几种植物白藜芦醇合酶基因保守序列的克隆与分析

根据GenBank中登录的一些植物的白藜芦醇合酶基因(resveratrol synthase,RS)保守序列设计引物,采用PCR技术从葡萄科植物(蛇葡萄、三叶爬山虎、五叶爬山虎和云南爬山虎)、桑科植物(桑树)和豆科植物(花生)的幼嫩叶片中扩增出该基因的DNA片段。测序结果表明,片段长635 bp,6个片段均不含内含子,分别编码211个氨基酸,均包含白藜芦醇合酶基因的特异片段和芪合酶(stilbene synthase,STS)家族特异性信号序列。     

不同酿酒葡萄品种白藜芦醇合酶基因的克隆和序列分析

以红葡萄品种“赤霞珠”、“品丽珠”、“黑比诺”和白葡萄品种“雷司令”为试材,采用改良CTAB法提取葡萄叶片组织中的DNA,并扩增得到4个酿酒葡萄品种的白藜芦醇合酶基因部分片段.结果表明:红葡萄品种“赤霞珠”、“品丽珠”、“黑比诺”的扩增产物均为1 419 bp,白葡萄品种“雷司令”扩增产物为1 417 bp.通过序列多重比较分析,所得到的4个白藜芦醇基因片段与Genbank中河岸葡萄(AF128861)的该基因序列同源性较高(90％以上),外显子区同源性高于内含子;红色葡萄姊妹品种之间、红色葡萄不同品种之间、红色葡萄与白色葡萄品种之间的序列同源性依次递减.     

NaCl胁迫对葡萄愈伤组织中白藜芦醇含量及细胞膜保护酶活性的影响

以‘黑比诺’葡萄试管苗叶片诱导并继代1a的愈伤组织作为试验材料,接种后分别添加0、0.1、0.2、0.3、0.4mol·L-1的NaCl溶液,研究不同浓度NaCl对愈伤组织中白藜芦醇含量及细胞膜保护酶活性的影响.结果表明:随着NaCl浓度的升高,葡萄愈伤组织中白藜芦醇的含量逐渐升高,当NaCl浓度为0.3mol·L-1时白藜芦醇含量最高,达到80.76μg·g-1,此时SOD活性也达到最高,为53.7320U·g-1·min-1;较低浓度的NaCl有助于PPO与CAT活性的升高.偏相关分析结果表明,不同浓度NaCl处理下葡萄愈伤组织中白藜芦醇的含量均与CAT活性呈显著正相关,与SOD、PPO活性呈显著负相关;不同程度NaCl胁迫下,细胞膜保护酶间的相关性也出现相应变化.     

H2O2对葡萄离体叶片白藜芦醇的诱导作用

[目的]葡萄叶片白藜芦醇含量较虎杖根含量低,难以作为药用提取用途,研究采用诱导剂升高葡萄离体叶片中白藜芦醇的含量.[方法]实验采用H2O2对离体红地球葡萄叶片进行诱导,采用薄层及高效液相色谱法分析白藜芦醇的含量变化,并使用RT - PCR方法分析茋合酶基因(STS)的表达量变化.[结果]H2O2对离体叶片茋类物质具有显著的诱导作用,诱导白藜芦醇的积累呈现显著的量时依赖性;5;H2O2处理48 h后叶片白藜芦醇含量可提高15倍以上,鲜重达到263 μg/g.[结论]H2O2可以作为葡萄离体叶片白藜芦醇的有效诱导剂.     

白藜芦醇合酶基因表达载体构建及对马铃薯的遗传转化

利用从葡萄中克隆到的白藜芦醇合酶基因(Resveratrol Synthase,简称RS)构建了含有35S组成型启动子的植物表达载体P35s-2300-RS,应用农杆菌介导方法对马铃薯品种进行遗传转化.通过对抗性芽、生根、再生植株的筛选,得到5株再生小苗.经PCR、Southern检测证实,有3株为真正的转基因植株.     

同步荧光检测虎杖提取物中白藜芦醇含量的新方法

建立了一种同步荧光检测虎杖提取物中白藜芦醇含量的新方法,系统地研究了检测条件对白藜芦醇荧光强度的影响,以及实验的准确性、重现性、回收率。该方法的线性回归方程为y=18.90x+3.1298,荧光强度与浓度在0~1.68×10-5mol/L的范围内具有良好的线性关系,检出限为8.839×10-10mol/L。研究表明,该检测方法操作简便、可行、成本低,检测结果较为准确,能满足科研和工业生产的要求。     

Effects of dietary resveratrol supplementation during gestation and lactation of sows on milk composition of sows and fat metabolism of sucking piglets

