铁皮石斛中性/碱性转化酶家族基因的克隆和表达分析

为了探究铁皮石斛中性/碱性转化酶(neutral/alkaline invertase, NI)家族基因的生物学特性和组织表达特性,本试验从铁皮石斛转录数据库中筛选DoNI基因,采用PCR技术克隆到4个新的铁皮石斛DoNI家族基因,分别命名为DoNI1、DoNI3、DoNI4和DoNI5,并利用生物信息学软件分析家族蛋白的理化特性,采用荧光定量PCR检测和分析该家族基因的时空表达特性。结果显示：DoNI1、DoNI3、DoNI4和DoNI5分别编码611、651、554和555 aa,其蛋白分子量为63.18～73.23 kD,等电点为5.84～6.66,氨基酸序列同源性为50%～90%。具有中性转化酶的保守结构域,属于糖基水解酶GH100家族。DoNI1属于线粒体型,DoNI3属于叶绿体型,DoNI4和DoNI5属于细胞质型。在铁皮石斛花、茎、叶和根中都能检测到DoNI家族基因的表达,DoNI1和DoNI3在根中基因表达量最高,DoNI4和DoNI5在花中基因表达量最高。DoNI1在2年生茎中基因表达量最高,1年生茎中次之,3年生茎中最低。不同生长年限茎中的DoNI3与DoNI1基因...     

超高效液相色谱-串联质谱法检测棉花和土壤中呋虫胺残留

在QuEChERS方法基础上,建立了棉花和土壤中呋虫胺残留的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)快速检测分析方法。方法选用乙腈为提取剂,N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化炭黑(GCB)为净化剂,外标法定量。添加回收试验结果表明,不同添加浓度的呋虫胺(0.01、0.05和0.5mg/kg)在棉花植株、棉籽和土壤中的平均回收率为80.9%~107.5%,变异系数为3.3%~10.3%,定量限(LOQ)分别为4.81、3.41和2.26μg/kg。呋虫胺在棉花植株上的消解动态表明,呋虫胺在河南省和山东省两地棉花植株中的降解半衰期分别为1.9d和1.2d。     

HPLC-MS/MS快速检测水产品中甲基睾丸酮的研究

用甲基叔丁基醚提取水产样品中的甲基睾丸酮,提取物经C18粉和正己烷净化后,通过电喷雾离子源电离多反应监测(MRM)对甲基睾丸酮作定性和定量分析。结果表明,甲基睾丸酮在1.0～500.0μg/L浓度范围内线性良好(r>0.999);在4.0～200.0μg/kg添加水平下,回收率为80.4～95.2%,相对标准偏差为4.1%～10.5%,检测限为1.0μg/kg(S/N=5)。     

甘肃烟区烤烟常规化学成分特征及年度变化分析

为研究甘肃烟区烤烟常规化学成分特征及其年度变化趋势,以2010—2019年甘肃省2个种植区(陇南和庆阳)的主栽品种共180个复烤片烟为研究对象,对其常规化学成分特征和年度变化进行分析.结果表明:(1)甘肃烟区烤烟常规化学成分含量整体适中,总糖含量相对较高,而钾和氯含量偏低;钾氯比波动较大;(2)庆阳和陇南产地烟叶总糖、...     

LC-MS/MS法对动物源性食品中金刚烷胺的残留分析

本试验用高效液相色谱-电喷雾串联质谱对动物源性食品中金刚烷胺进行了检测。以甲醇-1%三氯乙酸(50+50,V+V)作提取剂,萃取液用Oasis MCX固相萃取柱(3cc,60mg)进行净化,以luna C18,3.0μm,2.1×150mm色谱柱为分析柱,在正离子模式下以电喷雾电离串联质谱仪进行测定。在1.0~50.0ng/ml范围内线性关系良好(r2≥0.999)。样品在1.0μg/kg,5.0μg/kg和10.0μg/kg添加水平的回收率为72.5%~89.8%,相对标准偏差小于10.0%;方法的定量限为5.0μg/kg。     

甘肃优质肉羊产业技术体系建立的研究

甘肃作为我国重要的养羊省份之一,优质羊肉生产的经济杂交体系处于初级阶段,缺乏系统性和可推广性;科学系统的优质肉羊生产技术体系尚未真正建立;同时,还缺乏优质肉羊生产的政策、市场、生产导向,缺乏良种繁育体系的组装配套。亟需建立甘肃省优质肉羊产业技术体系,把肉羊高频繁殖,杂交组合优化筛选,高效饲养管理技术及兽医保健技术作为这一体系的核心技术,加上其他配套技术体系的组装,使甘肃肉羊产业走向高产、优质、快速、健康发展之路,率先建立我国西北优质羔羊肉生产基地。     

CnAβ基因对大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒的影响

过敏是人和养殖动物常见的疾病,而且发生的频率呈现逐渐增加的趋势.为了深入了解过敏反应的机制,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建钙调磷酸酶A beta(calcineurin A beta,CnAβ)基因敲除的大鼠RBL-2H3细胞株,并探讨CnAβ基因对RBL-2H3细胞生长及脱颗粒的影响.选取大鼠Cn...     

甘肃省探索建立动物跨区域调运监管机制的研究

通过建立地方法规,依法开展贩运人员管理,创新流通环节监督执法,强化养殖环节监督管理,甘肃省初步形成了动物跨区域调运监管机制基本框架,在本省动物疫病防控工作中发挥了重要作用。     

肃南高寒牧区猪附红细胞体病的诊断与防治

猪附红细胞体病是近几年来新发现的猪的一种血液寄生虫病 ,是由附红细胞体感染猪所致。本病在一些业务期刊上多有报道 ,但在气候比较寒冷的牧区发生实属首例。现将发病及诊疗情况总结如下 ,以供参考。1　发病情况2 0 0 2年 3月 ,肃南县城郊某个体养殖户 ,从张掖农村购进一月龄健康仔猪 6头饲养 ,曾用兰州生物药厂生产的“猪三联疫苗”进行了免疫注射。同时用来苏尔、草木灰、生石灰等喷洒圈舍进行了消毒 ,喂养 1个多月后 ,同圈饲养的 2头猪同时发病 ,临床表现以不食、发烧、腹泻为主要特征 ,畜主采用青霉素、链霉素、磺胺嘧啶、病毒灵、柴胡…     

副溶血性弧菌PCR检测方法的建立

为了建立适于基层单位应用的针对副溶血性弧菌检测的特异PCR方法,检测副溶血性弧菌的基因序列.针对该菌的属特异性基因t1基因进行引物设计,扩增片段大小为449 bp.运用该PCR法可特异性的从副溶血性弧菌ATCC17802标准株中扩增出目的基因片段,与GenBank上发表的序列同源性为100%.而经常污染海产品的溶藻弧菌,嗜水气单胞茵标准株J-1,铜绿假单胞茵标准株ATCC27853结果均为阴性.该PCR法最低检出菌体DNA量为10-2ng以及最低检出菌数为5.7 × 103 CFU/mL.对临床上送检的35份样品进行菌体DNA PCR方法检测并同时与国标GB/T4789.7-2003中使用的检测方法进行比对,两种检测方法的结果完全符合,与国标中使用的检测方法相比可大大缩短鉴定时间.因此该PCR法能快速鉴定当前副溶血性弧菌流行群,有利于流行病学溯源等研究.