食用菌母种简易保藏四法

1．生理盐水保藏法 将菌种接入马铃薯培养液中，每250毫升三角形瓶装60毫升培养液，每天振荡或摇动5-10次，培养5—7天，然后将形成的菌丝球吸入装有5毫升无菌生理盐水的试管中，每管移入4个或5个菌丝球，塞上棉塞，     

小鼠超数排卵和小鼠胚胎体外培养的研究

本研究用PMSG与HCG对昆明白小白鼠进行超排。经t检验，PMSG与HCG注射时间间隔48h比50h排卵总数少（差异显著），但两种方法的获胚胎数差异不显著。同时，用处于5％CO2和空气中的TCM199－HCO3^-，M199－HEPES培育液在简易培养条件下对受精96h的小鼠胚胎进行体外培养48h。经卡方（x^2）检验，得出在5％CO2中的M199－HEPES培养液培养效果最好。     

苜蓿皂苷对山羊瘤胃体外培养液纤维降解酶活及纤维降解率的影响

苜蓿皂苷是从苜蓿中提取的特有生物活性物质，具有多种生理功能，如调节脂质代谢，降低胆同醇、促进免疫、抗菌消炎、抗氧化等，也有研究表明其对酶活性也有影响。有报道称苜蓿在反刍动物瘤胃中有较高的降解率，并能提高其发酵、降解的性能，还可改善瘤胃的内环境。苜蓿皂苷在反刍动物中的应用研究较少，近年来研究表明苜蓿皂苷可改变瘤胃微生物的种类和数量，进而影响瘤胃发酵。     

昆明小鼠胚胎收集时间和培养液对囊胚内细胞团集落分离培养的影响

本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法。以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4 d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团(ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况。结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61%为桑椹胚,需要经过4～5 d的体外培养才能形成ICM集落;妊娠4 d的扩张囊胚经过3～4 d的共培养后形成ICM集落;妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1～2 d的共培养即可形成ICM集落;ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显著高于妊娠4 d和3.5 d的胚胎(P<0.01),但妊娠4.5 d冲出孵化囊胚数量显著降低(P<0.01);小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液。因此,采集妊娠4 d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3～4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM。     

不同培养液对大菱鲆致病性纤毛虫——贪食迈阿密虫种群增长及复壮毒力的影响

从山东烟台地区某大菱鲆养殖场的患病大菱鲆体内分离出致病性纤毛虫——贪食迈阿密虫,筛选了4种盾纤毛虫常用体外培养液[大肠杆菌培养液(DH)、牛肉浸膏培养液(BEV)、米粒培养液(RV)、改良L-15培养液(L-15)],研究了不同培养基对纤毛虫种群增长及复壮毒力的影响.试验结果显示:在BEV和L-15两种培养液中,贪食迈...     

不同添加物质对猪卵母细胞体外成熟的影响

卵母细胞体外成熟(IVM)是胚胎工程的重要环节,在体外受精、体细胞核移植及转基因动物等多项操作的早期起决定性作用。IVM技术可有效回收利用屠宰家畜的卵巢,以解决哺乳动物胚胎工程中卵子来源不足的问题。目前,IVM技术已应用于牛、山羊、绵羊、猪等动物的繁殖技术中,并成功获得后代[1],     

奶牛卵丘细胞无血清体外培养液的优化

采集奶牛卵巢表面卵泡中的卵丘-卵母细胞复合物,通过胰蛋白酶消化获得卵丘细胞,分别利用对照组DMEM/F12培养液和4个试验组McCoy's5a培养液对卵丘细胞进行原代及传代培养.试验1组用McCoy's5a基础培养液,试验2组在McCoy's5a基础培养液中添加29 ng·mL-1的睾酮,试验3组同时添加29 ng·mL-1的睾酮和15μmol·L-1的绿茶多酚,试验4组在第3组基础上添加转铁蛋白(5 μg·mL-1)、硒(5 ng·mL-1)和胰岛素(10μg·mL-1),构建成优化培养液(Optimized McCoy's5a).结果表明,试验4组优化培养液所培养的卵丘细胞的形态和增殖规律符合正常细胞的一般规律,染色体核型正常,其细胞内SOD、GSH含量及冷冻解冻后的存活率均显著高于对照组,优化培养液可以代替含血清的DMEM/F12培养液用于奶牛卵丘细胞的体外培养.     

小鼠卵母细胞孤雌激活试验

应用两种激活方法(乙醇和离子霉素 6-DMAP)激活和三种培养液(CZB，KSOM，M199)对90只小鼠卵母细胞进行了孤雌激活研究。结果显示，离子霉素结合6-DMAP的激活效果高于乙醇；三种培养液中，以CZB激活效果较为理想。在随后的卵母细胞发育率方面，CZB、KSOM和M199三者之间的差异极为明显，以CZB最高，KSOM次之，M199的发育率最低。     

培养液及血清浓度对山羊孤雌胚胎体外培养的影响

试验比较了在SOFaa，CRlaa，mCRlaa3种培养液中添加不同浓度的成年山羊血清(NGS)对山羊孤雌胚胎进行体外培养的效果。结果表明：在3种培养液中，添加10％的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好，囊胚率分别可达62．79％(81／129)、53．52%(38／71)、13．64％(12／88)；mCRlaa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CRlaa组，SOFaa组优于CRlaa组．但SOFaa组和CRlaa组间无显著差异。在现有试验条件下，以在SOFaa培养液中．山羊孤雌胚胎的体外培养的第72小时时加入10％的NGS的发育效果较好，囊胚率可达62．79％。     

pH值对猪卵母细胞体外成熟培养的影响

通过用不同pH值的培养观察分析对猪卵母细胞体外成熟培养的影响。结果表明：猪卵母细胞在培养液pH值低于6．5时几乎全部死亡，而pH值达到8，9时死亡率仅为31.7％，经分析，猪卵母细胞对碱性条件的耐受能力比对酸性条件的耐受能力要强。