双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

[目的]研究建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）双重一步法RT—PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT—PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946bp扩增产物务带;且双重一步法RT—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两务与单一RT—PCR产物相对应的清晰务带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85％以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。     

小西葫芦黄花叶病毒研究进展

小西葫芦黄花叶病毒病是瓜类作物的一种严重病害。本文对小西葫芦黄花叶病毒的分类、结构特点、生物学特性及其病毒载体的研究现状进行综述,以期为其防治提供参考。     

用烟草生产基因工程药物的研究进展

以植物为生物反应器生产基因工程药物具有广阔的前景，其主要研究途径有两方面。一是利用转基因植物表达外源基因生产基因工程药物；二是以病毒为栽体插入外源基因在宿主植物中表达基因生产基因工程药物。以烟草花叶病毒(TMV)作为载体，用烟草生产基因工程药物是当前生物技术研究开发的热点；目前已成功地利用烟草作为生物反应器生产出许多基因工程药物和细胞因子。本文综述了这方面的技术途径和最新研究进展。     

黑龙江省大豆SMV的采集与分布研究

根据2002年和2003年在黑龙江省各市县地区所采集的大豆花叶病毒病(SMV)样品所表现的症状,利用MVSP3.1.2版本的软件分别对其进行聚类分析,研究大豆花叶病毒在黑龙江省各市县地区的症状表现规律以及分布规律.聚类结果表明:黑龙江省的各地区SMv表现的主要症状为皱缩型,其次为黄化型的,只有极少数表现为畸形.在2003年的223份样品中有一半的样品表现为皱缩,在2002年的126份样品中有80%的样品表现为皱缩.这些说明黑龙江省的大豆花叶病毒主要以1号株系为主.为进一步研究黑龙江省各地区的发病情况,将黑龙江省划分为东、西、南、北四大块.分别对各部分的病毒样品的症状进行聚类分析,结果表明:各地区也基本以皱缩型SMV为主,大致规律与黑龙江省的整体发病规律相吻合.     

杂交玉米制种栽培要点

<正>一、跨地区引种同一玉米品种,在海拔相近的条件下,南种北引,生育期延长,株高和穗位升高,叶片数增多;北种南引,则会缩短生育期,降低株高和穗位。在引种时,要充分考虑两地区间影响作物生长的主要气候因素,为保证作物品种相互引种成功的可能性,要先试种,再大面积推广。     

缺失GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的克隆及植物表达载体构建

以CMV亚组1株系Fny-CMV RNA2基因组为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到2.5 kb的全长复制酶基因扩增产物.对此产物进行纯化,并用NcoI和BspHI进行双酶切,得到3个片段,将不含有GDD保守区的2个片段用T4 DNA连接酶连接,并对连接产物进行PCR扩增,得到2.2kb左右缺失GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的扩增产物.将其克隆到pGEM-T Easy Vector上,进行序列测定,结果表明GDD保守区确已缺失.该缺失不导致开放阅读框架的移码将缺失GID保守区的基因定向克隆到植物表达载体pBI121中,并经三亲交配导入根癌农杆菌中,经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入.     

用同步辐射X-射线荧光分析法研究感病烟草单细胞内微量元素变化

用同步辐射X－射线荧光分析（SRXFA）技术分析植物单细胞的微量元素，研究病毒侵染植物后植物单原生质体内微量元素的相对变化。用果胶酶和纤维素酶分离烟草叶肉细胞原生质体，经3％戊二醛固定30min后，置于杜乐膜上，干燥后用同步辐射X－射线荧光法分析。X－射线流强大于80mA时，停留取谱时间20min,可从烟草单个原生质体中检测到Cl,Ca,Mn,Fe,Cu,Zn,Cr,Co,Ni,As,Ti和Ge。流强低于80mA时，只可检出Cl,Ca,Fe,Cu,Ti和Ge。结果表明烟草被烟草花叶病毒感染后，Ca,Fe离子的强度下降，Cl,Cu,Ge离子变化不显著。其他离子因响应值过低无法比较。     

玉米矮花叶病抗源筛选和抗病育种策略

病圃鉴定结合接种鉴定和苗期叶片的ELISH检测结果表明，87份接种材料中筛选出了4份高抗材料，24份抗病材料，26份中抗材料；46份病圃鉴定材料中筛选出9份高抗材料，21份抗病材料，4份中抗材料；5份苗期ELISH检测的材料中鉴定出2份抗病材料，结合血缘追踪发现，热带、亚热带种质以及美国先锋海外种子公司育成的玉米杂交种78599，87001和78698等衍生系中蕴涵着抗病基因，在抗源筛选的基础上提出了抗病与高产结合的育种策略。