H9N2流感病毒诱导MDCK细胞自噬对病毒复制的影响

本试验旨在研究H9N2流感病毒感染MDCK细胞引发的细胞自噬对病毒复制的影响。试验首先建立了稳定表达GFP-LC3的 MDCK细胞系,该细胞系经H9N2流感病毒感染后,激光共聚焦观察到了绿色荧光的点状聚集,得出H9N2流感病毒感染MDCK细胞引发细胞自噬。随后试验利用3-MA抑制细胞自噬、Rapamycin诱导细胞自噬,荧光定量PCR检测NP mRNA水平,TCID50检测病毒的滴度进行细胞自噬与病毒复制的研究。结果表明： Rapamycin可显著增加NP mRNA水平和病毒滴度（P ＜ 0.01）|3-MA可以显著降低NP mRNA水平和病毒滴度（P ＜ 0.01)。说明H9N2流感病毒感染MDCK细胞引发的细胞自噬可促进流感病毒的复制。 [关键词] H9N2 流感病毒|细胞自噬|病毒复制|MDCK细胞|诱导     

GS-441524体外对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制效果

利用CCK8方法测定GS-441524作用Marc-145细胞的安全浓度,并通过检测该化合物在病毒吸附、内化、核酸复制环节对病毒的感染能力、mRNA与蛋白合成能力的影响,评价了GS-441524体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的活性,确定其在体外抑制PRRSV的作用阶段。结果显示,在Marc-145细胞中,GS-441524具有良好的抗PRRSV活性,其EC₅₀为2.65μmol/L;该化合物在体外显示出良好的安全性,其CC₅₀为2 706.41μmol/L;对PRRSV复制周期的影响是GS-441524主要抑制PRRSV的复制早期阶段,而对病毒吸附、内化环节无阻断作用。结果表明,GS-441524具有抗PRRSV复制的潜在能力,该结果为抗PRRSV药物的选择和开发提供了新思路。     

RNA干扰抑制猪繁殖与呼吸综合症病毒N基因表达及病毒复制

根据siRNA设计原则,选取了PRRSV N基因上的保守序列作为可能的干扰位点,设计、合成了3个siRNAs,分别将其克隆到pSIREN-Shuttle中,获得3个siRNA重组表达质粒:pShuttle-NI,pShuttle-N2和pShuttle-N3.将siRNA重组表达质粒与融合表达质粒pEGFP-ORF7共...     

巧用复制著录期刊

介绍了利用复制查阅编目相关信息、完成编目数据及对现有的期刊数据补充著录的方法,并提出了利用复制编目期刊应注意的几个问题。     

干扰素刺激基因对羊口疮病毒在OFTu细胞中增殖的抑制效应

羊口疮病毒（ORFV）是重要的人兽共患病病原,不仅严重危害养羊业,而且威胁人类健康。干扰素刺激基因（stimulator of interferon genes,STING）作为细胞的DNA感受器,在机体天然免疫中起重要作用。为探索STING在ORFV感染中的作用及其对病毒复制的影响,本研究构建了ORFV感染羊胚胎鼻甲细胞（OFTu）的模型,分析了ORFV感染细胞后对STING及其相关基因的动态表达,探索了STING基因在干扰表达和过表达状态下对ORFV在细胞上增殖的影响。结果表明,ORFV感染OFTu细胞后,STING、cGAS、TBK1、IRF3、IRF7、IL-6、IFN-β、IL-1β和TNF-α的转录明显升高。OFTu细胞过表达STING可导致RIG-1、DDX41、IFI16、IRF3、IRF7、IL-6、TNF-α、IFN-α和IFN-β等基因转录上调。OFTu细胞在STING过表达状态下感染ORFV可介导TBK-1、IRF3、IFN-β和TNF-α的转录升高,抑制ORFV的复制;在STING表达干扰的状态下,ORFV感染OFTu细胞降低了TBK-1、IRF3、IFN-β和TNF-α的转录,增加了ORFV的复制。这表明STING蛋白能够增强抗病毒细胞因子的表达,抑制ORFV在OFTu细胞中的增殖,研究结果为深入理解STING在羊口疮病毒感染和复制中的作用提供了科学的理论依据,也为深入探索ORFV感染和致病的分子机制提供了基础数据。     

生产管理中一类排序问题的遗传算法

生产定理系统中经常会遇到一系列排序问题。本文讨论将ｎ个任务安排在ｍ台设备上完成的一类排序问题。对该类排序问题的其他模型进行了进一步讨论,扩展了模型的适用范围,在建立通用模型的基础上,用遗传算法求解。     

啮齿目核糖酸酶5基因(RNase5)的分子进化

\t\t\t\t\t目的\t\t\t\t\t追溯和揭示非洲兽总目核糖核酸酶基因超家族(RNASE A)的分子进化。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t方法\t\t\t\t\t以Blastn与tBlastn方法分析鉴定7个非洲兽总目物种RNASE A成员;利用ClustalX和MEGA 7.0软件比对翻译RNASE A功能基因的氨基酸序列;基于http://isoelectric.ovh.org在线预测功能基因等电点;利用MrBayes v3.1.2.构建BI系统发育树。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结果\t\t\t\t\t分析鉴定获得82条RNASE A序列,包含64条功能基因和18条假基因;RNASE A序列长度377~654 bp,典型RNASE A序列特征在RNase1~8中相对保守,而在非典型的成员RNase9~13变异位点多;各物种基因的等电点在5.03~9.17之间;长鼻目大象(Loxodonta africana) RNase1、RNase6和管齿目土豚(Orycteropus afer) RNase4发生基因复制,大象RNase1经历了“生与灭”的进化模式。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结论\t\t\t\t\t首次深入开展非洲兽总目RNASE A分子进化研究,增加对该基因超家族的认识,为后续研究奠定了基础。\t\t\t\t     

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