油菜原生质体培养研究进展

从原生质体的分离纯化、原生质体培养基成分、原生质体培养方法及原生质体应用前景等方面介绍了油菜原生质体培养近１０年的研究进展，并提出了存在的问题。     

原生质体技术与观赏植物育种

原生质体培养和植株再生技术在观赏植物育种中起重要作用。原生质体的来源、原生质体的分离、培养基的成分、培养方法等,都对原生质体的培养有重要影响。近年来,观赏植物原生质体在细胞融合、遗传转化上有了一定发展,为创造观赏植物新种质提供了新途径和方法。     

提高枇杷原生质体芽苗生根率的研究

一定质量浓度的吲哚丁酸（ＩＢＡ）和处理方法是诱导枇杷原生质体起源的芽苗生根的主要因素。不同ＩＢＡ质量浓度显著影响根的生成，２－４ｍｇ·Ｌ＾－１ＩＢＡ是诱导芽苗生根的有效质量浓度，其中４ｍｇ·Ｌ＾－１ＩＢＡ是诱导枇杷原生质体芽苗生根的最佳浓度，生根率达８０．５％。４ｍｇ·Ｌ＾－ＩＢＡ培养１０－１５ｄ后，转入１ｍｇ·Ｌ＾－ＩＢＡ培养，生根率进一步提高至９０％。芽苗折断培养，断口截面５０％斜插入４ｍｇ·     

南阳酵母原生质体制备与再生条件研究

研究南阳酵母原生质体形成与再生的最佳条件。获取原生质体采用酶法,再生采用双层高渗平板法,因素重要性分析采用正交试验。结果表明:菌龄10h,以2.0%蜗牛酶加0.5%纤维素酶的混合酶液进行酶解破壁,酶解温度30℃,酶解时间2.5h,以0.6mol.L-1蔗糖做再生培养基的渗透压稳定剂,原生质体形成率91.40%,再生率10.56%。不进行预处理,在试验条件下,对南阳酵母原生质体形成与再生影响因素依次为:菌龄>酶解时间>酶浓度>渗稳剂。     

用同步辐射X-射线荧光分析法研究感病烟草单细胞内微量元素变化

用同步辐射X－射线荧光分析（SRXFA）技术分析植物单细胞的微量元素，研究病毒侵染植物后植物单原生质体内微量元素的相对变化。用果胶酶和纤维素酶分离烟草叶肉细胞原生质体，经3％戊二醛固定30min后，置于杜乐膜上，干燥后用同步辐射X－射线荧光法分析。X－射线流强大于80mA时，停留取谱时间20min,可从烟草单个原生质体中检测到Cl,Ca,Mn,Fe,Cu,Zn,Cr,Co,Ni,As,Ti和Ge。流强低于80mA时，只可检出Cl,Ca,Fe,Cu,Ti和Ge。结果表明烟草被烟草花叶病毒感染后，Ca,Fe离子的强度下降，Cl,Cu,Ge离子变化不显著。其他离子因响应值过低无法比较。     

香菇细胞融合育种的预备研究——原生质体制备与再生

探讨了在森林资源综合利用中具重要意义的木腐性食用菌香菇(Lentinus edodes)的原生质体制备及再生条件。对用MYG培养的菌丝,采用以0.6mol甘露醇为稳渗剂的1.5％溶壁酶Lywallzyme进行酶解脱壁,在菌龄7d、酶解液pH值4.5、温度28℃、酶解4h时原生质体产量最高(6×10~6/ml,每0.1g鲜菌丝)。酶解温度>31℃时原生质体产量和再生率都明显降低。用SO培养基代替MYG可使原生质体产量提高1倍,但再生率显著下降(从8.5％下降到1.1％)。从产量和再生率两方面综合考虑,以MYG作为菌丝培养基效果较好。     

龙眼荔枝属间原生质体电融合

由龙眼的幼胚培养诱导、筛选出松散型胚性愈伤组织 ,由之建立了胚性悬浮细胞系 ;用同样的方法建立了荔枝的松散型胚性愈伤组织系 .龙眼的胚性悬浮细胞和荔枝的胚性愈伤组织在含纤维素酶和果胶酶各 10 .0g· L-1的 CPW- 13M的酶解液中酶解 ,经纯化后可得到较为纯净的原生质体 .采用电融合方法进行两种原生质体融合处理 ,获得了适宜的融合参数 ,融合率达 2 0 %以上 .融合产物经初步培养 ,形成了多细胞团     

玫红穗状霉原生质体形成条件的研究

研究了菌龄、酶的配比、酶解时间及渗透压稳定剂等多种因素对玫红穗状霉Spicellum roseum原生质体形成的影响.结果表明,制备玫红穗状霉原生质体的最佳条件为:菌龄30 h,用10 mg/mL纤维素酶+10 mg/mL蜗牛酶+5 mg/mL壁酶的混合液酶解,以0.7 mol/L的KCl作渗透压稳定剂,30℃酶解3 ...     

疣粒野生稻原生质体再生小植株

 以我国特有的疣粒野生稻成熟胚和幼穗作外植体诱导愈伤组织 ,挑选致密颗粒状愈伤组织建立胚性细胞悬浮系并分离原生质体 ,将原生质体固体包埋后添加液体培养基进行培养。在培养过程中调节培养体系渗透压诱导产生胚状体 ,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株 ,对提高原生质体再生频率的途径进行了探讨。