葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究

将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达,但检测到的最终产物不是白藜芦醇,而是白藜芦醇苷(亦称云杉新苷),最高检出量达到了10.26μg/g,是野生型对照的1 000倍,推测这是在生成白藜芦醇的基础上,水稻内源的糖基转移酶作用的结果。虽然经抗病检测发现转基因植株并没有对稻瘟病菌表现出明显抗性,但是高含量的云杉新苷转基因家系可以作为提升水稻潜在营养价值的材料进行使用。     

提高白藜芦醇含量的桑椹酒酿制方法

为了检测额外添加桑椹果皮、3种不同酵母、发酵温度和发酵时间对于桑椹酒酒中白藜芦醇含量的影响,以湖州市安吉县的大10果桑为原料,进行桑椹酒发酵。采用高效液相色谱（HPLC）对桑椹酒中白藜芦醇进行了检测分析。结果表明：发酵到第4 d,处理A、B、C-1、C-2、C-3和CK发酵液中白藜芦醇含量分别为2.5、3.9、4.3、4.5、4.5和2.7 mg/L;发酵时间从0 h至第96 h,白藜芦醇含量逐渐升高,到96 h时为最高;在26～32℃条件下发酵时,白藜芦醇含量均比较理想,但以28℃比较适宜。酵母对白藜芦醇含量的影响不太有规律。     

Effects of resveratrol on the insulin signaling pathway of obese mice

The present study was conducted to investigate the effects of resveratrol on the insulin signaling pathway in the liver of obese mice. To accomplish this, we administered resveratrol to high fat diet-induced obese mice and examined the levels of protein phosphorylation in the liver using an antibody array. The phosphorylation levels of 10 proteins were decreased in the high fat diet and resveratrol (HFR) fed group relative to the levels in the high fat diet (HF) fed group. In contrast, the phosphorylation levels of more than 20 proteins were increased in the HFR group when compared with the levels of proteins in the HF group. Specifically, the phosphorylation levels of Akt (The308, Tyr326, Ser473) were restored to normal by resveratrol when compared with the levels in the HF group. In addition, the phosphorylation levels of IRS-1 (Ser636/Ser639), PI-3K p85-subunit α/γ(Tyr467/Tyr199), PDK1 (Ser241), GSK-3α (S21) and GSK-3 (Ser9), which are involved in the insulin signaling pathway, were decreased in the HF group, whereas the levels were restored to normal in the HFR group. Overall, the results show that resveratrol restores the phosphorylation levels of proteins involved in the insulin signaling pathway, which were decreased by a high fat diet.     

转PcRS基因拟南芥植株表型分析

为了研究虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)白藜芦醇合酶基因PcRS的功能,以转PcRS基因拟南芥为材料,对其进行分子鉴定和表型研究.利用Southern blot和Northern blot验证了外源PcRS基因在转基因拟南芥基因组中的整合和表达.对经过选育得到的T3代纯合株系(L4、L6、L15)进行性状观察.在体视显微镜下观察野生型和转基因拟南芥植株表型;采用分光光度法测定低氮培养基上的子叶花青素含量.结果显示,与野生型拟南芥相比,转基因拟南芥的种皮颜色发生改变呈浅黄褐色,并且子叶中花青素含量显著减少.这表明PcRS基因可能导致转基因拟南芥的黄酮类物质合成受阻.     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇形成初探

将虎杖Polygonum cuspidatum不同外植体经不同消毒时间处理后，接种在添加不同激素种类和水平的相同基本培养基上或相同激素种类和水平基本培养基上进行诱导实验，同时对根和根茎芽、叶、韧皮诱导的愈伤组织进行白藜芦醇含量的测定，结果表明，基本培养基以MS较好，外植体叶对激素种类较为敏感，其中适当浓度的NAA诱导愈伤组织比2，4-D的效果好，KT比BA好，添加KT的培养基上诱导愈伤组织比较紧密，有利于分化，在MS＋NAA2mg／L＋KT0．1mg／L培养基上诱导愈伤组织较好，根茎芽的诱导率最高，为73％；愈伤组织的生长趋势从接种的第3天开始生长，到21d时生长达到最高峰，干质量为0．4612g，以后生长速度减慢，对不同材料诱导的愈伤组织进行白藜芦醇含量的测定，其中根茎部芽的诱导的愈伤组织中白藜芦醇含量最高，其次是叶和根，最低的为韧皮。     

