一种大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)纯营养菌丝的培养方法

比较了胡萝卜琼脂和玻璃纸胡萝卜琼脂培养大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)对菌丝生长速度、卵孢子产生、孢子囊产生时间及RNA提取效果的影响。结果表明,玻璃纸胡萝卜琼脂培养的大豆疫霉菌,10 d内不会产生卵孢子,当大豆疫霉菌从玻璃纸上取下时,不会带有培养基,能够提取出高质量的RNA,满足差异显示反转录PCR对RNA质量的要求,是一种适合大豆疫霉菌纯营养菌丝的培养方法。     

蒲菜叶总黄酮提取工艺优化研究

通过正交试验,研究了蒲菜叶总黄酮水提法和醇提法,并优化了醇提法提取工艺。结果表明:蒲菜叶总黄酮提取以醇提法为宜,其最佳提取工艺条件是料液比1∶40、用70%乙醇作提取溶剂、回流提取3 h、连续提取3次。     

不同海拔川滇高山栎灌丛非结构性碳水化合物和氮含量变化研究

[目的]探讨不同季节川滇高山栎灌丛非结构性贮藏碳水化合物（NSC）和全氮含量与海拔的响应关系。[方法]选择川西折多山分布广泛的川滇高山栎灌丛为对象,研究了不同海拔梯度生长季节植株各组织NSC和全氮含量的变化。[结果]川滇高山栎地下组织NSC含量在休眠期表现出随海拔升高而降低的趋势,但在萌动初期、生长旺盛期和生长末期整体上表现出随海拔升高而升高的趋势;地上部分各组织NSC含量在不同季节对海拔的响应表现出非线性,无明显变化规律。休眠期川滇高山栎各组织全氮含量整体上随海拔升高而降低,而其他时期变化不一致。另外,川滇高山栎地下组织NSC对温度变化更为敏感。[结论]为探索林下植物适应高山环境的生理生态机制及其对全球气候变化的响应和加强对高海拔地区生态系统的调节能力提供了理论依据。     

野生豆腐柴总黄酮及微量元素的测定

采用分光光度法和原子吸收测定法,分别对秦巴山区野生豆腐柴中的总黄酮及铁、钙、锌、镁、铜5种微量元素进行了测定。结果表明:秦巴山区野生豆腐柴含总黄酮为6.06%;含5种微量元素为Ca 12 574μg/g、Fe 1 830.5μg/g、Mg 4 312.5μg/g、Zn 41.5μg/g、Cu29.5μg/g。截至目前,豆腐柴中总黄酮及微量元素含量的测定尚未见有类似的报道,故这一测定结果对开发利用豆腐柴这一野生资源起着重要作用。     

赤霞珠葡萄叶不同溶剂萃取物抗氧化活性

研究赤霞珠葡萄叶不同溶剂萃取物中黄酮和总酚的含量及抗氧化活性。用不同极性溶剂依次对赤霞珠葡萄叶φ=95%乙醇粗提物进行萃取,分别得到石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物及经大孔树脂φ=70%乙醇洗脱物。测定不同萃取物中黄酮和总酚的含量,研究不同萃取物对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基(O2-[KG-*3/4]·)的清除能力及还原力,并与BHT进行比较,评价其抗氧化活性。赤霞珠葡萄叶不同溶剂萃取物均具有一定的抗氧化活性,且随着浓度的增加而增强。φ=70%乙醇洗脱物和乙酸乙酯萃取物均具有较强的抗氧化活性,其清除 DPPH自由基和O2-[KG-*3/4]·的 IC₅₀分别为（0.017±0.001）、（0.023±0.001） g/L和（0.174±0.007）、（0.222±0.003）g/L,高于BHT。相关分析表明,不同溶剂萃取物中黄酮、总酚含量与抗氧化能力具有相关性。赤霞珠葡萄叶萃取物具有很好的抗氧化活性,不同溶剂萃取物对抗氧化活性有很大影响。     

利用RNAi技术抑制籽粒PPO合成改良小麦面粉白度的研究

【目的】通过RNAi策略抑制小麦籽粒ppo的表达,获得籽粒PPO酶活性低、白度高的转基因小麦新种质。【方法】构建了以小麦胚乳特异表达启动子1Dx5启动子驱动的籽粒ppo的RNAi载体pBAC47P-ppoIR,利用基因枪将该载体与含bar的表达载体基因枪共转化中优9507幼胚愈伤组织,获得T0转基因植株。通过分子鉴定（PCR、Southern杂交、半定量RT-PCR、Northern杂交）、酶活筛选和白度测定等方法对转基因植株及其后代株系进行筛选。【结果】获得了27株阳性T0转基因植株。转基因植株及其后代经PCR和Southern杂交检测表明,RNAi构件已经稳定整合到T1的12个株系中。半定量RT-PCR和Northern杂交结果表明有20株T2籽粒中ppo表达水平明显低于对照。对转基因T2灌浆期籽粒进行PPO同功酶活性分析表明,有6个株系的PPO活性有所减弱。对T4籽粒的面片白度测定表明,5个株系的白度均比对照有所提高,其中2个株系效果显著。【结论】RNAi技术的表达能抑制籽粒ppo表达,降低PPO同功酶的活性,明显提高小麦面片白度,从而为小麦面粉白度的改良、品质育种提供了材料。     

