES细胞特征的细胞系。1分离建系1.1胚胎来源1.1.1体内成熟的囊胚Thomson等(1