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从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
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用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白(hTM)基因,将其克隆到带有人EF-1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上,得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS-1细胞中,hTM得到了瞬时表达,并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞(PEC),经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示,表达hTM的PEC凝血时间明显延长,表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法,得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明,该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。 相似文献
43.
小肽对奶牛乳蛋白合成的营养调控及机制探讨 总被引:2,自引:2,他引:0
蛋白质是维持动物正常生理功能及发挥其生产性能的一种重要营养素。随着动物营养研究的深入,小肽营养的理论与实践,已成为人们关注的热点。以小肽形式供给动物蛋白质营养时,可提高动物对蛋白质的利用率,增强动物免疫力和改善动物产品的品质,从而可更好的发挥动物的生产潜能(王恬等,2002)。 相似文献
44.
饲料调控剂在奶牛饲料中的作用 总被引:4,自引:0,他引:4
饲料调控剂在奶牛业中有着必不可少的作用。其主要是用来调节奶牛瘤胃的内环境,利用在奶牛瘤胃中的作用机理来改变瘤胃微生物等的生物活性,提高饲料利用率,增加产奶量,提高乳脂率等。 相似文献
45.
近年来,一龄草鱼种的培育成活率普遍较低,一般仅达40%~60%,而且规格也偏小,多数为10~13厘米,影响了养殖经济效益。那么,如何培育一龄草鱼种呢?笔者根据几年来的生产实践,现将一龄草鱼种培育应采取的主要措施简述如下,以供参考。一、鱼池彻底清塘消毒草鱼夏花下塘前25~30天应将池水基本排干,挖去过多的淤泥,清除塘底和四周杂草、异物,平整塘底,整修加固池坝,疏通灌排水道,然后用100~150千克/亩生石灰,或10~15千克/亩漂白粉化水后全池泼洒消毒,以彻底杀灭野生杂鱼、致病菌、寄生虫及其它有害… 相似文献
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48.
49.
维生素E对PSE肉质的营养调控研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
在动物生产日益规模化、集约化发展的今天,动物肉质愈来愈为人们重视。动物的高度培育造成现代动物品种适应外界环境的能力较差,抗应激能力较弱,容易引起肉的品质下降,影响其营养价值和食用价值,甚至出现劣质肉,主要表现为PSE肉。而肉质的新鲜度用消费者的感官判断和技术指标如肉色、吸水力、质地等来评定(VanderWal等,1997)。近几年,我国市场曾出现过PSE肉,有悖于人们生活水平不断提高对肉质要求越来越高的愿望,已引起有关专家的关注。随着营养学的发展,采用日粮中添加维生素E的方法,调控PSE肉质取得了很大进展,具… 相似文献
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