The purpose of this article was to investigate the effects of dietary resveratrol supplementation during gestation and lactation of sows on the milk composition of sows and the fat metabolism of sucking piglets. Forty sows were allotted to two experimental treatment groups that included the following: (a) control sows (CON treatment, n = 20) fed with a corn–soybean meal control diet and (b) treatment sows (RES treatment, n = 20) fed with a control diet with addition of 300 mg/kg resveratrol. The results showed that the content of lactose in the colostrum was increased (p < 0.05) and the content of fat in 21‐day milk was increased (p < 0.05) by dietary resveratrol supplementation. In the RES treatment group, the concentrations of high‐density lipoprotein‐cholesterol (HDL‐C), low‐density lipoprotein‐cholesterol (LDL‐C), lipase activity and insulin (INS) in plasma of sucking piglets were increased (p < 0.05). In the adipose tissue, the enzyme activities of hormone‐sensitive lipase (HSL), acetyl‐CoA carboxylase (ACC) and lipoprotein lipase (LPL) increased significantly by RES treatment (p < 0.05), and the mRNA levels of acetyl coenzyme A‐alpha (ACCα), LPL, fatty acid transport protein (FATP1) and CCAAT–enhancer‐binding protein gene (C/EBPα) were higher in the RES treatment group (p < 0.05). In conclusion, resveratrol supplementation on gestational and lactating sows improved the content of lactose in the colostrum and the content of fat in milk at day 21 of lactation. In addition, resveratrol supplementation on sows increased HDL and LDL in the plasma of piglets. In piglet adipose tissue, the enzyme activity and mRNA level related to lipolysis, fatty acid uptake from circulating triacylglycerols and lipogenesis are partially improved by resveratrol supplementation on sows. These aspects affect fat metabolism in piglets.     

白藜芦醇对玉米赤霉烯酮致小鼠肝脏氧化损伤及炎症的保护作用

为探究白藜芦醇（RSV）对玉米赤霉烯酮（ZEA）中毒小鼠肝脏损伤是否具有保护作用,试验将40只清洁级雄性BALB/c小鼠随机分为5组：对照组（生理盐水）、ZEA组（40 mg/kg）、不同浓度的RSV （50、100或200 mg/kg）与ZEA （40 mg/kg）共处理组,每组8只,各组均灌胃给药,试验期12 d。试验结束后采集小鼠肝脏样品,计算肝脏系数,采用苏木素-伊红（HE）染色和免疫组织化学染色法观察各组肝脏病理变化;检测肝脏NF-κB蛋白表达;比色法检测肝脏组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）活性,ELISA法检测血清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-1β含量。结果显示,与对照组相比,ZEA组小鼠肝组织发生明显病理学变化;与ZEA组相比,不同浓度RSV与ZEA共处理组小鼠肝脏组织病理学变化都有所减轻。免疫组织化学结果显示,与对照组相比,ZEA组肝脏NF-κB蛋白表达增多;与ZEA组相比,不同浓度的RSV与ZEA共处理组肝脏NF-κB蛋白表达均有下降。与对照组相比,ZEA组肝脏系数和肝脏组织MDA含量极显著升高（P<0.01）,肝脏组织SOD和CAT活性显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）,血清中AST、ALT和LDH活性,IL-6、TNF-α和IL-1β含量均极显著升高（P<0.01）。与ZEA组相比,不同浓度RSV与ZEA共处理组肝脏组织CAT活性显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,血清中AST、ALT和LDH活性及IL-6和IL-1β含量显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）;50 mg/kg RSV与ZEA共处理组肝脏组织SOD活性和血清中TNF-α含量分别显著升高（P<0.05）和极显著降低（P<0.01）;100和200 mg/kg RSV与ZEA共处理组肝脏系数和肝脏组织MDA含量显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）。结果表明,ZEA对小鼠肝脏有严重的氧化及炎症损伤作用,RSV对ZEA中毒的肝损伤具有一定保护作用,尤其以100 mg/kg RSV保护效果最佳。     

白藜芦醇对畜禽常见肝损伤保护机制及应用的研究进展

近年来随着畜禽养殖的集约化与规模化的不断发展,畜禽容易遭受来自饲料发霉、抗生素滥用及肝炎病毒等因素产生的肝损伤。白藜芦醇是一种广泛存在于多种植物中的天然植物提取物,属于多酚类物质,在食品科学和医学领域中可以改善肝脏疾病造成的肝损伤。同时,白藜芦醇可以有效保护畜禽肝脏,缓解炎症刺激、氧化应激以及细胞凋亡等生理或病理状态时产生的肝损伤。另外,白藜芦醇可以通过调节畜禽脂代谢,改善生长育肥阶段容易出现的非酒精性脂肪肝所导致的肝损伤。作者综合了白藜芦醇对畜禽肝损伤保护作用的研究进展,简述了白藜芦醇的理化性质和相关生物学功能,如抗炎、抗氧化、抗细胞凋亡,同时介绍了畜禽常见肝损伤的主要类型和病理途径,并分析了白藜芦醇对畜禽常见肝损伤保护机制和相关信号通路,以期为白藜芦醇通过改善畜禽常见肝损伤、提高畜产品品质提供依据,为探究白藜芦醇成为一种新型优质的饲料添加剂的可能性提供理论支撑。     

葡萄细胞培养生产白藜芦醇的研究

以巨峰和红地球葡萄的不同组织为试材,利用不同培养基对其愈伤组织进行诱导,测定愈伤组织中的白藜芦醇含量.结果表明:在B5基本培养基附加6 mg/L NAA和0.6 mg/L 6-BA的培养条件下,巨峰葡萄果皮愈伤组织的诱导率最高,达87%.愈伤组织中白藜芦醇的含量均高于其对应外植体中的含量,其中巨峰葡萄果皮愈伤组织中的白藜芦醇含量最高,达11.184 μg/g.经6次继代培养可诱导出生长势强、白藜芦醇含量为14.296 μg/g的巨峰葡萄优良愈伤组织.