丝瓜子叶原生质体培养研究

经1%纤维素酶、0.5%离析酶、3mmol/L MES 和0.25mol/L 甘露醇的CPW 酶液酶离出的丝瓜子叶原生质体,在去NH_4NO_3的KM_(8p)附加0.5mg/L 2、4-D、lmg/L BA、125mg/L 水解酪蛋白(CH)、0.15～0.20mol/L 葡萄糖和0.05mol/L 蔗糖的培养基上培养出微愈伤组织,再经MS附加多种成分的培养基培育,增殖出大量松散粒状、表面光滑的多种形态愈伤组织,并分化出根。     

苎麻脱胶菌株的原生质体紫外线诱变育种及应用

为实现苎麻的生物脱胶,本研究对苎麻脱胶菌株HY11原生质体进行紫外诱变筛选,以诱变菌株的果胶酶活性为筛选指标,筛选出脱胶菌株HY11-73,并对该菌株进行形态观察及脱胶试验.结果表明,菌株HY11-73果胶酶产量高于出发菌HY11 123.3%,生长速度提高了42.86%;诱变菌HY11-73对苎麻具有较好的脱胶效果,3 d可以完成脱胶,苎麻的失重率为34.04%;脱胶后纤维的化学成分分析结果表明,诱变菌HY11-73除水溶物含量外其余指标均优于出发菌HY11.     

金钗石斛类原球茎原生质体的分离

以具有较多生长点的金钗石斛PLBs为材料,研究通过酶解法获得原生质体的适宜条件。结果表明,酶液配比为φ=1%纤维素酶（Cellulase Onozuka R10）＋φ=0.4%果胶酶（Macerozyme Onozuka R10）＋0.65mol·L-1甘露醇,pH5.7;黑暗条件下,（25±2）℃,60r.min-1振荡酶解6h,800r.min-1离心分离4min,获得的原生质体质量较好。经计数和伊凡蓝染色法检测,用此法获得的金钗石斛PLBs原生质体鲜质量产量为（8.25±0.17）×105个.g-1,活性为（90.24±1.84）。（蓝光（470～75nm）激发活力检测发现较小的分生细胞具有较强的活力。     

石斛兰叶片原生质体分离条件研究

[目的]探讨了石斛兰原生质体分离过程中的影响因素,建立最佳的原生质体制备体系。[方法]以石斛兰叶片为材料,采用正交设计研究纤维素酶浓度、酶解时间、温度、pH值以及甘露醇浓度对石斛兰原生质体分离的影响。[结果]以3%纤维素酶R-10＋0.6%果胶酶Y-23为混合酶液,0.5mol/L甘露醇为渗透压稳定剂,在26℃的黑暗条件下,pH值为5.4的酶液组合中,黑暗条件下振荡,酶解15h,获得的原生质体产量最高。[结论]该制备体系为后续原生质体培养和体细胞杂交奠定良好的基础。     

不同酶解条件对普通红豆草子叶原生质体分离的影响

以普通红豆草子叶为材料,研究了预处理、酶液组合和渗透压浓度等因子对其原生质体分离效果的影响。结果表明,子叶在含有0．70mol／L甘露醇的CPW溶液中预处理60min,获得的原生质体产量、存活率均高于其他预处理;酶液组合为1．0％纤维素酶＋0．8％果胶酶＋0．5％离析酶,25℃黑暗条件下酶解6h可获得大量有较高活力的原生质体;酶解液中添加浓度为0．55mol／L的甘露醇较适合原生质体分离。     

黑龙江省传统家酿葡萄酒质量探析

为了解传统家酿葡萄酒的产品质量,收集并测定了22份家酿葡萄酒的理化指标和卫生指标。结果表明,仅11份样品的酒精度达标,达标率为50%;18份样品残余总糖含量小于4.0g/L,属于干型葡萄酒;18份样品总酸含量超标(大于5.0 g/L);4份样品的挥发酸含量超标(大于1.05 g/L);8份样品甲醇含量超标(大于0.04 g/100 mL);样品的菌落总数和大肠菌群数各有5份超过我国发酵酒的卫生标准。综合分析22份样品的质量,仅6份样品完全符合国家标准,样品不合格率高达72.7%。因此,传统家酿葡萄酒的制作和饮用应引起关注。     

甘蔗和烟草幼叶原生质体分离前后的膜透性与脯氨酸含量的变化

甘蔗和烟草等幼叶经细胞壁降解酶水解细胞壁所获新鲜的原生质体的电解质外渗率和脯氨酸含量均有所提高，其中以野生蔗斑茅原生质体电解质外渗率最高，甘蔗原生质体的次之，烟草原生质体的最少；甘蔗原生质体的脯氨酸增量最高，斑茅原生质体的次之，烟草原生质体的最低。表明烟草原生质体受损程度低于甘蔗和斑芽等原生质体。     

黑木耳原生质体制备、再生及单核体荧光鉴定

利用正交试验研究了黑木耳原生质体制备、再生的最佳条件,结果表明,原生质体制备最佳条件是酶解温度31℃、酶浓度1．0％、菌龄5d、酶解时间4h,原生质体再生的最佳条件是酶解温度27℃、酶解时间4h、酶浓度1．5％、菌龄11d。稳渗剂种类对黑木耳原生质体再生率的试验结果表明,采用0．5mol／L蔗糖为稳渗剂,各黑木耳菌株的原生质体再生率最高。HW2号菌株原生质体经核染色其单核化比率最高;在荧光显微镜下观察菌丝核相,单、双核清晰可辨。     

水稻胚性悬浮细胞系建立的细胞学研究

胚性悬浮细胞是禾谷类作物原生质体培养的理想材料。本文研究了水稻广亲和中粳品系02428胚性悬浮细胞系建立过程中的细胞学动态变化,结果表明:建成的胚性悬浮细胞系(后期悬浮细胞系)和前、中期悬浮细胞系相比较,细胞团内细胞结合紧凑,细胞壁簿,细胞质浓厚,颗粒状内含物丰富,细胞活力强,质膜凹陷较浅,较平整,质膜强度高。本研究结果从细胞学角度初步探讨了水稻胚性悬浮细胞系适应于原生质体培养的机理。