体外25℃家蚕卵酯酶A4的ATP酶活性变化及其与滞育性的关系

从家蚕卵纯化出EA4酶蛋白 ,调查了温度对EA4的ATP酶最高活性和其出现时间的影响以及与蚕卵滞育性的关系。EA4的酶活性反应温度为 2 5℃时比 5℃时提高约 1 0倍。从滞育性卵和盐酸处理卵纯化EA4 ,或者用EA4的活性抑制多肽 (PIN)体外处理酶蛋白质 ,2 5℃中EA4的最高活性出现时间比 5℃中显著提早。随纯化时卵龄或PIN处理时间的改变 ,2 5、5℃中EA4的最高活性出现时间以及与蚕卵 5℃冷藏时滞育发育时间有相同趋势的变化。体外 2 5℃和体外 5℃一样 ,EA4的最高活性出现时间与蚕卵的滞育发育有密切的关系     

斑蝥素对菜蛾消化酶及酯酶的影响

测定斑蟊素饲喂对菜蛾Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ Ｌ．幼虫体主要消化酶和酯酶的影响。结果表明,斑蝥素处理后试虫的主要消化酶类平均活性变化不大,与对照组相比,蛋白酶、脂肪酶平均活性分别被抑制了８．７１％和１５．６９％,ａ－淀粉酶活性较对照组增加了６．７５％,均未达到显著差异水平;酯酶中的磷酸酯酶活性平均降低２５．３３％,未达显著差异水平,乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活性显著提高,３６ｈ内平均比活     

乙酰胆碱酯酶的晶体结构及功能位点

乙酰胆碱酯酶晶体结构研究表明 ,ACh E存在一个深而窄的谷 ,谷底部有一个活性位点 ,它是由催化三联体和所谓的阴离子亚位点组成。阴离子亚位点识别底物的四价铵基团 ;由 Glu32 7、His4 4 0和 Ser2 0 0构成的催化三联体负责底物乙酰胆碱的水解。在谷的入口处 ,有一个调节位点被称为外周阴离子位点 ,残基 Trp84和 Trp2 79分别在催化和外周的阴离子位点起关键作用。朝着谷底部方向存在一个强的静电偶极子 ,该偶极子对阳离子产物胆碱的清除是非常不利的 ,并与酶的高催化效率形成明显对照。位于催化口袋底部的后门开放为产物释放提供了另一种途径 ,但对后门学说的争论仍然十分激烈。X-衍射晶体学与化学修饰研究有助于阐明配基结合活性中心谷特异性的分子基础。位点特异性突变分析在确定氨基酸残基参与乙酰胆碱酯酶空间结构或催化功能中起着非常重要的作用。     

微量滴度酶标板法测定棉蚜(Aphis gossypii Glover)酯酶特性与有机磷抗性的关系

通过生物测定表明高密棉蚜对有机磷的抗性高于北京棉蚜,用紫外分光光度计比色法(A法)及微量滴度酶标板法(B法 )测定高密棉蚜及北京棉蚜的α-乙酸萘酯酯酶活力和α-乙酸萘酯酯酶动力学。北京棉蚜和高密棉蚜的α- NA酯酶活力分别为 2.23、4.48(A法 )和1.13、3.30(B法)μmol·mg-1pro.·min-1,高密、北京棉蚜的酶活之比为 2 .00(A法 )、2 .92(B法) ;北京棉蚜、高密棉蚜的Km值分别为:6.06×10-5、7.51× 10-5(A法 )和 7.66×10-5、8.87×10-5 (B法) mol·L-1,Vmax值为2.53、5.82(A法)和1.28、3.61(B法)μmol·mg-1·min-1。比较紫外分光光度计比色法及微量滴度酶标板法的测定结果,表明微量滴度酶标板法的测定结果是可靠的。     

靶标酶在研究杀虫活性构效关系中的应用

运用已建立的乙酰胆碱酯酶(AChE) 活力分析规范化筛选模型, 研究N-甲基取代苯基氨基甲酸酯类化合物和含硅氨基甲酸酯类新系列化合物与AChE 酶抑制中量( I50)构效关系的规律, 并以CA SAR 软件进行Q SAR 分析, 所得结果迅速反馈给化学合成, 为高效低毒新杀虫剂的创制提供有益的信息和科学依据。     

苏铁白、绿苗可溶性蛋白质及若干同工酶分析

采用聚丙酰胺凝胶垂直平板电泳技术,对苏铁绿苗和白化苗进行可溶性蛋白质及若干同工酶区带分析,发现正常绿苗可溶性蛋白质有１３条区带,比白化苗多２条;过氧化物酶同工酶谱带有６条,比白化苗少１条;酯酶同工酶带１５条,比白化苗多１条．以上结果表明：可溶性蛋白质区带、过氧化酶及酯酶同工酶谱带与苏铁白化苗的性状表达有密切相关．     

萝卜酯酶同工酶与品种亲缘关系的研究

为给萝卜杂交育种提供依据,采用酯酶同工酶酶带分析和数值分类学方法,研究了中国１９个省（市）的７７个栽培萝卜品种及日本的３个栽培萝卜品种的同工酶及亲椽关系,结果表明,供试的栽培萝卜可分为三大品种群,即红萝卜品种群,白色,绿／白萝卜品种群,绿萝卜品种群,各品种群之间亲缘关系较远,杂种优势较强。     

玉米酯酶同工酶遗传距离与杂种优势的关系

对３６个优良玉米自交系组配的３００个杂交种的酯酶同工酶酶谱分析发现：互补酶带,杂种酶带的出现与否,不能准确预测杂种产量的高低;双亲酯酶同工酶的差异在一定程度上能反映杂种优势的大小。     

5个枣品种叶片过氧化物酶与酯酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对江苏省目前主栽的5个枣品种叶片的过氧化物酶与酯酶同工酶的酶谱进行分析,并通过聚类分析法对其亲缘关系进行研究.结果表明：（1）9月测定枣树叶片的过氧化物酶与酯酶,其谱型稳定,重复性好;（2）5个供试枣品种的过氧化物酶共显现3种谱型,5条酶带,酯酶共显现4种谱型,14条酶带;（3）聚类分析结果表明,冬枣是较其他4个枣品种亲缘关系最远的品种,泗洪沙枣与蜂蜜罐的亲缘关系最近,蚂蚁枣与泗洪大枣介于冬枣与蜂蜜罐之间, 泗洪大枣与泗洪沙枣的亲缘关系较远,是2个不同的枣品种.     

毒死蜱和三唑磷对斑马鱼头部AChE活性影响及在鱼体内的富集

采用半静态法,测定了在96 h-LC50的1/10、1/20、1/40及1/80作用剂量下慢性暴露,毒死蜱和三唑磷对斑马鱼头部乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的抑制及两种农药在鱼体的富集作用,并研究解除30 d后酶活性的恢复.结果表明,随暴露剂量增大、暴露时间延长,农药对AChE活性抑制越强.在96 h-LC50的1/10作用剂量下连续暴露30 d,毒死蜱和三唑磷处理组斑马鱼头部AChE活性分别为对照的42.25%和31.80%.毒死蜱不同剂量处理组酶活性在解除药剂后30 d均可恢复到对照的90%以上,而三唑磷高剂量处理组(96 h-LC50的1/10和1/20)分别只有对照的74.91%和71.46%.毒死蜱极容易在鱼体富集,慢性暴露30 d富集系数达260.91～1 320.03 L·kg-1,而三唑磷仅为8.23～26.84 L·kg-1.