MTS法检测番鸭呼肠孤病毒对鸭胚成纤维细胞活力的影响

采用MTS法检测接种不同致病力番鸭呼肠孤病毒12h、24h、36h、48h、72h、96h后对番鸭鸭胚成纤维细胞(MDEF)活力的影响。根据细胞病变情况和活力状态确定细胞发生变化的拐点,初步探讨番鸭呼肠孤病毒感染诱导细胞凋亡的发生和细胞活力的特征变化,进一步了解番鸭呼肠孤病毒与宿主之间的相互关系,为研究番鸭呼肠孤病毒感染和致病机理提供时间科学依据。结果表明,接毒后36h,细胞活力达到最高,高致病力YB毒株作用于MDEF,细胞活力在48h大幅下降并出现明显细胞凋亡;低致病力YJL毒株作用于MDEF,则在72h可出现明显细胞凋亡。     

黄芪提取液对家兔睾丸细胞活力的影响

为探讨黄芪提取液对家兔睾丸细胞活力的影响,将无菌条件下分离得到的家兔睾丸细胞培养于含有不同浓度黄芪提取液的培养液内,培养48 h后,用CCK-8试剂测定细胞相对活力。结果表明,培养液内添加适当浓度的黄芪提取液可以提高家兔睾丸细胞的活力。     

猪链球菌性脑膜炎致病机制相关靶细胞、关键致病因子研究进展及中兽医辨证论治初探

<正>猪链球菌病是由猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)引起的一种急性、热性传染病,被我国农业部列为二类动物疫病[1],脑膜炎则是2型猪链球菌(S.suis serotype 2,SS2)引起的主要病症之一,该病症在猪和人均可发生,症状重剧,死亡率高,后遗症严重[2]。此外,SS2还可引起败血症、心内膜炎,关节炎等其他病症。近年来脑膜炎型猪链球菌病的比例有明显上升趋势[3-4]。对于人类,猪链球菌的威     

H9N2亚型禽流感病毒感染TC-1细胞诱导的免疫反应

为了更好地了解宿主对禽流感病毒(AIV)感染后的免疫反应,本试验以TC-1细胞为模型,感染H9N2亚型AIV。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测了3种模式识别受体(TLR-3、RIG-I和MDA-5)和5种炎性细胞因子(IL-6、RANTES、IP-10、TNF-α和IFN-β)。结果显示:3种模式识别受体中MDA-5上调最为明显,5种炎性因子中RANTES和IP-10上调最为明显;而IL-6、TNF-α和IFN-β上调相对较平缓。本研究结果表明:在病毒感染过程中MDA-5反应较TLR-3和RIG-I更为强烈,而在炎性反应过程中RANTES和IP-10反应更加剧烈,IL-6、TNF-α和IFN-β反应则相对较温和一些。本研究在一定程度上反映了机体对流感病毒的免疫反应机制,为在生产中疫苗的使用具有一定的指导意义。     

鸡球虫感染与宿主细胞凋亡的研究进展

鸡球虫感染引起的细胞凋亡是球虫与宿主细胞之间的相互作用,球虫感染宿主细胞后,可引发局部炎症进而诱发宿主细胞凋亡,也可抑制宿主细胞凋亡,维持细胞完整性。     

Research on the Antioxident Function of Sulforaphane on the Leydig Cells of Cadmium Exposured Mice

