鸡骨、肝和肠硷性磷酸酶的提纯和性质

用正丁醇抽提、DEAE纤维素(DE—52)和Con·A—Sepharase 4B柱层析等方法从鸡的骨、肝和肠组织中提取碱性磷酸酶(ALP)。提纯倍数分别为41倍(骨)、391倍(肝)和130倍(肠)。将粗提的ALP进行聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,骨、肝ALP均出现两条带,其分于量为154 000和353 000(骨),187 000和353 000(肝);肠ALP有3个组分,分子量为123 000、235 000和327 000。骨、肝、肠的ATP经DE—52柱层析均得到两个酶峰,其中总活性较大的峰(主峰)进行Con·A—Sepharose 4B柱层析后,其ALP对磷酸苯二钠的km值分别为0.532mM(骨)、0.452mM(肝)和0.472mM(肠)。骨、肝ALP对热敏感,而肠ALP则比较耐热,56℃作用9min,酶活性降低98.8％(骨)、95％(肝)和59.3％(肠)。尿素可抑制骨和肝ALP,肠ALP对尿素不大敏感。4 mol/L尿素对骨ALP活性抑制100％,对肝ALP 95％,对肠ALP仅为47％。2 mmol/L左旋咪唑能抑制骨ALP活性的57.1％、肝ALP的57.7％、肠ALP的15.7％。20 mmol/L L—苯丙氨酸能抑制肝ALP活性的12％、骨ALP的18.5％、肠ALP的57％。低浓度L—苯丙氨酸(1～15mmol/L)对骨ALP几乎没有抑制作用,而对肝ALP有一定抑制作用。上述结果表明,鸡的骨、肝和肠ALP可分为两型:一型为肠ALP,另一型为骨和肝ALP。     

迪卡配套系猪B系、E系血液生化指标的测定

通过随机抽样测定了20头B系、22头E系猪的10项血液生化常值。结果表明：碱性磷酸酶总活性两系差异极显著(P＜0.01)，胆碱酯酶总活性两系差异显著(P＜0．05)，其他指标两系差异均不显著(P＞0．05)。     

三角城藏羊血清碱性磷酸酶同工酶及其多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法，对１００只三角城藏羊的血清碱性磷酸酶（ＡＬＰ）同工酶及其多态性进行研究。结果表明：（１）被检三角城藏羊ＡＬＰ有Ａ，Ｂ，Ｃ和Ｄ四种同工酶，（２）ＡＬＰＢ同工酶有ＡＬＰ降ＡＬＰ两种表型，以ＡＬＰＯ为优势表型；（３）ＡＬＰＢ表型还可区分出ＡＬＰＢ－１和ＡＬＰＢ－１，２两种亚型；（４）ＡＬＰＣ同工酶可能也存在多态性。     

饲料锌水平对肉用仔鸡肝脏中含锌酶活性的影响

选择１０日ＡＡ肉用仔鸡３００只，随机分成６组，每组５０只。第一组为对照组，饲以含锌３０ｍｇ／ｋｇ的玉米～豆饼基础日粮，其它五组依次含锌６０、１１０１６０、２１０和２６０ｍｇ／ｋｇ。至５０日龄时，测肝脏中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）的活性和肝组织中的含锌量。结果表明，在试验条件下，ＳＯＤ活性随饲料锌水平的提高基本不变，ＬＤＨ、ＡＫＰ、ＧＰＴ活性及锌含量随饲料锌水平的提高而提高。     

滩羊种质及血液遗传标记研究：碱性磷酸酶和淀粉酶活性分布的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定滩羊种群间Ａｌｐ、Ａｍｙ活性分布，结果表明：ＡｌｐＡｍｙ活性分布在选育程度不同的群体间表现出十分明显的差异。     

