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4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate:coenzyme A ligase,4CL)催化各种羟基肉桂酸生成相应的硫酯,从而调控木质素和黄酮类物质的生成.4CL的芥子酸催化活性一直是备受关注的一个问题,目前只有拟南芥(Arabidopsis thaliana)的At4CL4和大豆(Glycine max)的Gm4CL1具有芥子酸转化能力.本研究用水稻(Oryza sativa subsp.japonica)苗期的叶片为材料,提取总RNA并以此为模板,用反转录PCR扩增水稻的Os4CL5基因,并将其连接到原核表达载体pET22-b(+)上,构建了原核表达载体pET-4CL5(+Val).通过定点突变的方法删除了水稻Os4CL5的Val337,构建了原核表达载体pET-4CL5(-Val).重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(ED3)并经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测表明,融合蛋白的分子量为57.0 kD,与预测值一致.His-SpinTrap蛋白纯化系统纯化回收重组蛋白,然后对重组蛋白的酶学性质进行表征.结果表明,野生型Os4CL5对不同底物表现出了不同的催化效率,香豆酸是最适底物,其次是阿魏酸,再次是咖啡酸,对芥子酸没有活性.与野生型Os4CL5相比,突变型Os4CL5对香豆酸、咖啡酸和阿魏酸的催化效率有所提高,并且其底物特异性发生了明显改变,获得了对芥子酸的催化活性.本研究为利用基因工程手段调控木质素的生物合成提供了理论依据. 相似文献
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一、禁忌的注射方法及部位
1.腿部:严禁肌肉注射,用这种方法应激大,最易出现问题。腿部肌肉注射,易损伤坐骨神经,引起瘫痪,采食量下降,消瘦,尤其是禽出败灭活疫苗、大肠杆菌灭活疫苗和鸡传染性鼻炎灭活疫苗等。 相似文献
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油雾润滑作为一种新型的机泵润滑方式,具有改善润滑效果、降低轴承故障率、减少润滑油消耗量和降低运行成本等优点,且已在国内外石油化工行业得到广泛应用。本文对油雾润滑系统的工作原理、油雾润滑与传统润滑的性能比较、油雾润滑系统的配置及油雾润滑技术的发展应用情况进行详细综述,并指出油雾润滑技术对装置规模大、集中程度高、人员配置少的生产装置具有很好的应用价值。 相似文献
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根据东营-辛店管道所输混合原油的胶质、沥青质含量和蜡晶分布特点,研制了BEM-JN系列油基降粘剂,主要成分为聚合物和表面活性剂,其中非极性聚合物为降凝剂的有效成分,主要针对原油中的蜡起作用,极性较强的聚合物和表面活性剂则针对原油中的胶质、沥青质起作用,原油粘度的降低是两类组分综合作用的结果。分别考察了BEM-JN降粘剂和BEM-3降凝剂在不同热处理温度下对东营原油库原油的降粘效果,结果表明:相对较高的热处理温度有利于提高两种化学剂的降粘效果,而相对较低的热处理温度和相对较高的测试温度将使降凝剂表现出增粘效果。室内实验和现场应用试验证明:BEM-JN降粘剂对于东营-辛店管道所输混合原油具有较好的降粘效果,其应用可满足该管道低输量安全运行的需要。 相似文献
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杂交油菜油研11号不同叶龄和移栽期对其经济性状和产量有着明显的影响,试验结果表明:油研11号最佳移栽期为5叶期产量最高,6、7、8叶随着叶龄的增加和移栽期的推迟产量递减。因此,移栽应在10月底以前进行,可更好地发挥该品种的增产潜力。 相似文献