超临界流体萃取红芝三萜化合物

采用超临界流体设备,以ＣＯ２为萃取剂,从野生红芝子实体中萃取灵芝三萜化合物。分析了ＣＯ２密度、温度、时间及改性剂（甲醇）对红芝三萜化合物萃取的影响。     

灵芝多糖含量检测条件及其提取工艺的优化

优化了苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量的显色条件,并且通过单因素和正交试验确定了灵芝多糖的最佳提取工艺条件。结果表明：苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量的条件为最大吸收波长490 nm,显色时间20 min,显色温度100℃;灵芝多糖的最佳提取工艺条件为提取温度80℃,提取时间2.5 h,液料比50 ml/g,在此条件下灵芝多糖的提取率为2.58%。     

观赏灵芝高产栽培技术研究

以美国大灵芝为试验材料,探讨了灵芝栽培时的接种量、培养料、每袋培养料装量、专用肥加用量、栽培方式和培养料C/N与产菇的关系.结果表明,接种量为30袋时灵芝产量最高;灵芝产量高低与每袋培养料装量成正相关(培养袋越大,产量越高);后期专用肥的施用会使灵芝增产;半覆七及覆土栽培要比传统的袋培增产,其中覆土增产更为明显,增产24.9%,而且成熟期比传统袋培提前了5～10 d;C/N低的培养料(添加占培养料5%的牛粪)要增产24.8%.     

灵芝lz-8基因乳酸菌表达载体的构建与表达及免疫特性

克隆灵芝Iz-8基因并进行原核表达,通过动物试验检测其生理活性.根据GenBank公布的Iz-8基因的DNA序列设计引物,从灵芝菌丝中提取灵芝总DNA,PCR扩增k-8基因并连接到乳酸菌食品级表达载体pNZ8149,转化乳酸乳球菌NZ3900,于30℃Nisin诱导3h,SDS-PAGE进行蛋白表达分析.将工程菌菌悬液给小鼠灌胃,对其碳廓清试验等免疫指标进行检测.结果表明:扩增到的Iz-8基因序列全长330 bp,构建了原核表达载体pNZ8149-Iz-8,LZ-8蛋白在NZ3900中得到表达.NZ3900/pNZ8149-Iz-8菌悬液对小鼠各项免疫指标有明显的调节作用.     

女贞子红色素的微波辅助提取工艺及稳定性分析

采用微波辅助提取法从女贞子(Ligustrum lucidum Ait.)中提取红色素,通过单因素试验和正交试验设计确定了最佳提取工艺条件,并对女贞子红色素的理化性质进行了进一步研究。结果表明,女贞子红色素微波辅助提取的最佳工艺条件是以体积分数为30%的乙醇溶液为提取剂,微波功率600 W,微波处理时间40 s,浸提温度40℃。该红色素在酸性条件下稳定性良好,对添加剂、还原剂、光照、金属离子(Al3+、Fe2+、Ca2+、Mn2+、Ni2+)等有较高的稳定性,但它的抗氧化性较弱。     

紫外分光光度法快速测定龙泉破壁灵芝孢子粉三萜含量

选取5种龙泉破壁灵芝孢子粉为研究对象,使用紫外分光光度法,建立了一种快速、简单、高灵敏度,专门针对灵芝孢子粉中三萜测定的方法。结果表明,该方法测得龙泉破壁灵芝孢子粉三萜含量为2.94%~3.43%。熊果酸浓度在20~140μg范围内呈良好的线性关系,精密度(RSD)为0.88%,回收率为88.6%~92.5%,完全能够满足于破壁灵芝孢子粉中三萜成分的分析研究。     

灵芝原生质体单核化育种

由于灵芝孢子难于在人工条件下萌发,无法获得灵芝育种所需的单核菌株,这使灵芝的育种进展缓慢。本实验利用生物统计软件和分子生物学方法,选择遗传距离较远和农艺性状互补的G.l0006 、G.l0012、G.l0024、G.l0030+2和G.l0003+1作为亲本菌株,通过原生质体单核化,获得了81株灵芝单核菌株,以此为材料进行杂交育,成功获得了24株杂交种,通过拮抗反应验证,证明它们确实是杂交菌株。     

11个灵芝菌株的栽培性状和酯酶同工酶研究

利用短段木熟料栽培法对11个灵芝菌株进行栽培，结果表明：不同灵芝的栽培性状互有差异。其中8、新6、6、12、13具较好的栽培性状（产量高、子实体形状好、产孢量大）。此外，通过PAGE分析，并分别测定相关的酶谱相似度（T）和联合系数（S），结果发现：S1与其余各菌株间的差异最为明显。与其它菌株的亲缘关系最远；亲缘关系最近的是6新6、新6C1、13C3（T，S值最大，T＝1，S＝1，6、新6、C1三菌株酶带数量和位置一样，但酶活性存在区别）；另外具有较好栽培性状的菌株（8、新6、6、12、13）其酶活性都较强，表现为酶带宽且色深。     

Plackett-Burman设计法筛选影响灵芝富锌能力的主要培养基组分

[目的]筛选出影响灵芝富锌率的关键营养因素,从而为进一步的优化分析提供实践基础与理论指导。[方法]在对16种营养物质进行单因素试验的基础上,进一步利用Plackett-Burman设计法筛选出影响灵芝富锌率的关键营养因素。[结果]从16种营养物质中筛选出玉米粉、豆粕和KH2PO4是影响灵芝富锌能力的主要因素,其较优水平为玉米粉35.0g/L、豆粕7.0g/L和KH2PO41.0g/L。在以上述3种营养物质作为培养基组分的条件下,灵芝富锌率最高可达25.1%。[结论]利用Plackett-Burman设计法筛选出的关键营养因素,提高了灵芝富锌率,证明了该方法经济有效。     

不同灵芝主要活性成分差异性分析

[目的]为灵芝分类鉴定及其药用成分的合理利用提供科学依据。[方法]比较不同灵芝菌株（德昌1号、德昌3号、德昌4号、黑芝、血芝、灵芝）的多糖及三萜化合物含量,并采用HPLC法分析不同灵芝菌丝体和子实体中三萜化合物的组分。[结果]子实体多糖含量由高到低依次为：灵芝、德昌3号、黑芝、血芝、德昌1号,三萜含量由高到低依次为：血芝、德昌1号、德昌3号、黑芝、灵芝;不同灵芝菌丝体所含三萜化合物的种类存在差异,同一灵芝菌丝体和子实体所含三萜化合物的种类存在一定的相似性。[结论]灵芝多糖含量与三萜化合物含量之间不存在必然联系。