不同激活方法对小鼠卵母细胞孤雌发育及二倍体形成的影响

卵母细胞的孤雌激活是研究哺乳动物受精机制和发育机理的有效方法,也是细胞核移植、显微注射受精技术、孤雌胚胎干细胞等研究内容中的重要环节。本试验分别用乙醇、SrCl2、钙离子载体A23187对小鼠卵母细胞进行单独孤雌激活,并分别与6-DMAP联合运用,对小鼠卵母细胞进行联合孤雌激活。结果显示：（1）不同激活剂单独或联合激活,对卵母细胞的激活率有显著影响（P〈0.05）,SrCl2组的激活率最高（92%～94%）;（2）相同激活剂对卵母细胞孤雌囊胚的发育率在单独激活组（SrCl2组,18%）和联合激活组（SrCl2＋6-DMA组,53%）中存在显著差异（P〈0.05）;（3）相同激活剂对卵母细胞二倍体率在单独激活组（钙离子载体A23187组,21%）和联合激活组（钙离子载体A23187＋6-DMA组,77%）中均存在显著差异（P〈0.05）。结果表明：（1）SrCl2可以对小鼠卵母细胞进行有效的孤雌激活;（2）联合激活法可以显著提高孤雌卵母细胞的囊胚发育率;3、6-DMAP可以抑制第二极体排出,显著提高孤雌激活卵母细胞的二倍体率。     

中华蜜蜂产生二倍体雄蜂的生物学研究

对中华蜜蜂产生二倍体雄蜂的生物学研究表明,在高度近亲繁殖(兄妹交配的蜂王)条件下,中华蜜蜂产生二倍体雄蜂,二倍体雄蜂的成虫率高于西方蜜蜂和印度蜜蜂,形态特征和生物学特性与单倍体雄蜂存在明显差异。中蜂二倍体雄蜂排精量少,精子密度低,精子总数少,精子活力较差,死精率高。     

长牡蛎二倍体和三倍体外套膜的差异

本文从外观、组织切片、蛋白质和糖元含量等方面分析了长特蛎二倍体和三倍体外套膜的差异。与二倍体相比,三倍体外套膜厚、不透明、呈乳白色、结弱组织较厚,糖原含量高３．９倍。     

马铃薯4x-4x和4x-2x杂种后代高世代选系总产和商品薯产量比较

传统的4x-4x杂交方法很难进一步提高马铃薯（Solanum tuberosum L.）产量,倍性操作育种技术为提高马铃薯产量提供了新途径。试验比较4x-4x和4x-2x杂种后代高世代选系总产、商品薯产量的差异,探讨利用倍性操作育种的可能性。从4x-4x和4x-2x组合根据块茎性状和产量各选出17个高世代无性系,按随机区组设计,3次重复,在黑龙江省加格达奇比较两种组合类型高世代选系总产和商品薯产量的差异。4x-4x和4x-2x组合后代高世代选系在总产量方面无差异,但从4x-2x组合中可以选出更多的高产无性系。4x-2x组合高世代选系商品薯产量显著低于4x-4x组合,这主要是由于4x-2x组合后代选系单株结薯多,但单薯重低。采用4x-2x组合方式育种可有效利用具有丰富遗传变异的二倍体种质资源,但要注意在二倍体水平上选择,重点改良二倍体种或二倍体杂种对长日照的适应性,以及块茎性状,提高大薯率。     

二倍体马铃薯原生质体培养与植株再生

原生质体培养是体细胞杂交的基础,同时也是获得变异材料的重要手段。以引进的4个二倍体马铃薯为材料,研究了渗透浓度、酶液组成、酶解时间及材料预处理对原生质体产量和活力的影响。结果表明:预处理是原生质体成活、分裂及后期发育的重要条件,处理D预处理效果最好,原生质产量和活力最高,且有较多细胞分裂;马铃薯原生质体适宜的渗透浓度为0.35~0.40mol·L-1;RH2和RH3酶解时间以4h为宜,RH1和RH4酶解时间以4.5h为宜;酶解液为2.0%纤维素酶和0.2%果胶酶的混合液。基因型对原生质体培养影响较大。经过培养,有2个二倍体材料获得了再生植株。     

长江中下游二倍体泥鳅4个种群的遗传多样性

利用12对微卫星引物对长江中下游4个二倍体泥鳅野生种群的遗传多样性进行了分析.结果表明:12个微卫星位点在武汉、洞庭湖、鄱阳湖和太湖4个种群中总共检测到64个等位基因,每个位点的等位基因数为2～11,平均等位基因数为5.3.每个种群的平均等位基因丰度(AR)为3.502～4.615,平均观测杂合度(HO)为0.395～0.517,平均期望杂合度(HE)为0.360-～0.515,平均多态信息含量(PIC)为0.332～0.465,说明4个种群表现出中度的遗传多样性.在12个位点中有4个偏离Hardy-Weinberg平衡(HWE),每个种群均不同程度偏离HWE,表现为杂合子不足.种群间遗传分化系数(Gsr)为0.118,15.74%遗传变异源于种群间差异,表明种群间存在中度遗传分化.种群间遗传距离(D)为0.067～0.206,太湖与鄱阳湖种群间遗传距离最大.聚类分析表明,洞庭湖与鄱阳湖种群聚为一支、亲缘关系较近,武汉种群与太湖种群聚为另一支.     