The study was aimed to explore the antioxident function of sulforaphane (SFN) on the leydig cells of cadmium (Cd) exposured mice.Cd and SFN were added to the cell culture medium of TM3 cell, half inhibitory concentration (IC₅₀) of Cd and SFN safe dose range were determined.The tested model was set up,and the relative survival rate of TM3 cells, lactate dehydrogenase (LDH) activity and cell antioxidant levels were determined to study the antioxident function of SFN to cadmium exposured mice.The results showed that:①With the increase of Cd concentration,the relative survival rate of TM3 cells was decreased,and the IC₅₀ of Cd was 51.4 μmol/L;Within a certain concentration range,SFN could increased the cells survive rate,but there was toxicity when the SFN concentration was more than the scope,and the greater the concentration,the greater the toxicity. At experimental condition,SFN safety concentration were 2.5,5 and 10 μmol/L.②Compared with the control group,the GSH content,the T-SOD and GSH-Px activities in Cd group were significantly or extremely significantly decreased (P < 0.05;P < 0.01),and the LDH activity,the MDA content were increased.Additionally,the LDH activity and MDA content of SFN groups were decreased,while others three indexes were increased. Compared with Cd group,the GSH content,the T-SOD and GSH-Px activities of Cd+SFN groups were significantly or extremely significantly increased (P < 0.05;P < 0.01),however,the LDH activity,MDA content were decreased. The result indicated that SFN had the antagonism effect on toxicity of Cd in TM3 cell.     

哈萨克羊骨骼肌卫星细胞的分离培养及鉴定

为了建立可稳定传代的哈萨克羊骨骼肌卫星细胞培养体系,以90日龄的哈萨克羊胎羊后腿肌为试验材料,采用酶消化法(胶原酶与胰蛋白酶)对绵羊骨骼肌卫星细胞进行分离,差速贴壁法对细胞纯化;对得到的骨骼肌卫星细胞进行形态学鉴定;使用Pax7特异性标志蛋白进行免疫荧光鉴定。经过免疫荧光染色的Pax7基因的免疫阳性产物,呈明显的绿荧光,分布于细胞质中。本研究成功从哈萨克胎羊中分离出了具有良好增殖分化能力且便于传代的骨骼肌卫星细胞,为研究调控哈萨克羊肌肉生长发育的分子机制,为完善哈萨克羊肉品质的研究提供基础。     

黄连素抑制猪流行性腹泻病毒复制和组装

通过Western blot、qRT-PCR、噬斑形成试验等方法检测细胞病变、病毒增殖水平、细胞中病毒蛋白水平与基因水平表达来探究黄连素是否具有抗猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)活性,并通过检测细胞凋亡相关的标志蛋白PARP1、caspase7以探究黄连素是否影响病毒引起的细胞凋亡。结果显示,黄连素明显抑制了PEDV在Vero细胞中引起的细胞病变,明显降低了细胞内与上清中的病毒粒子的产生。在后续研究中,发现黄连素抑制了PEDV的复制和组装阶段,对病毒的吸附、入胞、释放的过程并没有明显影响。另外,检测了细胞凋亡的标志蛋白PARP1和caspase7,发现黄连素下调了PARP1、caspase7的剪切,减弱了PEDV诱导的细胞凋亡。结果表明,黄连素具有抗PEDV活性,并抑制PEDV的复制与组装阶段,可作为一种针对PEDV感染的潜在抗病毒药物。     

兔脑炎原虫引起的脑组织细胞凋亡

为了调查兔脑炎原虫引起脑组织细胞的凋亡情况,本研究用特殊染色、TUNEL染色、凋亡蛋白免疫组化染色和Western blot,对40只家兔的脑组织进行了详细研究。结果表明,病兔的脑组织中均检出了肉芽肿和脑炎原虫。脑炎原虫所引起的脑细胞凋亡主要发生于脑血管的内皮细胞、星形胶质细胞、巨噬细胞和上皮样细胞,其次为病变所累及的神经细胞。用TUNEL的免疫酶-荧光染色和抗凋亡蛋白的免疫组化染色,凋亡细胞均呈强阳性反应,被染成棕褐色。对脑组织蛋白提取物进行Western blot检测,病兔脑组织中P~(53)、Bcl-2、Bax和c-Myc凋亡基因蛋白表达量明显高于对照兔,差异非常显著(P0.01)。结果表明,兔脑炎原虫在脑组织细胞内寄生时可以引起细胞凋亡。