PP1γ2对树鼩精子成熟和运动性的调控作用研究

为了阐明树鼩精子中是否存在丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1γ2（PP1γ2）及其在附睾精子中的存在形式,进而探究PP1γ2对精子成熟和运动性的调控作用,本试验以树鼩为研究对象,采用Western blotting分析了不同条件下树鼩附睾头和附睾尾精子中PP1γ2的存在形式和磷酸化程度,探讨了双丁酰环腺苷酸（db-cAMP）、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）或Ca²⁺对树鼩精子中PP1γ2磷酸化表达水平的影响,并进一步研究了磷酸酶抑制剂冈田酸（okadaic acid,OA）和花萼海绵诱癌素A （calyculin A,CA）对树鼩精子中PP1γ2磷酸化程度的影响及其对树鼩附睾头和附睾尾精子运动度的影响。结果显示,在树鼩附睾头和附睾尾精子中均存在PP1γ2,且在等量的附睾头和附睾尾精子蛋白中,PP1γ2在附睾尾精子的磷酸化程度远高于附睾头精子;db-cAMP、IBMX或Ca²⁺不改变PP1γ2的磷酸化水平;磷酸酶抑制剂OA和CA能明显提高附睾头和附睾尾中PP1γ2磷酸化的程度,且能显著提高精子（尤其是附睾头精子）的运动度（P<0.05）,OA和CA的最佳作用浓度分别为1 μmol/L和10 nmol/L,最佳作用时间分别为15、20 min。本研究结果表明,蛋白磷酸酶PP1γ2对树鼩精子成熟及运动性具有重要的调控作用,其主要通过磷酸化和去磷酸化的变化发挥作用。     

4株南极真菌的形态学和分子鉴定及其中3株的蛋白磷酸酶、脂肪酸成分分析

由于极地独特的地理、气候及环境特点,使得极地微生物及其代谢产物具有新颖性与多样性。采用3种选择性培养基的稀释平板涂布法,从南极普里兹湾海洋沉积物中分离得到4株真菌菌株,经过形态学、18s r DNA-ITS序列分析,分别鉴定为隐球酵母Cryptococcus sp.NJF1、曲霉Aspergillus sp.NJF3、枝孢霉Cladosporium sp.NJF4和Cladosporium sp.NJF6;对其中的曲霉NJF3、枝孢霉NJF4和NJF6等3株真菌开展了蛋白磷酸酶含量和大田软海绵酸OA对该酶的抑制作用测试,并分析了菌株提取物中的脂肪酸成分。结果显示:NJF3、NJF4和NJF6有很好的蛋白磷酸酶活性,以蛋白磷酸酶-PP为外标,测定酶含量分别为0.732 2 U·g-1、0.678 U·g-1和1.229 2 U·g-1,且100 n M OA对NJF3和NJF4蛋白磷酸酶有一定抑制作用,而NJF6需要200 n M OA才可以轻微抑制其蛋白磷酸酶活性;3株真菌的脂肪酸成分以油酸为主,相对含量分别达到32.4%、37.2%、40.1%,而NJF4和NJF6还含有较高含量的亚油酸,相对含量分别达到27.3%、29.8%。本研究可为下一步开展菌株的酶、天然代谢产物研究奠定基础。     

低钙对蛋鸭血清钙、磷及破骨细胞活性的影响

将120只600日龄产蛋山麻鸭随机分为正常日粮组、1/2石粉组和1/4石粉组,自动生化分析仪测定更换饲料前1 d及更换饲料后1、3、5周血清钙、磷水平,观察缺钙日粮对蛋鸭血清钙、磷的影响.分离山麻鸭破骨细胞(OC),在此基础上添加不同浓度钙离子(2、3、5、7 mmol·L~(-1)),倒置显微镜观察体外培养OC形态,培养1、3、5、7 d进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP),7 d后扫描电镜观察象牙片吸收陷窝.结果表明:钙缺乏可导致蛋鸭血清钙、磷水平升高,降低钙磷比例.高浓度钙和较低浓度钙显著抑制OC生成及骨吸收活性.结果说明缺钙可诱导OC生成并发挥骨吸收功能,最终导致骨代谢性疾病.