Staurosporine 对人低分化鼻咽癌细胞系细胞周期和 DNA 倍体含量影响的动态观察

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡时,对细胞周期的选择性和对ＤＮＡ含量及细胞周期的动态影响。方法：以ＰＫＣ催化区抑制剂ＳＴ作用于ＣＮＥ－２Ｚ细胞不同时间后,收集细胞进行ＰＩ染色和流式细胞仪检测。结果：ＳＴ以２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ终浓度分别作用至３,６,１２,２４ｈ后,发现Ｇ２期百分比分别为３０．４３±７．１６、３０．８３±６．２５、４２．４３±３．９８和７１．８０±７．５５,均较对照组１２．０８±３．４９增高明显。比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;而Ｇ１期在３,６,１２,２４ｈ分别为３４．７０±１．５６,３７．０３±６．４７,１６．６３±１．７７和１５．３０±５．４６,均较对照组６２．５６±６．５７明显降低,比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。亚二倍体峰百分比在１２、２４ｈ分别为３７．１０±７．２１和４３．７２±６．７３,均较对照组９．８１±１．７８显著增加（Ｐ＜０．０１）;而１２ｈ以前该峰增加不明显。结论：ＳＴ在终浓度为２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞至１２ｈ后即可出现明显的ＤＮＡ含量降低的凋亡细胞,对Ｇ２期细胞敏感而使之逐渐阻滞,且存在     

二倍体马铃薯StBRC1a功能缺失突变体的获得及其功能分析

为研究二倍体马铃薯TCP转录因子基因StBRC1a的功能,在二倍体马铃薯Solanum tuberosum group phurejaS15-65中对StBRC1a进行了克隆,发现StBRC1a有两个不同长度的转录本,分别命名为StBRC1a^L与StBRC1a^S。序列分析后发现,二者均具有TCP转录因子家族特有的由59个氨基酸组成的非典型碱性—螺旋—环—螺旋(bHLH)结构域及1个R结构域。通过构建系统演化树发现,StBRC1a^L和StBRC1a^S与番茄的SlBRC1a具有最近的亲缘关系,同属于CYC/TB1类TCP转录因子。组织特异性表达分析的结果表明StBRC1a^L与StBRC1a^S在腋芽中特异性的高表达。通过CRISPR/Cas9系统构建StBRC1a功能缺失的纯合突变体后发现,与野生型相比突变体植株表现为分枝显著增多的表型,说明StBRC1a对于二倍体马铃薯的分枝具有抑制作用。     

二倍体泥鳅×四倍体泥鳅F_1不同发育阶段染色体核型分析

以中国长江流域天然四倍体泥鳅为父本,大连农贸市场二倍体泥鳅为母本,通过倍间杂交获得杂交三倍体泥鳅,对早期胚胎、6月龄及12月龄染色体核型进行初步分析。结果表明,早期胚胎整3倍体染色体数目为3n=75,核型为16M+7SM+52T,NF=98,亚三倍体染色体数目为3n=73,核型为15M+6SM+52T,NF=94,超三倍体染色体数目为3n=76,核型为16M+6SM+54T,NF=98;6月龄整三倍体染色体数目为3n=75,核型为15M+6SM+54T,NF=96,亚三倍体染色体数目为3n=72,核型为15M+6SM+51T,NF=93,超三倍体染色体数目为3n=77,核型为15M+6SM+56T,NF=98;12月龄整三倍体染色体数目为3n=75,核型为12M+8SM+55T,NF=95;亚三倍体染色体数目为3n=71,核型为16M+6SM+49T,NF=93,超三倍体染色体数目为3n=76,核型为18M+8SM+50T,NF=102。结果表明,二倍体泥鳅×四倍体泥鳅杂交后代是含有三套染色体组的三倍体,不同发育阶段整三倍体染色体数目相同,均为3n=75,但染色体核型表现多态性。非整倍体(超三倍和亚三倍)中增加和缺少的染色体数目及类型无规律可循。     

小白菜杂交组合配制及自交系选育试验研究

把小孢子培养获得的22个小白菜加倍二倍体（DH）纯合植株分为 A、B两组进行组间杂交以及自交,对获得的41份杂交组合的叶片形状和叶柄色等外观品质性状进行观测分析,并对相应数据进行聚类分析,结合植株的田间表现,筛选出优良的杂交组合和亲本。结果表明：1）两个相同亲本的正反交组合外观商品性状可能存在差异;2）6个抗性强、耐衰老的杂交组合,其单株产量均高于0.4 kg,属于商品性状优良的杂交组合,其中A7 B2可作为特色分蘖组合;3）筛选出 A2、A5、A7、B6、B8、B9、B10、B118份骨干亲本自交系,以及 A1、A3、A9、B2和B75个特殊配合力高的亲本。