花生芽白藜芦醇大孔树脂纯化工艺及抑菌功效

为分离纯化花生芽中具有潜在抑菌活性的白藜芦醇化合物及研究其抑菌功效,提高花生的综合利用价值。该研究通过静态吸附-解吸试验,从16种不同型号大孔树脂中确定白藜芦醇较佳纯化树脂,并对其动态吸附-解吸条件优化,采用倍比稀释法、抑菌生长曲线及细胞膜通透性变化评价纯化物对鼠伤寒沙门氏菌的抑制作用。结果表明：LSA-40大孔树脂为花生芽白藜芦醇较佳纯化树脂,其吸附条件为：上样浓度120.00 μg/mL,速率1.00 mL/min,pH值4.2,上样量8.00 mL/g;解吸条件为：80%乙醇溶液,pH值6.6,流速1.00 mL/min,白藜芦醇纯度可达84.0%;利用紫外光谱、傅里叶红外光谱、超高效液相色谱串联质谱对纯化后样品进行鉴定分析,发现纯化物中主要成分为白藜芦醇及其衍生物;纯化物对鼠伤寒沙门氏菌抑制作用结果表明其最小抑菌浓度为250 μg/mL,在此浓度下可显著增加细胞膜通透性（P<0.01）,破坏细胞壁完整性,造成胞内蛋白质严重泄露,最终导致鼠伤寒沙门氏菌死亡。该研究可为花生资源综合深度利用及天然抑菌剂的开发提供一定理论参考。     

葡萄叶提取物对葡萄霜霉病的防治作用及有效成分分析

为探究葡萄叶提取物对葡萄霜霉病的防治作用,测定了葡萄叶提取物及其有效物质对葡萄生单轴霉Plasmopara viticola孢子囊和游动孢子的抑制作用以及对葡萄霜霉病的防治效果,观察了其对葡萄生单轴霉在叶片中扩展、产生孢子囊能力的影响,并对葡萄叶提取物组成成分进行了分析。结果表明,葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉孢子囊的形成和萌发均有明显的抑制作用。当葡萄叶提取物浓度为10 mg/mL时,其对孢子囊形成的抑制率为82.4%,葡萄生单轴霉孢子囊和游动孢子的萌发率仅为7.6%和1.1%,均显著低于无菌水处理。荧光显微观察发现,葡萄叶提取物可以抑制葡萄生单轴霉在叶片内的扩展。当葡萄叶提取物浓度为10 mg/mL和50 mg/mL时,对葡萄霜霉病的室内防治效果分别为80.1%和100.0%;且浓度为10 mg/mL的葡萄叶提取物对葡萄霜霉病的田间预防效果为67.8%,与烯酰吗啉处理无显著差异。液质联用技术检测显示,葡萄叶提取物中含有白藜芦醇和紫檀芪,其对葡萄生单轴霉均有显著的抑制作用,且紫檀芪的抑制效果强于白藜芦醇。     

新型白藜芦醇类衍生物的合成研究

以没食子酸为原料, 通过甲基化、还原、溴代、Arbuzov重排、Wittig-Horner反应、O - 异戊烯基或O - 法尼烯基化等反应步骤,以总收率30%～35%合成了6种未见文献报道的新型的白藜芦醇类衍生物1a,1b,2a～2d. 所合成的化合物已通过MS,1HNMR和IR等波谱方法进行了结构确证. 该合成方法具有反应条件温和、后处理方便、产率较高和立体选择性强的优点.     

花生白藜芦醇和查尔酮合成酶基因的鉴定与表达分析

花生含有丰富的白藜芦醇，具有很好的营养价值和保健功能。白藜芦醇合酶（STS）是白藜芦醇合成途径中的关键酶。本研究运用生物信息学方法，从花生基因组数据中鉴定出了50个STS基因，17个编码查尔酮合成酶CHS基因；两者同属聚酮化合物合成酶家族。对所鉴定基因组家族成员的染色体定位、系统发育、外显子-内含子结构、基因表达模式分析，结果表明大量STS基因在根、种皮、果皮、果针中高量表达，45个STS和8个CHS基因均应答紫外胁迫。本研究结果为花生STS/CHS基因家族成员的功能鉴定提供有价值的参考信息，为花生的品质改良提供理论依据与基因资源。