华山松腐烂病及防治研究

在查清华山松腐烂的病原,首次找到其有性型,在初步掌握病害的侵染循环、危害情况和部分防治试验的基础上,提出了相应的防治措施。     

云南省华山松腐烂病病原学初步研究Ⅱ病原生物学特性

 病原菌生物学特性研究表明:温度对松黑腐皮壳子囊孢子萌发的快慢有影响,以25℃为好,但5～30℃范围内,60h最终萌发率均可达80%以上;相对湿度必须达100%,孢子才能萌发;pH值3～8孢子都可以萌发,以pH为5萌发率最高;全光照与持续黑暗的萌发率相近。分生孢子,在各种实验条件下无一萌发。     

苹果树腐烂病菌T-DNA插入突变体表型及致病突变体研究

【目的】筛选苹果树腐烂病菌T-DNA插入表型或致病突变体,为研究该病菌的表型及致病相关基因提供起始材料。【方法】从建立的T-DNA插入突变体库中,随机挑选230株突变体菌株进行表型观察及致病性测定,并对部分致病突变体进行TAIL-PCR侧翼扩增。【结果】大部分的突变体与野生型菌株03-8在表型及致病性方面无明显差异,仅30.87%的突变体表现出了明显的变化;其中16株突变体(占突变体总数的6.95%)致病性发生了明显的增强,而表型与03-8相比无明显的变化;20株突变体(占突变体总数的8.69%)致病性与03-8无显著性差异,但是表型发生了明显的变化;16.1%的突变体则同时表现出表型及致病性的显著差异,其中28株表现为致病性显著降低,7株致病性丧失。通过对15株致病突变体侧翼序列的扩增,获得了7条T-DNA侧翼序列,其中突变体X912的侧翼序列被注释为黄曲霉(Aspergillus flavus)阿魏酸酯酶B前体。【结论】获得了多个不同的苹果树腐烂病菌表型或致病突变体,为研究该病菌的生长发育及致病相关基因奠定了良好的基础。     

黑腐皮壳属一新种

本文报道采自柳杉(Cryptomeria fortunei Hooibrenk ex Otto et Dietr.)枝干上的黑腐皮壳属一新种:有性阶段命名为柳杉黑腐皮壳菌(Valsa fortunea Zhao, Sheng et N. Li sp. nov.);无性阶段为柳杉壳囊孢菌(Cytospora fortunea Zhao, Sheng et N. Li sp. nov.),并对其形态特征做汉文和拉丁文描述。同时,讨论了新种与其它已知相近种的区别。模式标本存于西南林学院植物病理标本室(HSFC 15206模式)。     

大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病抑菌活性初步研究

探索大戟狼毒的杀菌活性及活性成分,为新型植物源杀菌剂的研制和开发提供依据,以苹果树腐烂病原菌为供试菌种,用生长速率法测定了大戟狼毒石油醚提取物的对病原菌的抑制率。结果表明:大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病菌病原菌丝生长有一定的抑制作用。其中提取物为2 g.L-1的稀释液对苹果树腐烂病菌病原菌丝生长的抑制作用最好,抑制率最高达到94.0%。大戟狼毒提取物对苹果腐烂病菌具有很好的防治效果,极具有开发潜力。     

植物Gly-RLK基因家族鉴定及其在苹果中的表达分析

类受体激酶(receptor like kinase,RLK)在植物生长发育和环境适应中起重要作用。前期研究发现苹果(Malus′domestica)中存在一类具有Glyco₁8胞外结构域(SM000636或SM000704)的RLK,命名为Glyco₁8-RLK(Gly-RLK)。本试验中以Glyco₁8和Pkinase(SM000220)保守域全蛋白序列为种子序列,对53种被子植物基因组中的Gly-RLK进行鉴定,并分析其进化特征;明确苹果Gly-RLK(MdGly-RLK)的理化性状、亚细胞定位,基因在染色体上的分布、启动子区域的顺式作用元件和表达模式。结果表明,仅19种植物中存在Gly-RLK,家族成员数介于1～20,单子叶植物中均未发现该家族成员。根据进化分析将其分为8个亚组,亚组Ⅲ、Ⅶ和Ⅷ分布基因数较多。共发现6个MdGly-RLK,其编码的氨基酸序列大小、分子量和等电点分别介于451～776、50.99～87.33 kD和5.95～8.21,主要位于质膜,4个为串联重复。MdGly-RLK在苹果各组织和品种...     

