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为拓宽十字花科蔬菜育种种质资源,以大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)、青花菜(B. oleracea L. var. varitalica)和叶用芥菜(B. juncea L. Czern)的子叶、下胚轴为材料,分离、纯化原生质体,采用40% 聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)融合法进行原生质体融合。融合细胞在附加0.2 mg · L-1 2,4-D + 0.5 mg · L-1 6-BA + 0.1 mg · L-1 NAA + 0.1 mg · L-1 激动素(kinetin)的改良K8p培养基中液体培养,当细胞分裂至8 ~ 10细胞期时,将分裂的细胞包埋于0.15%琼脂糖,然后在添加0.3 mol · L-1蔗糖和2 mg · L-1 6-BA + 2 mg · L-1 玉米素(zeatin)+ 1 mg · L-1 NAA + 0.5 mg · L-1 kinetin的Kao培养基中诱导愈伤组织。将培养获得的936个愈伤组织转到3种不定芽诱导培养基MS + 5 mg ? L-1 zeatin + 2 mg · L-1 IAA;MS + 2 mg · L-1 zeatin + 2 mg · L-1 IAA;MS + 0.5 mg · L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 NAA上诱导芽分化,当芽长3 cm左右时,转到1/2 MS + 0.2 mg · L-1 NAA的生根培养基上诱导生根,共获得了96株再生植株,对其进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。形态学观察显示再生植株表型变化大,包括3个亲本的中间型或两个亲本的中间型;PCR技术鉴定结果显示96株杂种植株中93株为细胞质雄性不育特性;染色体计数显示,再生的植株染色体数变化范围广(2n = 38 ~ 64),但未发现染色体数总和与3种融合亲本染色体数总数(2n = 74)相一致的个体。基因组原位杂交(Genomic in situ hybridization,GISH)和扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)分析结果表明,再生植株基因组中分别检测出大白菜、青花菜、叶用芥菜的DNA片段,证实了大白菜、青花菜、叶用芥菜种间体细胞杂交种的真实性。 相似文献
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陇东野生紫花苜蓿愈伤组织原生质体游离条件的筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
以陇东野生紫花苜蓿子叶诱导的愈伤组织为材料,研究了酶解时间、酶液组合、酶液中甘露醇浓度、预处理措施及愈伤组织继代培养时间对其原生质体游离效果的影响.结果表明:当酶解时间为10h、酶液组合为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%离析酶+0.3%半纤维素酶+0.3%崩溃酶、甘露醇浓度为0.60mol/L、预处理措施为CPW-10溶液中浸泡1h、愈伤继代培养天数为12~14d时,游离出的原生质体产量最高,可达19.5×105个/g,存活率高达89.7%. 相似文献
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食用菌能将农作物秸秆等下脚废料进行分解,转化为人类所需要的蛋白质,是解决人类面临的食物资源短缺、环境污染,实现可持续发展的有效途径。食用菌低脂肪、高蛋白,富含多种游离氨基酸和微量元素,是纯天然的绿色食品、保健食品和未来食品。评述了食用菌领域原生质体技术的研究应用情况、存在问题和发展前景。 相似文献
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食用菌原生质体研究的发展史 总被引:13,自引:2,他引:11
食用菌原生质体研究的发展史赵永昌,张树庭(云南农业科学院生物技术研究所昆明660223)(香港中文大学生物系)1原生质体(Protoplast)的定义在100年前,已有用机械方法分离植物原生质体的报道(afklercker1892;Rechinger... 相似文献
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微生物原生质体融合方法的综述 总被引:3,自引:0,他引:3
原生质体融合在遗传育种中具有广阔的应用前景,本文就原生质体融合的物理和化学方法作了综述,将PEG诱导融合法、电融合和激光诱导融合法的机理、过程和优缺点进行了比较,为选择适宜有效的诱导融合方法提供了依据. 相似文献
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