褐飞虱Kruppel homolog-1基因对FAMeT和JHE表达的影响

[目的]探究褐飞虱Kruppel homolog-1(Nlkr-h1)基因的锌指结构特点以及对FAMeT和JHE表达的影响,了解Nlkr-h1的调控作用。[方法]通过MEGA5.0分析Nlkr-h1的功能功域每个锌指结构的进化树,并采用qPCR技术测定Nlkr-h1干扰后FAMeT和JHE的表达情况。[结果]Nlkr-h1的功能区域主要包括8个锌指结构,其中Zn1和Zn8的保守性相对较低。在褐飞虱Nlkr-h1基因被敲除的褐飞虱中,发现保幼激素合成酶基因FAMeT和代谢酶基因JHE表达量升高。[结论]为了解保幼激素信号通路分子机理以及褐飞虱的生物防治提供了理论依据。     

ES-D3细胞nanog基因干扰载体的构建 及其干涉效果*

选择ES细胞nanog基因中4个区域合成寡聚核苷酸,构建了4个含有小鼠U6启动子的siRNA（小分子干涉RNA）表达载体并瞬时转染小鼠ES-D3细胞.半定量RT-PCR分析显示,所构建的4个siRNA表达载体中有3个可以在细胞内转录出siRNA或shRNA（短发夹RNA）,诱发RNA干涉（RNAinterference,RNAi）,能显著抑制目的基因nanog的表达;同时发现,干扰的ES-D3细胞生长48 h后,集落形态与未干扰细胞相比差别不大,但隆起不如后者明显,形态也不如后者规则,生长速度也较慢,AKP染色阳性,与未转染细胞相比没有差别.     

洞庭湖区不同土地利用方式耕作土壤氮素含量与循环

通过对洞庭湖典型地区的密集采样分析和农户调查,研究了4种利用方式耕作土壤全N、微生物生物量氮(MB-N)含量、两者关系和N素循环特征。结果表明:耕作土壤全N、MB-N含量平均值为3.00±0.48g/kg和101.4±49.2mg/kg。双季稻、一季稻、水田旱作和旱地全N平均含量依次为3.12±0.40g/kg、3.03±0.39g/kg、2.79±0.43g/kg2、.10±0.46g/kg。4种利用方式的MB-N含量分别为124.0±56.6mg/kg、96.4±39.2mg/kg、108.0±48.6mg/kg、75.2±30.5mg/kg。除水田旱作外,MB-N与全N之间存在极显著的正相关关系(P<0.01)。土壤N素盈余量依次为双季稻(105.0kg/hm2.a)>一季稻(75.1kg/hm2.a)>水田旱作油菜(64.5kg/hm2.a)>旱地苎麻(51.9kg/hm2.a)。     

Belowground carbon allocation patterns in a dry Mediterranean ecosystem: A comparison of two models

Total belowground C allocation (TBCA) accounts for a large fraction of gross primary production, it may overtake aboveground net primary production, and contributes to the primary source of detrital C in the mineral soil. Here, we measure soil respiration, water erosion, litterfall and estimate annual changes in C stored in mineral soil, litter and roots, in three representative land uses in a Mediterranean ecosystem (late-successional forest, abandoned agricultural field, rain-fed olive grove), and use two C balance approaches (steady-state and non-steady-state) to estimate TBCA. Both TBCA approaches are compared to assess how different C fluxes (outputs and inputs) affect our estimates of TBCA within each land use. In addition, annual net primary productivity is determined and C allocation patterns are examined for each land use. We hypothesized that changes in C stored in mineral soil, litter and roots will be slight compared to soil respiration, but will still have a significant effect on the estimates of TBCA. Annual net primary productivity was 648 ± 31.5, 541 ± 42.3 and 324 ± 22.3 g C m⁻² yr⁻¹ for forest, abandoned agricultural field and olive grove, respectively. Across land uses, more than 60% of the C was allocated belowground. Soil respiration (F_S) was the largest component in the TBCA approaches across all land uses. Annual C losses through water erosion were negligible compared to F_S (less than 1%) and had little effect on the estimates of TBCA. Annual changes in C stored in the soil, litter layer and roots were low compared to F_S (16, 24 and 10% for forest, abandoned agricultural field and olive grove, respectively), but had a significant effect on the estimates of TBCA. In our sites, an assumption that Δ[C_S + C_R + C_L]/Δt = 0 will underestimate TBCA, particularly in the abandoned agricultural field, where soil C storage may be increasing more rapidly. Therefore, the steady-state model is unsuited to these Mediterranean ecosystems and the full model is recommended.