用螺旋毛壳(Chaetomium spirale) ND35菌防治果树腐烂病的试验研究

报道了在离体和田间条件下螺旋毛壳(C. spirale) ND35菌株对苹果树腐烂病的初步抑菌试验结果.PDA平板对峙培养的结果显示在毛壳ND35和苹果树腐烂病菌的两菌落间出现明显的抑菌带;毛壳ND35培养液粗提液比麦芽浸膏培养液的粗提液有更强的抑制病菌菌丝生长的作用.温室和田间生防试验表明用接种毛壳ND35的处理,其苹果树腐烂病发病率明显低于其它处理,包括直接种苹果树腐烂病菌和烫伤处理,及健康对照.再分离试验表明毛壳ND35可成功地在苹果树枝干部位定殖,而且固体麦麸菌剂的定殖率高于玉米粉液体菌剂的定殖率.但是玉米粉液体菌剂在田间的生防效率较好.     

苹果属种质资源抗腐烂病性状鉴定研究

在1983年接种方法研究的基础上,于1985—1987年采用人工田间砸伤接种法,对苹果属17个种的26个类型(种群)、2个变种、3个品种和4个杂交种,共35份种质资源材料进行抗腐烂病的系统鉴定,经3年重复,鉴定出高抗级种质资源7份,一般抗2份,中抗2份,其它均为感病各级的资源。其中值得重视的是东北黄海棠种质材料在高抗中品质最好,适宜作鲜食和加工的资源,又是抗病育种的宝贵抗源。     

苹果树腐烂病菌Zn(Ⅱ)2Cys6类转录因子Vmzctf-07的鉴定及其功能分析

转录因子是真菌生命过程中重要的调控因子,探究转录因子在苹果树腐烂病菌Valsa mali致病过程中的作用,能够为解析病菌致病机理奠定基础。通过构建Vmzctf-07基因的酵母单杂交和亚细胞定位表达载体,进行转录激活域验证和亚细胞定位分析;通过创制Vmzctf-07基因缺失突变体和回补菌株,进行生长速率、非生物胁迫和致病力测定。结果表明,Vmzctf-07具有转录激活功能,转录激活域可能存在于down区段（aa 1 455~aa 1 644）。Vmzctf-07定位于细胞核中,符合转录因子典型特征。Vmzctf-07敲除突变体的生长速率和致病力均显著下降,同时该基因参与病菌响应渗透胁迫和氧化胁迫。综上,Vmzctf-07具有转录激活功能和核定位信号,且参与调节V.mali的生长发育、非生物胁迫和致病过程。     

3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-羧酸肟酯衍生物的合成及抑菌活性

为发现具有高抑菌活性的先导化合物,结合本课题组前期研究,设计并合成了18个新型3-二氟甲基-1-甲基吡唑-4-羧酸肟酯衍生物,其结构均经核磁共振氢谱、碳谱及高分辨质谱分析确证,化合物 9g 的单晶衍射结果证明肟酯的构型为E式。离体生物活性测定结果表明,目标化合物在50 μg/mL下对番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea、苹果树腐烂病菌Valsa mali 和小麦全蚀病菌Gaeumannomyces graminis均表现出一定的抑制活性,其中化合物 9d 对苹果树腐烂病菌、 9r 对小麦全蚀病菌的EC₅₀值分别为0.89 μg/mL和3.34 μg/mL,表现出比先导化合物 L1 (E-2-氯-6-氟苯甲醛-O-(1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-5-羰基)肟)和肟菌酯更优或相似的抑菌活性。