用PCR方法对虎DNA进行特异性检测

为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速，准确的鉴定，东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体ＤＮＡ进行特异性扩增的ＰＣＲ方法。 虎线粒体ＤＮＡ细胞色素Ｂ（Ｃｔｙｂ）段由１１４０个碱基组成，通过用Ｗｄｎａｓｉｓ软件比较１０只苏门达腊虎、１５只东北虎、７只孟加拉虎、３只印支虎及５只华南虎Ｃｔｙｂ的碱荃序列，寻找到它在Ｃｔｙｂ段的保守区域，再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿，黑麂、赤鹿、獐、…     

PCR快速检测羊钩端螺旋体DNA

参照钩端螺旋体16srRNA基因序列，设计出一对引物R1、R2，用聚合酶链反应（PCR）检测20份疑似钩端螺旋体病羊全血，结果5例阳性，与当地防疫部门临床诊断的5例病羊完全符合，阳性符合率为100%。结果表明，PCR技术是一种灵敏、特异、快速的钩端螺旋体病早期诊断方法。     

从动物毛中提取DNA研究初探

利用蛋白酶Ｋ分解毛发蛋白，并使用酚和氧仿除去蛋白质杂质方法提取毛中ＤＮＡ。结果测量获得的数据和曲线表明：动物脱落毛发以及从保存多年标本获得的毛发均可用来提取到具有一定纯度和数量的ＤＮＡ，完全可以满足聚合酶链式反应（ＰＣＲ）所需。     

应用反转录聚合酶链式反应检测鸡Th1样淋巴因子mRNA表？…

应用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和限制性酶切分析技术对鸡脾细胞体外受到有丝分裂原ＣonＡ刺激的情况下,其Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ的表达水平进行了研究。实验结 果表明,ＣonＡ诱导培养３个小时的鸡脾细胞表达α－干扰素（ＣhＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＣhＩＦＮ－γ）和白细胞介素－２（ＣhＩＬ－２）等鸡的Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ 。未诱导但培养了３小时的鸡脾细胞可表达ＣhＩＦＮ－α和ＣhＩＦＮ－γmＲＮＡ,而未     

中国荷斯坦牛乳蛋白分子遗传多态性和产奶性状相关性的研究

从北京两个主要牛场共采得１８７头中国荷斯坦奶牛的血样,提取基因组ＤＮＡ,通过ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对Ｋａｐｐａ酪蛋白、Ｂｅｔａ乳球蛋白（βｌｇ）和Ａｌｐｈａ乳白蛋白（α－ｌａ）进行了基因型的鉴定,并结合产奶性状进行统计分析,结果表明,牛群中上述３种乳蛋白基因的基因频率分别为Ｋ－ｃｎＡ７９％,Ｋ－ｃａＢ２１％,β－ｌｇＡ４３％,β－ｌｇＢ５７％,α－ｌｇＢ１００％,Ｋ－ＣＮ和β－ｌｇ基因位眯对产奶量没     

荧光定量PCR中至少应提供的信息(MIQE)

荧光定量PCR也称qPCR(quantitative PCR),是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,然后结合相应的软件对待测样品模板的起始浓度进行定量。目前,人们对实时定量PCR的操作规范和试验结果分析缺乏共识,许多发表的文章中缺乏足够的试验细     

猪戊型肝炎病毒的快速检测方法

猪是戊型肝炎病毒fHEVl的储存器,最近研究表明该病毒从猪到人跨物种传染。HEV大多通过未煮熟的肉或者内脏传播,本研究建立了一步RT—LAMP快速检测猪戊型肝炎病毒。设计ORF3基因特异性的引物,RT—LAMP的检测敏感性为101拷贝／txLRNA模板,比RT—nPCR检测方法敏感10倍。     

奶牛场荧光定量PCR检测实验室建设实践与思考——以原生态牧业奶牛场实验室建设为例

荧光定量PCR技术用于病原微生物基因表达、基因组变异和多态性检测等,具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,已广泛用于临床诊断和畜禽疫病诊断。本文以黑龙江原生态牧业奶牛场荧光定量PCR检测实验室建设为例,从设计规划、配套设备、人员配备、环境控制及存在问题解决五大方面进行论述,提出PCR实验室建设要根据奶牛场场地实际情况,规划适合PCR实验检测区域;根据PCR检测需求及奶牛场费用预算配置实验设备;根据奶牛场预计检测样品量配备检测人员及培养储备人员;在建立严格的操作规范基础上,严格执行实验分区管理及检测过程中消毒流程,避免实验过程中产生气溶胶污染环境。     

F亚群禽白血病病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

为建立检测F亚群禽白血病病毒(ALV-F)的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-F分离株FGD1803基因组为模板,PCR扩增其env基因,构建重组质粒pMD18-T-F作为标准品.利用该重组质粒建立了 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法(qPCR)的标准曲线,并经反应条件优化建立了检测...