蛹虫草TTC-脱氢酶测定方法的优化

TTC-脱氢酶还原法可用于检测和鉴别优良及退化蛹虫草菌株。这一方法的应用依赖测定参数的优化。本文优化了蛹虫草TTC-脱氢酶的测定方法,结果显示:测定蛹虫草TTC-脱氢酶活性时,培养6d的蛹虫草菌液先以生理盐水洗涤4次后配成0.15g/mL的待用菌液;反应缓冲液为Tris-HCl,最适pH值为8.4;最适反应温度为37℃、最适反应时间为3h。酶促反应完成后无需加终止剂,立即将样品放置冰上,4℃离心再以无菌水洗2次,用无水乙醇萃取便可测定吸光度得到脱氢酶活性。本文优化的蛹虫草TTC-脱氢酶活性检测方法具有测定结果稳定可靠、重现性好、准确度高、操作方便等优点。     

广州相思子和毛相思子种子活力TTC测定方法研究

通过对广州相思子(Abrus cantoniensis Hance)和毛相思子(Abrus mollis Hance)种子在4种TTC溶液浓度、3种预湿方法、3个染色温度下进行活力测定的研究,确定了广州相思子和毛相思子种子TTC法活力测定的最佳条件.研究结果表明,种子在30℃恒温下水浸种5～6 h,或纸间浸湿12h,种子充分吸胀后剥去种皮,置于1.0% TTC溶液中,在30℃恒温暗光条件下染色5 ～6h,观察表面,以全染为正常鲜红色(或毛相思子允许染色略淡的红色)为有生活力的种子.     

芦笋雌雄株鉴定方法初探

芦笋(Asparagus officinalis L.),又名石刁柏、龙须菜,属百合科天门冬属多年生草本植物.芦笋嫩茎营养丰富,脆而多汁,风味独特,是一种具有较高药用、营养和保健价值蔬菜.近几年,芦笋已成为"世界蔬菜之王",我国种植面积也逐年扩大.     

Aluminium tolerance mechanisms in Phaseolus vulgaris L.: Citrate synthase activity and TTC reduction are well correlated with citrate secretion

We characterised the physiological mechanisms of tolerance in two bean varieties (Phaseolus vulgaris L. viz. French Bean cv. Amy and Rosecoco (GLP2)) differing in Al tolerance of the varietal level. Root elongation at varying levels of Al over time clearly showed the Al tolerance superiority of Rosecoco over French bean. Aluminium uptake was much higher in French bean, in both root apex and 2 mm region of the root apex. The root cation exchange capacity of the Al-sensitive French bean was markedly higher than that of Rosecoco. Citric acid was the only organic acid whose secretion was stimulated by Al and was higher in Rosecoco than in French bean. The citrate synthase and NADP⁺-isocitrate dehydrogenase activities were apparently higher in Rosecoco than in French bean b1,lt those of phosphoenolpyruvate carboxylase were not significantly different between the two varieties under Al stress. Triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) reduction was greater in Rosecoco and was also well correlated with the citrate secretion. These results suggest the role of TTC reduction and citrate secretion as underlying factors in the Al tolerance mechanism of Rosecoco.     

病圃中烟草疫霉生理小种的鉴定

 烟草疫霉（Phytophthora nicotianae）引起的烟草黑胫病是烟草生产上的毁灭性病害之一,其生理小种的分布与种植品种影响着病害的发生程度, 研究疫霉病菌的生理小种十分重要。本文采用鉴别寄主在田间的抗病反应与采集菌株在TTC固体培养基平板上的颜色变化相结合的方法,对病圃中烟草黑胫病菌小种进行了鉴定。田间抗性鉴定结果表明,鉴别寄主Nicotiana nudicaulis, L8, NC1071,N. plumbaginifolia, MD609, NC95对烟草黑胫病菌表现为抗,N. stocktoii表现为中抗,Barley 21表现感病,结合已报道的8个小种的寄主反应,判断该田块黑胫病菌为0号生理小种,从该大田中随机采集的4个烟草品种潘圆黄、BL-921,CV78-5,K326上的烟草黑胫病菌,根据培养物引起TTC固体培养基颜色变化的情况,分离纯化的4个菌株均显示0号和1号小种的特征,故所鉴定病圃中烟草黑胫病病原为0号生理小种。     

不同播种量对甘肃礼县掌叶大黄育苗质量的影响

通过在甘肃礼县采收三年生掌叶大黄种株种子并采用不同播种量(35,45,55,65,75和85 kg/hm²)育苗,育苗结束后测定苗栽质量指标,移栽定植到大田后定期测定成活率,旨在揭示播种量对掌叶大黄苗栽质量的影响,为其规范化栽培提供依据。结果表明,在甘肃礼县育苗时种子播种量对掌叶大黄育苗质量具有极显著影响,在35 kg/hm²最低播种量基础上,随着播种量的增大育成苗栽数持续增多,苗栽产量先显著提高后下降,但苗栽根长、根粗、单苗重和根系TTC还原强度等个体质量指标均呈降低趋势,播种量为65 kg/hm²时苗栽产量最高,单苗鲜重和根系TTC还原强度减小程度较轻,苗栽综合指标优异,生长健壮,大小适中,产苗数多,移栽成活率高,说明从育苗质量和育苗效益综合考虑,甘肃礼县掌叶大黄育苗适宜种子播种量为65 kg/hm²。     

嗜热链球菌对乳中残留抗生素检测影响因素的分析

[目的]采用嗜热链球菌抑制法,检测牛乳中抗生素残留时指示菌嗜热链球菌,研究菌活力、添加菌量、菌传代数、培养温度、培养时间等因素,对其在多种条件下的生长状况及最低灵敏度的影响进行分析比较.[方法]采用GB/T 4789.27-2008嗜热链球菌抑制法(TTC法)所用嗜热链球菌的菌种纯化、活性、稀释比例、剂量、培养温度、培养时间进行筛选,对阳性,阴性对照结果进行比较,找出最低灵敏度.[结果]新复活的嗜热链球菌其活力逐渐提高,该菌适宜培养温度为37℃,1∶1稀释菌液适宜加入量为1 mL,培养时间2h,牛奶中抗生素残留最低检出限为0.004 IU/mL.[结论]TTC法具有简便、价廉、易于开展的优点,不需昂贵的仪器和设备,不受所检测的抗生素种类所限,各种影响细菌生长的抗生素均可检出,适用于各奶站及牛乳检测机构的抗生素残留检测.     

黄瑞香种子生活力测定技术研究

根据种子生活力的2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色机理,探讨了染色温度、时间、种子处理方式对黄瑞香（Daphne giraldii Nitsche）种子胚染色效果的影响,并对不同采种时间的黄瑞香种子生活力进行了测定与比较,以筛选鉴别种子生活力的最佳反应条件。结果表明：黄瑞香种子生活力检测可用如下方法：黄瑞香去除种皮,加入磷酸缓冲液配制成0.5%的TTC溶液,在45℃恒温条件下保持反应6 h,观察胚部染色状态,呈红色者为具有活力的种子,反之为失活种子。采用以上方法对不同采种时间的黄瑞香种子生活力变化情况进行初步研究,确定了当年采收的种子生活力可达到94.5%,贮藏1年和2年后,生活力分别下降了54%和72%。     

TTC染色指数配合Logistic方程鉴定山葡萄种质抗寒性

为了能简便、准确地鉴定山葡萄种质抗寒性,该研究以40份山葡萄种质1 a生休眠期枝条为试材,利用连有图像分析软件的扫描仪对各低温处理下枝段染色图像进行可视化评估,配合Logistic方程建立回归方程,确定其低温半致死温度。结果表明,枝段染色指数随温度降低而下降,染色指数变化规律符合Logistic方程;40份山葡萄种质低温半致死温度在-39.41～-29.75℃范围内,拟合度在0.956 4～0.999 3范围内,种质抗寒性差异明显;各种质低温半致死温度与其平均隶属度及田间萌芽率均呈极显著负相关,相关系数分别为-0.883 03和-0.876 70。研究结果证明TTC染色图像可视化评估配合Logistic方程鉴定山葡萄种质抗寒性可行,同时为山葡萄种质抗寒性评价及抗寒亲本选择提供了简单、可靠的鉴定方法。     

羊草种子生活力测定技术研究

根据种子生活力的氯化三苯四氮唑(TTC)染色机理,探讨了染色温度、时间、种子材料的处理对羊草(Leymus chinensis)种子胚染色效果的影响,以筛选鉴别种子生活力的最佳反应条件;并对不同基因型的羊草种子生活力进行了对比.结果表明,羊草种子生活力检验可以用如下方法,羊草去稃种子,加入磷酸缓冲液配制成0.5%的TTC溶液,在35℃恒温条件下保持反应2～3 h,观察胚部染色状态,呈红颜色者为具有活力的种子,反之为失活种子.本研究建议在生产实际中应将生活力作为评价羊草种子质量的重要指标.